香菇原种污染的原因有哪些?如何预防?


香菇的品系分为亲本种、原种和栽培种,即香菇的一等种、二等种和三等种。香菇的母种是试管种,就是为了保存菌种。原始种是从母种中繁殖出来的,目的是繁殖栽培种。栽培品种是在原种基础上进行倍增,目的是用于香菇的生产。原种处于中间环节,起到承上启下的作用。香菇原种的生产,在选择母种并确认母种不携带杂菌后,应分为培养基生产、培养基套袋(瓶)、培养基灭菌、母种接种、和菌丝体的培养有五个步骤,每个步骤操作不当都可能埋下感染细菌的隐患或感染细菌的风险。这就需要经营者在制作原种的整个过程中都做好防范措施。

一、培养基的制作。

蘑菇培养基的原料很多,如麦粒、谷粒、高粱粒、玉米粒、木屑、棉籽壳、玉米芯、麦麸、米糠、石膏、生石灰等都是制作蘑菇的好原料。蘑菇培养基。

在这一步中,与细菌的污染有必然联系的是原料。如果选用的原料不新鲜、发霉或腐烂,则可能含有杂菌。使用此类原料制作培养基,让杂菌进入香菇原种的生产过程,埋下了可能被污染的隐患。如果后续的灭菌步骤处理不当,杂菌就会遇到适合自身生长的条件,原种难免会被杂菌污染。

预防方法:

这一步要防止杂菌感染,就是要保证正正选择的培养基原料新鲜,所用的原料没有霉变和腐烂。这是防止细菌在此步骤进入备料过程的唯一方法

2.媒体装袋(瓶)

香菇原培养基配制好后,必须装入原种专用的容器中,通常使用标准的塑料菌袋(瓶)或玻璃瓶。装满培养基后,用棉塞将袋(瓶)口密封严实。

装袋(瓶)工序中,与杂菌有关的是袋(瓶)身或扣盖带杂菌。使用装有杂菌的袋(瓶),会使杂菌进入原制种过程。这与携带细菌对培养基原料的影响是一样的,为原种被杂菌污染埋下了隐患。如果处理不当,难免对原种造成细菌污染。

预防措施:

[1]对使用过的袋(瓶)、扣盖进行显微镜检查,带菌袋(瓶)、扣盖丢弃。这种方法只适用于少数原种的生产。如果数量太多,显微镜检查时间太长,耗费人力太多,这是不现实的。

【2】瓶身和瓶盖用5000倍高锰酸钾溶液浸泡2小时,使用前用无菌水冲洗干净。

[3] 对于塑料标准袋,使用前采用温度121-126、压力0.105-0.135Mpa高压灭菌90-120分钟。

【4】借助灭菌步骤,在保证效果的情况下,与培养基一起进行彻底灭菌。

三、杀菌。

原种的制备培养基的灭菌,通常采用高压灭菌,是香菇原种生产中必不可少的关键步骤。目的是杀灭培养基或菌袋(瓶)、海绵扣盖上可能存在的杂菌。

但一旦出现错误,可能会导致培养基或菌袋(瓶)、海绵扣盖上残留细菌,使细菌在原菌种的生产过程中得以存活。原始物种造成污染。

可能引起细菌污染的操作。

【1】原料未预湿或预湿不彻底。

有些用来制作原始种子培养基的原料是比较致密的,比如麦粒、谷物、玉米粒等。棒子。如果选用这些原料,不进行预湿或预湿不彻底,则在制作介质的过程中,遇水时间短,不能被水完全浸透。在灭菌过程中,无论高温保持多久,蒸汽都无法穿透大部分的密度。在这种情况下,现有的杂菌可以保留下来,进入下一步的原种制种。当杂菌在适宜的条件下萌发时,就会污染原种。

预防措施:

对高密度或部分高密度的原料预先进行预湿处理。预湿是以水浸泡原料为主,没有确切的时间要求。

【2】灭菌室内的培养基袋(瓶)放得太紧。

培养基袋(瓶)运入灭菌室放置时过紧,袋与袋之间没有合理间隔,甚至挤压,挤压力过大。即使在长时间的情况下,高温蒸汽也无法穿透挤压部分,造成中袋(瓶)杀菌不透水,杀菌不透水处有杂菌,杂菌可躲过高温杀灭,从而进入下一步,满足发芽生长的适宜条件,会造成培养基被污染。玻璃瓶一般不容易出现这种情况。

