抗蛇毒血清的制备


在介绍抗蛇毒血清的制备时,首先让我们了解什么是抗原,什么是抗体;抗体是如何在体内产生的。

抗原是能刺激机体免疫系统引起一系列免疫反应,产生抗体和各种淋巴因子,并能与相应抗体或致敏淋巴细胞发生反应的物质(如细菌、病毒、血清等)。特异性结合反应发生在体内或体外。

抗体(Antihody)是机体免疫B淋巴细胞经抗原刺激后产生的免疫球蛋白,能与相应抗原产生特异性结合反应。

抗蛇毒血清就是利用这个原理,以蛇毒为抗原。被免疫的动物在蛇毒的刺激下,经过一系列免疫反应后,会产生免疫球蛋白——抗体。这种抗体可以特异性结合相应的蛇毒,使蛇毒失去毒性。体内抗原产生抗体的过程分为以下三个阶段。首先是诱导阶段,即抗原识别阶段。颗粒抗原进入机体后,首先被巨噬细胞吞噬,巨噬细胞的各种酶降解颗粒抗原,使抗原决定簇与巨噬细胞的mRNA结合。然后将抗原信息传递给T细胞,T细胞再传递给B细胞,刺激B细胞产生抗体。二是反应阶段。 B细胞在酶的作用下分化为浆细胞,再分化为具有记忆功能的淋巴细胞和浆细胞。浆细胞可以产生抗体。第三个是作用阶段,大量淋巴因子和抗体、效应T细胞和各种抗体发生特异性免疫反应的阶段,如杀死靶细胞,即中和蛇毒,而细胞本身不受伤害.

以上是体内产生抗体的机制。有人提出,如果将蛇毒加工成抗原,直接注射入人体,岂不产生抗体,被毒蛇咬了就不怕了?从理论上讲,这是完全可行的。但蛇毒成分复杂,分子量小,免疫抗原性差。需要反复注射才能达到一定的抗体水平。如果不定期重复注射,抗体也会下降。一旦被蛇咬伤,抗体下降至低峰,仍需注射抗毒血清。但是有一种情况,就是那些从事对付毒蛇的,经常被毒蛇咬伤的,多达几十次之多。伤员体内可能有高水平的抗体,因此不需要注射抗蛇毒血清。但是,这种受伤的人被毒蛇咬过多次,无异于致敏。如果隔了很久再被同一种毒蛇咬伤,他可能会出现休克反应。这不是蛇毒中毒反应,而是抗原抗体复合物引起的过敏反应。此时应立即注射抗过敏药物进行抢救。如果有延误,也会造成生命危险。

通过以上介绍,抗蛇毒血清的制备也就不难理解了。抗蛇毒血清的制备条件是蛇毒(抗原)、动物(免疫对象)和纯化设备。

1.抗原

选用健康的毒蛇提取毒液,将新鲜毒液离心、冻干备用。晒干后的蛇毒需要进行毒性试验,选择毒性强、抗原谱广(免疫电泳检测)的蛇毒作为抗原。用作抗原的蛇毒在使用前应进行灭菌处理,因为蛇毒中常混有致病性厌氧菌。由于蛇毒毒性强,分子量小,抗原性差,免疫剂量加大时容易中毒死亡,因此必须对蛇毒进行减毒处理。通常采用甲醛处理,使其失去大部分毒性,并保持其抗原性不变。

2. 动物

免疫的动物可以是兔、羊、马等,通常使用马,因为它们体型大,血量大。用于免疫的动物必须是经检疫合格的健康动物。

3. 免疫力

免疫剂量取决于抗原的性质,通常从小剂量开始,逐渐增加。

(1)基础免疫(basic immunity)。第一次注射是基础免疫,注射量很小,让被免疫的动物有一个适应的过程。有的重新注射第二针。然后休息1到2个月。

(2) 超级免费。休息后开始超级免疫,即逐渐增加剂量,每周注射一次。一般在连续注射5 至6 次后进行血液检测。当抗体达到一定水平时,就可以采血了。休息一周后继续免疫,化验血,再采血。

(3) 抗体纯化。纯化免疫球蛋白的方法很多,如盐析、冷乙醇沉淀、酸沉、离子交换层析、凝胶过滤、电泳等,我国采用硫酸铵盐析法,方便、经济,但缺点就是纯度稍差。对于高纯度的抗体,往往将几种方法结合使用才能获得满意的结果。

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