利用豆渣液体发酵香菇菌丝体的研究

以豆渣为主要原料，采用正交试验方法研究了香菇液体发酵的最佳培养基和发酵条件。结果表明，香菇液体发酵的最佳培养基配方为2%葡萄糖、0.05%MgSO4、9%豆渣、0.10%KH2PO4，用水代替洗渣；适宜的发酵条件为发酵时间6天，液体体积80mL/250mL锥形瓶，发酵温度25。豆渣；蘑菇；液体发酵？香菇（Lentinus），是一种味道鲜美、营养价值和药用价值都很高的食用菌。蘑菇蛋白中含有18种氨基酸，脂肪中含有大量的亚油酸，灰粉中含有大量的钙、铁、锰等矿物质。香菇多糖具有独特的药理功能。经常食用可预防佝偻病，预防肝硬化，化痰理气，对贫血有一定疗效，无任何毒副作用[1]。近年来，随着市场对香菇多糖需求量的增加，液体深层发酵培养香菇菌丝体的研究逐渐增多，但以豆渣为主要原料的液体深层培养香菇菌丝体的研究尚未见报道.为此，笔者利用豆渣和洗渣水，采用正交试验的方法，筛选研究香菇液体发酵的最佳培养基和发酵条件，旨在对大豆制粉过程中的边角料——豆渣进行再利用，同时为香菇液体发酵提供最佳培养基。寻求一种新的原料来节约食物资源。1 材料与方法1.1?材料1.1.1?菌株香菇(L109)由佳木斯大学生命科学学院微生物实验室保藏。1.1.2？培养基改良PDA培养基：马铃薯20g（煮汁）、麸皮（煮汁）5g、葡萄糖2g、琼脂2g、水100mL，121灭菌20分钟。种子培养基：麸皮（煮汁）5 g，葡萄糖2 g，洗涤水100 mL，0.1 MPa灭菌15 min。发酵培养基：洗渣水100mL，MgSO4、葡萄糖、KH2PO4、豆渣的比例采用正交试验确定，-0.1MPa灭菌15min。造影剂[2] : 葡萄糖2.0 g，大豆粉2.0 g，KH2PO4 0.1 g，MgSO4 0.1 g，水100 mL，0.1 MPa灭菌15 min。 1.2？方法1.2.1？原料豆渣（豆渣生产的边角料）的制备：将大豆加水研磨，分离出豆浆后的剩余固体（含水量约87%）。洗渣水：在豆渣中加入12倍重量的水，搅拌均匀，滤液过滤。1.2.2？菌种的激活将蘑菇菌种转移到改良的PDA斜面培养基中，置于25的培养箱中恒温培养6-7天，菌丝体将覆盖试管。1.2.3？液体种子的制备将80 mL种子培养基装入250 mL三角瓶中，加入45颗玻璃珠，将3片黄豆大小的香菇放入活化菌种中，置于180 r/min的旋转摇床上25 振荡培养5-6天。1.2.4？发酵培养基的优化采用正交试验方法，对蘑菇液体发酵培养基中葡萄糖、MgSO4、KH2PO4和豆渣四种营养物质的三个水平进行了正交试验。选用正交试验表L9(34)优化发酵培养基。测试因素水平如表1 所示。1.2.5？优化发酵条件应用正交试验法对发酵时间、液体量和发酵温度三个因素进行三个水平的正交试验，选取正交试验表L9(33)对发酵条件进行优化。测试因素水平如表2 所示。1.2.6？对比试验分别使用优化的液体发酵培养基和对比培养基，在优化的发酵条件下进行发酵试验，比较菌丝体生物量和生物转化率。1.2.7？菌丝体生物量的测定发酵液经两层纱布过滤，得到菌丝体。菌丝体用蒸馏水冲洗数次后，60烘干至恒重，用电子天平称重。丝状生物质。1.2.8？生物转化率的计算生物转化率（%）=培养基中碳源和氮源的干重100；培养基中碳源和氮源干重=碳源重量（1-碳源含水量%）+氮源重量（1-氮源含水量%）。2 结果与分析2.1 ?培养基优化优化后培养基的正交试验结果见表3。按照从强到弱的顺序。试验表明，适宜的培养基配方为A1B3C2D3，即葡萄糖2%、MgSO4 0.05%、豆渣9%、KH2PO4 0.1%。

?2.2？发酵条件优化发酵条件优化正交试验结果见表4。极差REFRG，即香菇液体发酵菌丝体生物量三种发酵条件的顺序为：发酵时间、液体量、发酵温度。最佳发酵条件为？E2F2G2，即发酵时间为6天，液体体积为80mL/250mL，发酵温度为25。2.3？对比试验结果采用优化培养基A1B3C2D3和对比培养基进行香菇液体发酵试验，结果见表5。优化培养基中碳源和氮源含量为0.6 g/100 mL低于对照培养基，但前者香菇菌丝体干重和生物转化率分别比后者高0.15 g/100 mL和18%。 3 结论与讨论3.1？豆渣和洗渣水液体培养香菇菌丝体的最佳培养基配方为：葡萄糖2%、豆渣9%、MgSO4 0.05%、KH2PO4 0.1%，以洗渣水代替清水。原料；实验室最佳发酵条件为：发酵时间6天，液体体积80mL/250mL锥形瓶，发酵温度25。3.2？利用豆渣洗豆渣水培养香菇菌丝体已被实验室研究证明是可行的，工业化利用豆渣洗豆渣水液培养香菇菌丝体的技术条件仍需通过大量的研究获得。规模实验研究。3.3。用豆渣和洗渣水培养蘑菇菌丝体，发酵液呈透明状，说明大豆纤维、大豆蛋白、大豆多糖等大分子物质可用于菌丝体的生长过程。3.4？豆渣洗菜水培养的蘑菇菌丝体与野生蘑菇营养成分的异同有待进一步研究。（本文仅供参考）？