金针菇的孢子分离

金针菇的孢子分离方法分为单孢子分离法和多孢子分离法两种。驯化繁殖采用多孢子分离法，分“种菇”孢子喷射法和鳃褶贴管壁法两种。 1、孢子喷射法取“种菇”剪去菌柄，用70%酒精擦拭表面或用0.1%氯化汞水浸泡1-2分钟，用无菌水漂洗数次，用干洗表面擦干过滤纸。在接种箱或无菌室，按无菌操作规程，将“蘑菇”的鳃放下，用铁丝撑起，放在培养皿上，置于消毒过的擦洗布和大钟罩下，将灭菌后的滤纸放入培养皿容器中。整个装置必须通风，否则罩内湿度过高，孢子不易掉落。 1220小时后，在培养皿中或滤纸上可见一层白色的孢子印散落。用无菌接种环蘸取少量孢子，在盛有无菌生理盐水的大试管或锥形瓶中稀释成孢子悬液，然后用无菌注射器或滴管吸取孢子悬液，注入1至2滴孢子液于培养基表面，用无菌接种环铺开培养。孢子萌发后，挑选孢子萌发早、生长好的菌落进行转移培养。 2、菌鳃贴管壁法取干净、发育良好的金针菇菌鳃1片，在无菌条件下，贴在斜面培养基上方的试管内壁上。为使其粘牢，可在试管壁上滴12滴无菌水。放好鳃后，用棉塞塞满，置于适宜的温度条件下进行栽培。当看到培养基上有对应菌鳃大小的雾状物时，立即在无菌条件下将附着在试管壁上的菌鳃取出。当肉眼可见菌丝时，将其挑出，放入新的试管培养基中培养。孢子分离的污染率比较高，肉眼可见的各种细菌都要剔除。之后，选出的品系还要经过出菇试验，鉴定是否为优良驯化品系。