预防措施:

放置培养基袋(瓶)时,注意袋与袋之间的距离,保证蒸汽能渗透到灭菌室内培养基袋(瓶)内的任意位置。

【3】灭菌室内冷气排尽。

培养基袋(瓶)在灭菌过程中,必须将灭菌室内的冷空气排出。如果不排气,冷空气在温度和压力升高的情况下会聚集在一起,很容易在腔室中形成冷死团。冷气团的温度在高温高压下难以升温和扩散。它们随库内蒸汽流动而移动,阻断高温蒸汽的运行。所到之处,高温蒸汽无法顺利到达任何位置,导致该位置杀菌不彻底。如果这个位置的培养基袋里有杂菌,就会有残留,活体进入下一步原制种,在适宜的条件下,培养基就会被污染。

预防措施:

注意观察,增加排气时间,确认冷气排出后关闭排气阀。

【4】灭菌室温度压力不匹配。

在高压灭菌中,蒸汽被输送到灭菌室。由于大气压力的影响,有时温度达到121,但压力达不到配套的0.105Mpa。这是一个普遍的现象。

操作时,一旦忽略观察压力表,就可能出现温度达到,压力不够,在压力不达标的情况下,规定时间内,蒸汽无法穿透培养基,造成灭菌不彻底,杂菌残留,使原种在以后步骤中,受到污染。

    ★预防办法:

    在观察温度表时,不忽略压力表的观察,通过调节放气阀门,使温度与压力匹配。

    【5】灭菌温度、压力不达标或灭菌时长不够。

    培养基灭菌过程中,操作人员没有责任心,疏于观察,应付了事,使灭菌温度没有达到规定的121℃、压力0.105Mpa,或者时间没能达到120分钟(植物籽粒种150分钟),造成灭菌达不到效果,出现杂菌残留,造成原种污染。

    ★预防办法:

    树立操作人员责任心,使温度、压力及灭菌时长达到要求标准。

    四,接种。

    香菇原种制作中,接种就是把母种在无菌条件下,接入原种培养基,需要在接种箱或接种室中进行。接种环节最容易造成原种的杂菌感染,是原种制作防止杂菌感染的重中之重,以下几点很容易使杂菌进入制作过程。

    【1】接种箱或接种室消毒灭菌不彻底。

    在接种前,要对接种箱或接种室进行消毒灭菌。

    ⑴灭菌方法单一,长时间使用一种药剂灭菌,杂菌具有耐药性,灭菌后,杂菌残留,造成灭菌不彻底。

    ⑵接种箱擦拭消毒灭菌时,不全面,留有死角。熏蒸灭菌时,接种箱封闭不严,出现杂菌残留。

    ⑶接种室灭菌时,熏蒸灭菌,空间封闭不严,紫外线照射出现死角,造成杂菌残留。

    【2】母种进入接种室处理不当。

    母种进入接种室和接种箱前后,对试管外壁和塞口擦拭不彻底,而恰好外壁会有杂菌。

    【3】接种时没有严格执行操作规程。

    ⑴使用没经消毒灭菌处理的接种工具或穿着未经消毒灭菌处理的衣物进行接种作业。

    ⑵接种时,接种人员走动,不经缓冲间,随意出入接种室,造成扬尘污染。

    ⑶接种箱接种,未在酒精灯火焰的保护下,进行接种。

    ⑷接种室接种未开启接种保护器,就进行接种。

    ⑸接种后,未及时扣盖,使菌种在空间暴露时间过长。

    ⑹违反接种操作规程等其他行为,造成杂菌残留。

    以上这些操作都可能造成杂菌的侵入,致使原种受到污染。

    ★预防方法:

