蛇毒舒缓激肽增强肽的分离纯化

蛇毒中，缓激肽增强肽（Bradykininpotentiatingpeptide，简称BPP）是含有513个氨基酸残基的活性短肽，已有不少文献报道。 BPP对血管紧张素I转化酶有很强的抑制作用。 BPP不仅能抑制激肽酶I，增加缓激肽的作用，还能抑制血管紧张素I转化酶，使机体不会产生具有升压作用的血管紧张素I，是一种有效的降压物质。人工合成了一种更简单、更有效的BPP类似物卡托普利（2-甲基-3-巯基丙酰脯氨酸），广泛用于肾性高血压的临床治疗。

1965年，Ferreira首先在美洲矛头复合体jararaca的毒液中发现了可增加缓激肽体内外作用的BPP因子，并先后阐明了9个BPP因子的结构。此后不久，加藤等人。还从Agkistrodon 亚种的毒液中分离出五种BPP 成分并确定了它们的结构。在我国，1981年，何子安等人。上海生化研究所等(1981)从蕲蛇亚种毒液中纯化出BPP成分，并阐明了其结构。王茂银等。等(1983)对白花蛇亚种蛇毒中的BPP进行了深入研究，发现共有3种BPP。

魏山等人。 (1988) 从白花蛇毒中纯化出三种BPP 成分，即9 肽、10 肽和16 肽。这里介绍一下它们的分离方法。

蛇毒粗提乙醇取蛇毒冻干粉10g，溶于1000ml蒸馏水中，沸水浴中煮沸10min，冷却后加95%乙醇（500ml/g粗毒），滤去乙醇悬浮，上清液在蒸发器上旋转浓缩至干。减压干燥后的粉末用无水乙醇提取3次，每次20ml，合并提取液，浓缩至干。

SephadexG-15柱层析将上述乙醇提取得到的干粉溶于2ml0.02mol/LNH4H4H03缓冲液中，直接加入1JSephdexG-15层析柱(1.7cmX170cm)，用0.02mol/LpH8.0NH4H4H03缓冲液洗脱.

3、SE-Sephadex C-25层析合并收集上述活性峰，用蒸馏水稀释，用甲酸调至2.5左右。上SP-SephadexC-25层析柱（1.1cmX30cm），用0.01mol/LpH2.5甲酸铵梯度洗脱（每支100ml），见图3-13-50。

SephadexG-10柱层析收集浓缩第三步分离后的活性峰，加入SephadexG-10(1.0cmX110cm)脱盐，用O.lmol/LpHl.O盐酸洗脱，见图3-13- 51. 采集活性峰，用纳氏试剂检查，确认不含NH4+，然后浓缩进行纯度检测。