蛇毒中作用于芳酰胺的酶

有些蛇毒能水解L-亮氨酰--萘胺，其中含有所谓的芳香酰胺或氨基酸萘胺酶。这种酶可水解上述底物产生L-亮氨酸和-萘胺，最早由Michl 等人发现。 (1965)，他们在几种眼镜蛇、毒蛇和响尾蛇的毒液中发现了它。图等人。等(1967)研究了4科47种蛇毒，发现几乎都具有这种酶的活性。其中，白唇曼巴蛇、太攀蛇、银鳞蜂（以及食鱼鱼腹蛇）的毒液表现出显着的强活性。一般来说，这种酶的活性在眼镜蛇毒和毒蛇毒中较高，在海蛇毒中较低，在响尾蛇毒中较低，在蝰蛇毒中比其他蛇属的活性高。

到目前为止，除了Oshima 等人。等(1968)从白花蛇毒中部分纯化了这种芳香族酰胺酶，目前还没有得到这种酶的纯品。根据他们的研究结果，这种酶不是很稳定，在70C 下孵育30 分钟后就会完全失去活性。该酶的最适pH为8.5，对氯汞苯甲酸和Hg2+可强烈抑制其活性，说明该酶的活性中心含有巯基。 EDTA和DFP不影响活性，CN对活性有强化作用。 L-亮氨酰-13萘胺水解Km=1.5Xl(T3mol/L，凝胶过滤分子量为128000。

7-谷氨酰转肽酶

7-谷氨酰转肽酶（7-GT）广泛存在于哺乳动物组织中，这种酶也存在于细菌中。它属于转移酶类，能催化体内谷胱甘肽的还原去除t-谷氨酸，并将后者转移为氨基酸或多肽，因此在谷氨酰转移中起重要作用。蛇毒中含有多种酶，被称为天然酶库。是否有7-GT在过去并没有详细报道。我国的周德义等。 (1986) 发现GT 存在于蛇毒中。他们选择了属于眼镜蛇科的眼镜王蛇。

Pallas), Jianxijun, Apiidae 蜜蜂亚科泰国亚种， Piridae 青环海蛇和扁下巴海蛇等9种蛇毒， 比较了Y-GT的分布特征和电泳在这些蛇毒中。灯为。实验证明，7-GT在蛇毒中的分布是蝰蛇科特有的。眼镜蛇毒和眼镜王蛇毒含量丰富，两种环蛇毒含量相对较低。 9种蛇毒7-GT酶定位凝胶电泳染色后可见，眼镜王蛇毒和眼镜蛇毒中有两条7-GT酶活性条带，一强一弱，青环海蛇毒和扁下巴海蛇毒也有不同的波段。有2条酶活性条带，但活性较弱。两个7-GT活性带的迁移速度一快一慢，几种蛇毒之间有一定的相似性。虽然其他蛇毒均表现出一定的酶活性，但通过酶定位法在凝胶上未见明显的条带，这可能是由于r-GT的用量较少和实验方法灵敏度的限制。测定分子量，可知眼镜王蛇毒、眼镜蛇毒、青环海蛇毒、扁下巴海蛇毒均含有两种分子量1GT，低分子量成分在15万25万之间变化，高分子量组分在80万左右。但眼镜王蛇毒是个例外，它的高分子量成分是55万。在梯度凝胶电泳中，几种7-GT含量高的蛇毒显示出两条酶活性条带，电泳等电聚焦法时，酶活性条带增多，如眼镜蛇毒r-GT可达5条酶活性条带。几种低酶活蛇毒的梯度凝胶电泳中，看不到明显的酶活条带，但可以观察到微弱的酶活条带。各种蛇毒的IGT等电点在47之间。除眼镜蛇毒和眼镜王蛇毒外，其他蛇毒均有PI接近4.20的区域。

Nayers和Wellner曾认为，具有不同分子量和等电点的同工酶是由于：酶分子的酰胺基数目或位置不同所致；吴祥体等认为，上述原因并不能解释同工酶分子大小的巨大差异。一些酶同工酶的分子量之间大致存在倍数关系，提示上述酶在天然毒液中可能存在分子聚集。当然，也不排除酶分子与蛇毒其他成分形成复合物的可能性。

据文献报道，从哺乳动物肝、肾等组织中纯化得到的7-GT，其分子量大多在90000120000之间。还报道了纯化的r-GT 的分子量在去除去污剂后增加。吴相体等。 (1985)认为这是酶分子在去除去污剂后重新聚集所致。在对胎儿组7-GT的研究中，也得到了不同分子量的7-GT同工酶，肝脏中Y-GT的最低分子量组分为80,000。同工酶的分子量之间似乎存在一定的倍数关系，这表明可能存在分子聚集。蛇毒中还有两组不同分子量的酶，其中分子量较大。蛇毒7_GT和r-GT在哺乳动物组织中的差异主要是由于酶的来源不同。此外，也不排除酶分子本身的聚集或酶分子与蛇毒中其他成分形成复合物等因素。