绵羊细菌性血红蛋白尿症


1926年Vairter首次报道并记录了细菌性血红蛋白尿。病原体是溶血梭菌。牛的细菌性血红蛋白尿分布广泛,在美国、澳大利亚、新西兰、英国和土耳其均有报道,但很少有人报道羊的血红蛋白尿。中国的张胜民等人于1971年在青海格尔木发现了这种疾病。

2000年11月,青海省格尔木市发生了一起绵羊急性死亡事件。我们去现场收集病料的时候,看到了一个以血尿和肝坏死为特征的病例。尸检显示心包腔积液,约120毫升,胸腔积液,约200毫升。皮肤和全身发黄,肝脏有一个约6 cm的坏死灶,脾脏未肿大,腹腔内有红色液体,约500 ml。对所有器官进行了检查,证明这是由溶血梭菌感染引起的绵羊细菌性蛋白尿,报道如下。

1动物接种

取约1 g坏死肝组织,加入3 ml无菌生理盐水制成乳剂,然后吸取2 ml,注射到一只豚鼠(重约300 g)体内。结果注射后24 h豚鼠死亡,尸检显示局部出血和坏死。坏死扩散到颈部皮下,皮肤呈果冻状,有大量渗出物,呈血状。说明羊坏死肝组织乳剂对豚鼠有致死作用。

2细菌检查

2.1涂片和镜检取坏死肝组织和正常肝组织交界处的接触片。经瑞氏染色和显微镜检查,在肝组织中发现大量两端钝叶大杆菌,并发现一些孢子。孢子位于菌体的一端,比菌体大。

2.2分离培养:从坏死区取一小块肝组织和一小块肺、脾、肾组织,用新鲜肝片接种于VF培养基上,37培养24小时,涂片,镜检。结果:肝组织培养管涂片上生长的大杆菌较多,而肺、脾、肾组织培养管上生长的大杆菌较少。形态与直接涂片相似。培养物在80加热30分钟,然后培养。最后,从肝脏和脾脏中分离出纯净的芽孢杆菌。

2.3培养接种试验:取该菌18 h培养物1 ml,加入等量的5%氯化钙溶液,混匀,取1 ml,肌肉注射于豚鼠(体重300 g),设对照组。对照组豚鼠肌肉注射1毫升不含氯化钙溶液的18小时培养物。结果:注射后的豚鼠在24 h内死亡,尸检变化与之前相同;对照组豚鼠存活了下来。

2.4从该菌培养物中取出毒素17 h,以4 500 r/min离心30 min,取上清液给两只小鼠静脉注射0.3 ml。结果:小鼠注射后20 min开始发病,全身虚脱,1 h内死亡,并伴有血尿。

2.5两株分离出的溶血梭菌细菌特征为:体积大,两端圆形,单个散生,产生部分孢子,孢子比细菌大,革兰氏染色阳性,严格厌氧。一般在厌氧肉肝汤里不生长,在肉肝胃酶消化汤里生长不好。加入新鲜的生肝块,长势良好,产气,有臭味。24小时涂片为繁殖体,48小时孢子,72小时菌体消失,仅留下轻度染色的菌体碎片和裸露的孢子。

3结论

根据细菌和毒素特征,结合尸检,青海省格尔木地区出现血尿、黄疸、肝坏死的死羊为溶血性梭菌引起的细菌性血红蛋白尿症。

由于溶血梭菌类毒素抗原性差,很难预防细菌性血红蛋白尿。目前国内还没有商业化的预防制剂,如何提高疫苗的免疫力还需要进一步研究。

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