野生香菇：菌种分离操作步骤

野生香菇可以分离出菌种，但分离出来的菌种能否存活、生存，能否适应人工种植中人工模拟的生长环境，也是不确定的。如果要用于人工种植，并具有优良的抗逆性、结实性能、产量性能、品质性能，需要经过无数次的驯化。只有驯化成功，才能作为新品种推广使用。

分离野生香菇并不难，最简单的方法就是组织分离。所谓组织分离法，简单地说就是取一片新鲜蘑菇组织放入装有培养基的试管中，然后利用试管的特性将试管置于适合蘑菇菌丝体生长的地方。可以再生菌丝体的蘑菇组织。在恒温环境下培养菌种，具体操作步骤如下。

1. PAD培养基的制作

采用组织分离法制备菌株，必须先配制PDA培养基备用。

一、所用原材料

土豆200克，葡萄糖20克，琼脂15克，水1000毫升。

2.制作

土豆洗净去皮，切成小块，放入铝锅中，加水1000毫升，蒸至沸腾。煮沸30分钟后，关火。将锅中的土豆用三层以上的纱布过滤，将过滤后的土豆溶液倒入量杯中。

接下来，将葡萄糖和琼脂放入量杯中，在量杯中加入1000毫升水，搅拌均匀，使葡萄糖和琼脂充分溶解。如果溶液温度太低而不能完全溶解，加热量杯直到完全溶解。

3.填充试管

是将调好的培养基趁热用漏斗装入准备好的试管中。灌装量为试管容积的1/51/4。装满后，用橡皮塞将试管塞紧。捆绑为一组。

4.杀菌

将管子放入高压灭菌器中进行灭菌。灭菌温度121，压力0.105Mpa，灭菌时间30分钟。灭菌过程中，注意排出高压灭菌器内的冷气。灭菌后，待锅内温度降至80时，放掉锅内蒸汽，取出试管。

5.设置试管斜率。

将从灭菌器中取出的试管放在平台上，在试管的开口端垫上东西，使试管内的培养基形成一个斜坡，使试管内培养基的最高处在试管的1/2位置，用毛巾或化妆棉等物品盖住试管，避免试管内结露。试管内培养基凝固，试管斜面培养基配制。

6、细菌检测。

将配制好的培养基试管放入25培养箱中。 48小时后，显微镜检查培养基无细菌生长，将培养基试管低温保存备用。

2. 香菇组织的分离

从新鲜的野生香菇中取出一块组织，组织提取应在无菌条件下进行。

1、杀菌

将整个菇体表面用75%酒精擦拭后，放入消毒过的接种箱中，再用75%酒精擦拭表面，点酒精灯，把菇体撕成两半，放上操作刀在酒精灯上火焰灭菌、冷却，然后切下香菇组织。

2.提取物

用于菌种培养的香菇组织的采收，一般采摘部位选择在菌柄与菌鳃交界处，组织的细胞再生能力最强。组织的大小，取出来的组织块大小接近绿豆粒大小。取出后，将其放在测试介质上。为了成功率，一次培养的数量至少要有7支试管。

3.培养

将装有香菇组织的培养基试管放入培养箱中，调节温度在25左右。 1周左右，若香菇组织表面长出蓬松的菌丝，则认为是活的。如果组织表面没有变化，说明分离失败，只能重复分离。

在培养箱中培养存活的菌丝体约2周，然后转管一次。移管后菌丝成活，即为野生香菇母种。

在获得野生香菇的母种后，还要进行进一步筛选，保留菌丝生长最强的母种。原种繁衍后，进行栽培试验和人工驯化。人工驯化成功后，将证明一个新的香菇品种。一旦诞生，原种和栽培种就可以繁衍培育。晋升需要到有关部门登记，申请资格后方可进行。

野生香菇菌种的分离说起来容易，存活应该问题不大。最重要的是分离后进行人工驯化，驯化成功后才能成为真正的品系。在驯化的过程中，一定要做好一切的心理准备，辛苦不说，最重要的是要勇于接受失败，不气馁，不灰心，坚定信心你不会放弃，直到你达到你的目标。 （来源：初始农夫）