蛇毒抗原和蛇毒抗体的血清学反应


蛇毒抗原刺激机体免疫细胞,可使机体产生特异性蛇毒抗体。这种特异性抗体可以在体内与相应的蛇毒抗原结合,产生中和反应,中和毒性,体外也可以发生各种可见反应。由于抗体存在于血清等体液中,所以在进行抗原抗体反应时一般用血清进行检测,因此抗原抗体反应常被称为血清学反应。在蛇毒抗原和抗体的体外反应中,已知的蛇毒抗体可用于检测未知的蛇毒,用于蛇咬伤的早期诊断;已知的蛇毒抗原也可用于检测未知的蛇毒抗体,用于蛇咬伤的流行病学调查和蛇咬伤的回顾性诊断。蛇毒的抗原抗体反应既可以定性检测,也可以定量检测。

(―) 高特异性

眼镜蛇神经毒素只能与眼镜蛇神经毒素抗体结合,不能与五步蛇出血毒素抗体结合。当存在共同抗原时,就会发生交叉反应。例如,五步蛇粗毒不仅可以与五步蛇毒抗体结合,还可以与蕲蛇毒或竹叶蛇毒抗体结合。同样,白花蛇的完全毒液或者竹叶青的完全毒液也可以与五步蛇完全毒液的抗体结合。为避免交叉反应,提高反应的特异性,通常采用单价蛇毒抗血清或种属特异性抗体进行检测,具有较高的特异性。检测采用单克隆抗体血清,特异性高。

(2) 灵敏度

蛇毒抗原抗体反应的灵敏度非常高,纳克(lng=lXl(T9g)甚至皮克(lpg=lXl(T12g))水平的蛇毒抗原可以用特异的蛇毒抗体检测。其中、中心放射免疫法和酶标法灵敏度较高,间接血凝法和间接乳胶凝集法次之,直接凝集法和各种沉淀反应灵敏度较低。

(3) 蛇毒抗原与抗体结合在分子表面

两者的结合是相当稳定的,但却是可逆的。两者可以通过改变条件分离,分离后的蛇毒或蛇毒抗体的性质不变。例如,五步蛇毒与五步蛇抗蛇毒血清结合后毒性被中和,但稀释或改变pH和离子浓度后,两者可解离,五步蛇毒又重新出现毒性。

(4) 按一定的分子比组合

只有当分子比例合适时才会发生可见反应。如果两者的比例不合适,例如毒液抗原或毒液抗体过多时,就不能形成大的复合物,就不会发生肉眼可见的反应。一般认为蛇毒抗原是多价的,即蛇毒抗原分子表面有多个决定簇(determinants),可以与多个抗体分子结合,而蛇毒抗体(完全抗体)是二价的(不完全的)抗体是单价的),即完整的抗体可以结合两个抗原决定簇。因此,毒液抗原与其抗体结合之间存在可变的定量关系。

当抗原与抗体的比例合适时,可形成高分子复合物,并出现可见反应。如果两者比例不合适,即抗体或抗原过量时,不能发生肉眼可见的反应。

(5) 蛇毒抗原与蛇毒抗体的反应过程

反应过程可分为2个阶段:

第一阶段:是蛇毒抗原与相应抗体特异性结合的阶段,特异性结合是由于抗原决定簇与抗体分子的F»b段之间的相互吸引。第一阶段反应很快,几秒到几分钟即可完成。过程中发生能量变化,但没有可见的反应。

第二阶段:是蛇毒抗原抗体反应的可见阶段。在这个阶段,在抗原和抗体特异性结合的基础上,根据环境中不同的伴随条件,可以分别发生间接凝集反应和沉淀反应。第二阶段的反应较慢,需要几分钟甚至几小时或更长时间。但如果参与反应的毒液抗体是不完全抗体,则不会出现肉眼可见的反应;如果参与反应的毒液抗原和抗体的比例不合适,则不会出现可见的反应。此阶段受电解质、温度和pH 值等因素的影响。

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