以豆渣为主料液体深层培养香菇菌丝体的研究

近年来，随着市场对香菇多糖需求量的增加，液体深层发酵培养香菇菌丝体的研究逐渐增多，但以豆渣为主要原料的液体深层培养香菇菌丝体的研究尚未见报道.为此，笔者利用豆渣和洗渣水，采用正交试验的方法，筛选研究香菇液体发酵的最佳培养基和发酵条件，旨在对大豆制粉过程中的边角料——豆渣进行再利用，同时为香菇液体发酵提供最佳培养基。寻求一种新的原料来节约食物资源。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌株

香菇(L109)由佳木斯大学生命科学学院微生物实验室保藏。

1.1.2 中等

改良PDA培养基：马铃薯20g（煮汁）、麸皮（煮汁）5g、葡萄糖2g、琼脂2g、水100mL，121灭菌20分钟。

种子培养基：麸皮5g（煮汁），葡萄糖2g，洗渣水100mL，0.1MPa灭菌15min。

发酵培养基：洗渣水100mL，MgSO4、葡萄糖、KH2PO4和豆渣的比例采用正交试验确定，0.1MPa灭菌15分钟。

对比培养基： 葡萄糖2.0g，大豆粉2.0g，KH2PO4 0.1g，MgSO4 0.1g，水100mL，0.1MPa灭菌15min。

1.2 方法

1.2.1 原料准备

豆渣（生产豆粉的边角料）：大豆用水磨碎，豆浆分离后剩下的固体（含水量约87%）。

洗渣水：在豆渣中加入12倍重量的水，搅拌均匀，滤液过滤。

1.2.2 应变激活

将香菇菌种转移至改良的PDA斜面培养基中，置于25培养箱中恒温培养6-7天，菌丝覆盖试管。

1.2.3 液体种子的制备

在250 mL三角瓶中加入80 mL种子培养基，加入4~5个玻璃珠，插入3个大豆粒大小的香菇激活菌种，在旋转摇床上以180 r/min、25 培养5 ~6 天。

1.2.4 发酵培养基的优化

在香菇液体发酵培养基中对葡萄糖、MgSO4、KH2PO4和豆渣四种营养物质进行了三个水平的正交试验。选择正交实验来优化发酵培养基。

1.2.5 发酵条件优化

对发酵时间、液量和发酵温度三个因素进行三个水平的正交试验，选择正交试验优化发酵条件。

1.2.6 对比试验

分别使用优化后的液体发酵培养基和对比培养基，在优化后的发酵条件下进行发酵试验，比较菌丝体生物量和生物转化率。

1.2.7 菌丝体生物量的测定

发酵液经两层纱布过滤得到菌丝体，用蒸馏水洗涤数次，60干燥至恒重，用电子天平称重，测定菌丝体的生物量。

1.2.8 生物转化率的计算

生物转化率（%）=菌丝干重培养基中碳源和氮源的干重100；培养基中碳源和氮源干重=碳源重量（1-碳源含水量%）+氮源重量（1-氮源含水量%）。

2 结论与讨论

豆渣、洗渣水液体培养香菇菌丝体的最佳培养基配方为：2%葡萄糖、9%豆渣、0.05%MgSO4、0.1%KH2PO4，以洗渣水代替清水；发酵条件如下：发酵时间6天，液体体积80mL/250mL锥形瓶，发酵温度25。

利用豆渣和洗渣水培养香菇菌丝体已被实验室研究证明是可行的，工业化利用豆渣和洗渣水液培养香菇菌丝体的技术条件仍需通过大规模规模实验研究。

用豆渣和洗渣水培养蘑菇菌丝体，发酵液呈透明状，说明菌丝体生长过程中可以利用大豆纤维、大豆蛋白、大豆多糖等大分子物质。

豆渣洗豆渣水培养的蘑菇菌丝体与野生蘑菇营养成分的异同有待进一步研究。