水蛭素提取的方法研究

国外这方面的实验和应用大多有报道。目前在中国还没有广泛使用。我们来看看水蛭素的提取方法。

1、提取水蛭素有效部分

水蛭素主要产生于水蛭的唾液中。水蛭吸血时会分泌血液以防止血液凝固。因此，实践表明，提取水蛭素的最佳部位是头部。我。 p巴斯科娃对比了从水蛭头部、断头身体和整只水蛭中提取的水蛭素，发现从头部获得的水蛭素活性最强，而从整体获得的活性只有头部的一部分，而从水蛭头部获得的活性最高。整个水蛭只是头部的一部分。断头后从体内得到的是假水蛭素，其化学性质与水蛭素相同，但没有抗凝血活性。

2、水蛭素的提取方法

(1)用水混溶的有机溶剂提取：水蛭头提取：将水蛭头剪成碎片，用10倍体积的40%丙酮-水提取两次，每次30分钟。合并提取液，加入1/2体积的809丙酮-水，加冰醋酸调pH 4.3-4.5，离心除去沉淀，用氨水调上清液pH 6.0，40。减压浓缩至原体积的l/10。然后用10%三氯乙酸调节pH至1.8。最后用10倍体积的冷丙酮（-5-0）沉淀水蛭素粗品。

全水蛭提取物：将水蛭粉加入80%冷丙酮，搅拌10分钟，然后加入氯化钠(0.2-0.5mol)和三氯乙酸(0.1-0.4mol/l)，调节pH值至2.5-3.5，搅拌30-60min，倒出上清液，用1/3体积的上述80%丙酮提取一次沉淀。合并两次提取液，加入2倍体积的冷丙酮（-10），沉淀粗水蛭素。

(2)水提取：

将水蛭研磨成细粉，加入0.5摩尔氯化钠溶液，室温搅拌30-60分钟，调节pH至2.0-2.5，升温至70，搅拌15分钟，离心除去残渣。调节上清液pH 6.5-7.0，加入1.5倍体积乙醇，除去沉淀。将上清液在30C至40C下真空浓缩至原始体积的约1/20。浓缩液中加入等体积的丙酮除去沉淀，然后加入4倍体积的冷丙酮（-5至0），使水蛭素粗品沉淀。对于水蛭素的分离，常采用离子交换、凝胶色谱和等聚焦等方法。为了进一步研究，可以分离并提及纯晶体。