    【1】多种消毒灭菌方法结合,保证接种箱和接种室接种时,处于无菌状态。

    ⑴接种箱消毒灭菌采用百菌清喷洒、福尔马林或绿霉净擦拭,结合必洁仕或菇虫净气雾剂熏蒸灭菌的方法,不留死角地杀灭杂菌。

    ⑵接种室灭菌采用百菌清喷洒、必洁仕或菇虫净气雾剂熏蒸,结合紫外线照射的方法,干净彻底灭杀杂菌。

    【2】做好母种试管进入接种箱和接种室前后的灭菌处理。

    进入前用75%酒精擦拭试管外壁,进入后用75%酒精对试管外壁和塞口再进行擦拭,之后再打开试管塞,进行使用。

    【3】严格执行接种操作规程。

    ⑴做好更衣室、缓冲间的灭菌,接种工具和人员着装,在灭菌同时,接受灭菌,杜绝使用未经灭菌的接种工具。

    ⑵接种室接种时,人员进出必须通过缓冲间,尽量避免人员走动,以避免扬尘污染。

    ⑶接种箱在酒精灯火焰保护下进行接种。接种室接种全程开启接种保护器,就在其保护下进行接种。

    ⑷接种完毕,立即盖好扣盖,尽量减少母种的空间暴露时间。

    五,养菌。

    原种培养料基接种母种后,原种菌袋就将放入养菌室进行菌丝体培养,此时也会造成杂菌感染,感染途径有以下几种。

    【1】养菌室消毒灭菌不彻底,造成杂菌残留。

    原种菌袋(瓶)进入养菌室之前,要进行养菌室的消毒灭菌,杂菌存在于养菌室的墙壁、地面空中及各个角落,消毒灭菌处理如不够彻底,就将造成杂菌残留,条件适宜的条件下杂菌就将侵染原种菌袋(瓶)

    【2】养菌室封闭不严,外界杂菌随空气水流人员进出进入养菌室。

    自然环境中,杂菌无处不在,广泛存在于空气、水和各种物质中,养菌室封闭不够严格,随通风气流、加湿水流,甚至人员进出时,附于人员衣物等地方,随人员进入。在养菌室中遇适宜条件萌发,侵染原种菌袋。

    【3】养菌室温度、湿度、通风等调节控制不到位,使杂菌滋生。

    香菇原种在养菌期,养菌室要保持23~27℃,空间相对湿度要保持在70%左右,同时要保证养菌室通风良好,有充足的氧气含量。如果控制失误,形成益于杂菌萌发、发育、生长的高温高湿环境,使杂菌滋生,就会造成对原种菌袋(瓶)侵染。    ★预防办法:

    【1】做好养菌室消毒灭菌。

    在香菇原种菌袋进入前,采用百菌清或绿霉净等灭菌药剂水溶液全面、无死角的喷洒后,用硫磺过菇虫净气雾剂进行熏蒸灭菌,如是种植香菇时间过久的老菇棚,有必要甲醛加高锰酸钾进行熏蒸。这样就能彻底灭杀养菌室杂菌。

    【2】采取严格防护措施,杜绝媒介带菌进入养菌室。    ⑴门窗和通风通道安装过滤网,阻止杂菌进入。

    ⑵对加湿用水进行消毒灭菌后再使用。

    ⑶做好进出养菌室的人员管理,穿着经消毒灭菌的服装进入。

    【3】调节好温度、湿度通风等环境因素。

    按香菇原种养菌要求调节温度、湿度和通风,协调好它们之间的关系,避免出现高温高、湿环境出现,抑制杂菌活力,避免杂菌侵染。

    【4】喷洒灭菌药剂。

    养菌期间,养菌空间(地面、墙壁等)要定时喷洒灭菌,及时杀灭空间的存在的杂菌。

    另外,母种带菌也是造成原种受到污染的途径之一,所以对所使用的母种要做好检测,拒绝使用带杂菌母种。

    香菇原种制作和培养过程中,造成母种污染的原因多种多样,充斥在原种制作和培养的每一个环节和步骤中。因此,进行香菇的原种制作时,要步步为营、处处小心,不能忽略任何一个小的细节,不能出现任何微小的失误,时刻也不能放松对杂菌的预防,必须把好每一关,阻止杂菌进入,彻底消灭可能进入的杂菌,才能保证香菇原种制作和培养的成功。(来源:初始农人)

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