香菇培养基的灭菌、接种与培养

一、菌种培养基的灭菌培养基的灭菌是菌种生产成功与否的关键。未经灭菌的培养基中存在大量微生物，常导致菌种污染和生产损失。目前，食用菌养殖户常用的杀菌方法是常压蒸汽杀菌。

常压蒸汽灭菌炉是用砖砌成的。选用直径110厘米的铁锅，用砖砌成高100厘米、直径120厘米的鼓。内外都用水泥抹平。

培养基装入杀菌锅后，用较厚的塑料薄膜和麻袋盖住锅口，用绳子扎紧，然后用大火烧开，使锅在最短时间内煮沸。当塑料薄膜膨胀成馒头状时，即表示锅已经烧开，此时开始杀菌，持续8-10小时，以保证杀菌彻底。严重的细菌污染导致种子生产失败。常压灭菌必须做到“三防”。一是要防止中途降温，中途要停火。如果锅内温度达不到100，则在规定时间内达不到杀菌目的。第二，为防止锅烧干，杀菌前给锅内加足水。杀菌过程中，若锅内水量不足，应及时从注水口加水。三、防止杀菌死角的存在，如锅底火件不平、锅口一端漏气等，都可能造成杀菌死角。

2、接种培养

灭菌后的培养基可以接种，接种就是将菌种移植到培养基上。从事接种的操作人员必须树立严格的无菌观念，使操作人员和接种工具处于严格的无菌状态。因此，接种工具必须严格消毒，操作环境必须彻底消毒，操作人员的手和衣服也必须消毒，严格执行无菌操作规程。接种应在接种箱或接种室内进行。

接种时，先清除接种箱或接种室内的杂物，用2%来苏尔喷雾消毒。将待接种的培养基、菌种和工具放入接种箱或接种室的工作台内，用福尔马林和高锰酸钾对接种箱和接种室进行熏蒸至少半小时，用量为每立方米空间用5克高锰酸钾，加10毫升甲醛，接种前用75%的酒精棉擦拭双手、母种试管或原种瓶表面，然后点亮酒精灯进行操作。接种后，关掉酒精灯，将接种好的瓶或袋移至培养室培养。一般一个母种可繁殖4-5瓶原种，一瓶原种可繁殖40-50瓶或15-20袋栽培种。

培养室要保持清洁，适当调节温度、湿度、空气、光照等环境条件。菌株培养适宜温度为20-25，空气相对湿度应控制在60%左右。发芽期需避光养菌，培养室应始终保持通风良好的环境。按照这种管理方式，40天左右细菌可以长满瓶子或袋子。满瓶（袋）菌种如不立即使用，应在0-10以下环境中保存1-3个月。