金针菇的孢子分离法


金针菇的孢子分离方法分为单孢子分离法和多孢子分离法两种。驯化繁殖采用多孢子分离法,分“种菇”孢子喷射法和鳃褶贴管壁法两种。 1. 孢子喷射法

取“种菇”剪去菌柄,用70%酒精清洗表面或用0.1%氯化汞水浸泡1-2分钟,用无菌水漂洗数次,滤纸吸干表面。在接种箱或无菌室,按无菌操作规程,将“蘑菇”的鳃放下,用铁丝撑起,放在培养皿上,置于消毒过的擦洗布和大钟罩下,将灭菌后的滤纸放入培养皿容器中。整个装置必须通风,否则罩内湿度过高,孢子不易掉落。 1220小时后,在培养皿中或滤纸上可见一层白色的孢子印散落。用无菌接种环蘸取少量孢子,在盛有无菌生理盐水的大试管或锥形瓶中稀释成孢子悬液,然后用无菌注射器或滴管吸取孢子悬液,注入1至2滴孢子液于培养基表面,用无菌接种环铺开培养。孢子萌发后,挑选孢子萌发早、生长好的菌落进行转移培养。

2.鳃贴在管壁上

钩取干净、发育良好的金针菇菌鳃片,在无菌条件下贴于斜面培养基上方的试管内壁。为使其粘牢,可在试管壁上滴12滴无菌水。放好鳃后,用棉塞塞满,置于适宜的温度条件下进行栽培。当看到培养基上有对应菌鳃大小的雾状物时,立即在无菌条件下将附着在试管壁上的菌鳃取出。当肉眼可见菌丝时,将其挑出,放入新的试管培养基中培养。

孢子分离的污染率比较高,肉眼可见的各种细菌都要剔除。之后,选出的品系还要经过出菇试验,鉴定是否为优良驯化品系。

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