蛇毒 病理变化

对蛇毒出血毒素作用机制的研究，首先是从对其病理变化的描述开始的。后来有人用出血性毒素，分离出平滑肌来测定毒素引起的组织胺等物质的释放。对病理变化的描述主要以光学显微镜和电子显微镜的观察为主。根据红细胞从毛细血管中渗出的方式不同，蛇毒及其出血成分引起的毛细血管病变可分为三类。

第一类只破坏毛细血管细胞间的连接，不破坏内皮细胞。红细胞通过松散的细胞连接泄漏并导致出血。富尔顿等人。 (1956) 是第一个用高倍光学显微镜和摄像机研究Agkistrodon 毒液对鸡毛细血管的影响的人。他们发现首先是动脉收缩，然后红细胞一个接一个地穿过血管壁，而没有对内皮细胞造成明显的损伤。在容器壁上没有发现孔洞。他们认为，红细胞外渗是通过破坏的内皮细胞连接造成的。大阪等人。 (1971) 用16mm 电影摄影机记录了出血性毒素HI 对黄绿色铁头蛇毒微循环系统的影响。他们观察到出血性毒素有

终末血管的作用是比较大的血管（200/rni~300/xm）前期剧烈收缩，然后扩张，然后红细胞一个接一个地穿过加宽的内皮细胞缝变形的动作基底膜破裂使红细胞外渗。 Ohsaka发现血管内皮细胞缝的作用是由炎症递质（如组胺、5-羟色胺）的释放引起的，而基底膜的损伤是这种成分对膜的分解作用的结果.

第二种病理变化是蛇毒或其中的出血毒素引起毛细血管内皮细胞破坏，红细胞从被破坏的内皮细胞外渗引起出血。 Ownby 等人。 (1987) 在西方钻石斑点响尾蛇的毒液中使用了出血性毒素，Mckay 等人。 (1970)用巴勒斯坦毒蛇(V. edge ke)的出血毒素研究了毛细血管的出血毒素过程，发现毛细血管破裂和血液成分外渗的过程可分为以下步骤： 扩张内皮细胞的内质网和核腔； 整个内皮细胞肿胀； 内皮细胞破裂； 红细胞外渗。 Ownby 等人。 (1987) 使用从响尾蛇毒液中分离出的出血性毒素HP-IV 研究其对毛细血管的影响，发现它也会通过破坏内皮细胞引起出血。

第三种病变是蛇毒或其中的出血性毒素可同时引起毛细血管内皮细胞连接处和毛细血管内皮细胞的破坏，红细胞通过两种途径外渗。这种变化的一个典型例子是毒蛇毒液对小鼠脑血管的影响。 Sandback（1974）用辣根过氧化物酶进行示踪，观察到该毒素能破坏血脑屏障，不仅能引起血管壁内皮细胞破裂，还能使内皮细胞缝隙增宽，引起出血。免疫酶电镜观察出血毒素AaHI对兔肌肉毛细血管的影响。可见AaHI均匀分布于毛细血管壁，可见内皮细胞破裂。

为了从细胞水平了解出血毒素的作用机制，现在很多人用纯毒素和培养细胞来模拟体内出血毒素和毛细血管壁的作用。用显微镜观察毒素对培养的单层细胞的影响，看是否扰乱了有序的单层细胞，用活细胞计数的方法判断毒素是否具有细胞毒性。这样，可以从两个方面来判断毒素是作用于细胞本身还是作用于细胞连接处。如果毒素对细胞单层有干扰作用而没有细胞毒性，说明它们很可能作用于体内毛细血管内皮细胞的连接处，水解细胞连接处的蛋白质；否则，说明毒素可能作用于细胞膜，导致细胞破裂。 Yashikura（1966）用粗毒和纯化成分HRi、HR2研究了上述问题，发现HRi与粗毒、HR2有不同的作用。魏传宝等。用类似的方法研究了粗毒和纯化成分AaHI、AaHI和AaHI对HeLa细胞、人肾成纤维细胞和草鱼的影响

发现肾组织细胞的作用是非细胞毒性的，不同的毒素对不同细胞系的单层细胞有不同的破坏作用，这可能表明在体内的作用机制也不同。

对出血毒素作用部位有了更清晰的认识。一般认为，出血作用始于毛细血管末端，然后逐渐扩展至较大的动脉和静脉。在研究黄绿色铁头蛇毒中的血液毒素对血管的作用时，也发现在出血后期，小动静脉也会产生出血。逃逸红细胞的范围可以从几个细胞的颗粒到许多红细胞的团块。奎罗亚等。 (1985) 对从巴西长矛鲇鱼的毒液中分离出的出血性毒素HF2 进行了实验，发现该毒素可引起动脉坏死。出血毒素不仅限于注射部位或伤口出血，还可以通过循环系统被吸收，进入各个组织器官，引起心脏、肺、小肠等对出血毒素敏感的器官出血.出血毒素的作用非常迅速，蛇毒引起大鼠局部肌肉出血的时间仅为2分钟。研究出血效应时，动物及其组织的选择一般不需要特别注意，但也有例外。例如，眼镜蛇蛇毒经皮下或肌肉注射后对动物无出血作用，但与黑颈眼镜蛇蛇毒有相同的作用。引起肺出血。这种差异显然是由于眼镜蛇毒与响尾蛇毒和蝰蛇毒出血性毒素的性质不同造成的，但也与受试组织不同有关。眼镜蛇毒中的出血毒素可与酸性多糖肝素形成复合物而失去出血活性。皮肤中有许多类似肝素的粘多糖，故可使其不表现出出血活性。相反，蛇毒中的出血毒素不能与肝素形成络合物，因此不会失去其出血活性。

出血毒素和分离平滑肌的作用，以黄绿色烙铁头粗毒和出血毒素HR、HR2为材料。结果表明，粗毒和HR2可诱导鸽肺和小鼠腹膜细胞释放组胺、5-羟色胺和一些慢反应物质。 HRi虽然也有释放作用，但活性较弱。这些诱导物质如果浓度很高，可以打开体内内皮细胞之间的连接，但基底膜必须被血液毒素破坏才能发挥作用，否则这些物质不能引起红细胞外渗。 HRi的出血作用强于HR2，但诱导释放活性较弱。这种现象可以解释为出血效应是多种因素综合作用的结果。例如破坏基底膜的能力、组胺的诱导等。