动物血清中抗出血因子的纯化

许多学者发现，一些蛇类和哺乳动物的血清中含有能中和蛇毒出血毒素的因子，称为抗出血毒素因子。为了了解该因子的作用机制，需要纯化大量的抗出血毒素因子。凝胶过滤、离子交换层析等常规分离方法耗时长、专一性低，并且在每一步分离中都有一定的损失。特别是血清中抗出血毒素因子的含量不高。用传统方法分离比较困难。亲和色谱法是一种基于大分子结构和功能的分离技术。其特点是快速、特异性高、简单，损失比传统方法小，尤其是在所需成分含量低的情况下。这种方法具有无可比拟的优势。在这里，Tarng 等人。 (1986)用亲和层析从一种袋鼠(D油血清)中分离纯化抗出血毒素因子的一般过程。

SephadexG-200和DEAE-SephadexA-50柱用于分离血清中的抗出血因子。以分离的抗出血因子为抗原免疫BALB/C小白鼠，将免疫小白鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞SP融合，得到的杂交细胞可分泌抗出血因子单克隆抗体。将杂交细胞注入BALB/C小白鼠腹腔产生大量腹水，腹水中的单克隆抗体经DEAE-SephadexA-50部分纯化后与溴化氰活化的Sepharose4B凝胶结合。耦合亲和柱用于抗出血因子的大规模分离，如图3-13-58所示。