蛇毒质量的检测与蛇毒的鉴别

蛇毒质量检测主要是鉴别同种蛇毒的优劣。蛇毒的鉴别就是区分不同种类的蛇毒及其真伪。掌握蛇毒的测定和鉴定是蛇毒研究最基本的要求。每种蛇毒都有其特定的性质，我们可以利用这种关系来区分不同蛇种的毒液。某种蛇毒的好坏，是根据某种标准的蛇毒测量标准来判断的。常用的通用标准如下：

(―) 毒性强度

一般毒性测定分为急性、亚急性和慢性毒性三种。蛇毒的毒性强度只需测定急性毒性即可，用于表示其致死率和中毒反应。毒性越大，杀伤力越强；反之亦然。通常，使用小鼠的半数致死剂量LD5。为了表达，小鼠也有完全致死剂量的LD1Q。表示，可以使95100小鼠死亡的量为MLD。其测定方法是选择中毒途径（皮下、腹腔、静脉注射），计算每公斤体重的中毒剂量，注射入体内后，一定时间内能使半数动物死亡的剂量的时间称为LD5。其取值经过统计公式处理，根据LD5。该值的大小决定了毒性的强弱。数值越小，毒性越强；值越大，毒性越小。经测定，我国10种毒蛇的毒液大致强度见表2-9-2。

表2-9-2 我国10种毒蛇毒液强度概略

毒液种类

LD5。 （皮下）毫克/千克

眼镜王蛇毒液

0.34

眼镜蛇毒

0.53

Bungare 毒液

0.09

金环蛇毒液

2.4

蜂蛇毒

1.6

竹青蛇毒

3.3

毒蛇毒

蛇岛Agkistrodon 毒液

2.68

Agkistrodon halys 的毒液

2.98

毒蛇毒

2.0

五步蛇毒

8.9

烙铁头毒液

2.76（腹腔）

扁下巴海蛇毒液

0.52

关于蛇毒毒性强度的实验数据报道较多，差异较大。实验数据受多种因素影响。例如，同一种类的蛇，不同地区、不同产地的毒性可能不同；蛇毒的处理、采毒季节、养殖条件、贮存时间长短、贮藏方法等都会影响毒性。但上表基本可以反映出不同蛇种的毒液强度。银环蛇的毒液最强，五步蛇的毒液最弱。给药途径不同，LD5。价值观也不一样。顺序是腹腔毒性最小，静脉次之，肌肉次之，皮下最大。

(2) 蛇毒的质量测定

蛇毒质量测定的目的是检查蛇毒的种类和合格程度。一般常检测以下项目：性状、气味、颜色、含水量、总蛋白含量、不溶物、光谱密度（较大的吸收峰）、毒性强度等。为了鉴别蛇毒的种类可以使用免疫扩散，测定其特殊成分等。

蛇毒加工检验由于每一种蛇毒中的化学成分不同，所以干制的蛇毒也不同。完全干燥的蛇毒一般脆而脆，无硬块，重量轻，呈细小颗粒或粉末状，有一定的挥发性、刺激性气味。五步蛇、蝰蛇的毒液为白色，银环蛇的毒液为灰白色，竹叶青蛇的毒液为淡黄绿色，蕲蛇、眼镜蛇的毒液为淡黄至黄色，眼镜王蛇、金环蛇和铁头蛇的颜色为金黄色。若干燥不彻底或混入较多杂质，则颜色发生变化，颗粒较粗，表面光亮不易碎，溶解缓慢或不完全，常粘附在试管壁上。主要原因是抽气时间短，负压不足，表面干燥，内部干燥度差。

水分的测定将清洁干燥的称量瓶置于105烘箱中5min10min，用坩埚钳取出称量瓶，放入干燥器中冷却称量，加500mg试样（测定蛇毒），放入105烘箱2小时后称量蛇毒重量。晒干的蛇毒应立即盖好，整个操作过程切不可直接用手拿取。正常的干毒含水量应在5%以下，允许值不超过7%。

溶解度测定主要检查不溶性物质的量。不溶物含量越少越好，一般不应超过0.8%。蛇毒的成分主要是多种蛋白质和多肽的混合物。此外，还含有少量的脂类、磷脂、单糖、无机盐、钾、钠、锌等，但蛋白质和多肽的总含量占85%90%。蛋白质含量的测定多采用紫外分光光度计分析，蛇毒蛋白质在279nm283nm之间有最大吸收峰。

电泳或柱层析不同种类的蛇毒含有不同的蛋白质成分，因此电泳条带和柱层析的成分不同，是区分不同种类蛇毒的主要方法。

免疫电泳扩散法将电泳技术与免疫扩散相结合，利用已知抗体（某种抗蛇毒血清）检测未知抗原（蛇毒）。如果毒液属于同一蛇种，在关节部位可产生明显的沉淀线反应，可用于区分不同种类的蛇毒。