金针菇菌种生产繁殖技术

一、金针菇菌种收购、生产的主要设施设备1.1主要设施。接种室、培养室、操作室、储藏室的大小视生产规模而定。 1.2 主要设备。超净工作台（或接种箱）、培养箱、手术台、转椅、高压灭菌器、常压灭菌器、钢锅、天平、台秤、量筒、玻璃瓶、试管等。 1.3菌种选择。选择优质、高产、抗逆性强、性状稳定、生长快、纯度高、无病菌、无病虫害的品种。 2、各菌种培养基的选择和制作2.1 母种斜面培养基的制作： 配方马铃薯200-250克，琼脂20克，白糖20克，水1000毫升，调PH值至6.5 . 马铃薯200-250克，琼脂20克，葡萄糖20克，水1000毫升，调pH值至6.5。 土豆200-250克，硫酸镁5克，白糖20克，维生素B1（B2）100毫升，磷酸二氢钾2.50克，琼脂20克，水1000毫升，调PH值到6.5。制作：将土豆切成片，放入钢锅中煮30分钟，用四层纱布过滤汁液，加入琼脂等材料，搅拌溶解，加白糖，加水至1000毫升，转移至培养试管，容量为试管长度的1/5。 2.2原种及栽培培养基的制作：配方木屑培养基：阔叶木屑73%、蔗糖1%、细米糠（或麦壳）2.50%、碳酸钙1%、水材料配比1 ：1.20--1.30。 棉籽壳培养基：棉籽壳88%、蔗糖1%、细砂糖（或麦壳）10%、碳酸钙10%，水料比相同。 麦粒培养基：麦粒（或玉米粒）99%碳酸钙1%，水料比1:1.20。制作：按上述配比要求称取各种配料，混合均匀。将糖和化学药品溶解于水中，然后加入材料中并充分混合，溶解水的量记录在水料比中。棉籽壳在混合前用水混合预湿；麦粒在混合前先浸泡，然后在锅中煮沸。将所有材料混合装瓶，灌装量为瓶容量的1/3。 3、液体菌种制作配方葡萄糖3%、玉米粉1%、豆饼粉2%、碳酸钙0.20%、二磷酸氢钾0.10%、酵母粉0.50%、硫酸镁0.05%，将各成分溶于水，混匀制成混悬液，煮沸30分钟，取上清液溶解，在500ml锥形瓶中放入10个小玻璃珠。配方 20%马铃薯、0.20%蛋白质、20%葡萄糖、0.05%磷酸二氢钾、0.05%硫酸镁、0.01%氯化钾，按常规方法从马铃薯中提取滤液，加入其他成分固定溶液后，把它放进瓶子里。配方 5%玉米粉、0.50%酵母粉、4%蔗糖、0.20%碳酸钙、1mg VB，制作方法同配方。 3.1 培养基灭菌及设施设备消毒3.2 母种倾斜培养基。液体培养基每千平方厘米高压灭菌1.10kg，121灭菌30分钟，固体培养基灭菌后立即倒在斜坡上，斜坡长度占斜坡长度的1/2试管。 3.3 原种和栽培种的培养基。高压灭菌器，压力1.50千克/千平方厘米，121灭菌1小时。以麦粒为原料的培养基应适当延长灭菌时间。也可用常压蒸汽灭菌，即100连续灭菌8小时。 3.4 设施消毒。接种室、培养室、手术室用福尔马林加热熏蒸，也可用硫磺粉熏蒸。福尔马林用量为每立方米空间10毫升，硫磺粉为每立方米空间15克； 20--40克/千平方米）水溶液，2%--3%来苏尔喷洒地面和墙壁。 3.5 设备消毒。超净工作台及其各种工具用70%酒精或5%石炭酸0.25%溴洁尔敏浸泡擦洗。接种前开启紫外线灯灭菌15分钟。 4 菌株的接种与培养4.1 亲本的接种与培养。接种时，试管（瓶口）朝下，紧贴酒精灯火焰。用接种针将母试管中的菌丝连同原培养基剪成0.50cm0.50cm的小块，转移到新试管中培养。在基部斜面，将棉花塞紧，放入23培养箱或培养室培养8--10天，菌丝覆盖斜面。 4.2 原种和栽培种的接种培养。

用接种针挑取母种试管中菌丝体1平方厘米的菌块，插在原种（或栽培品种）瓶中的培养基上。同样的瓶口靠近酒精灯的火焰，速度很快。接好后，将棉花插好，放入23培养室培养。 4.3 液体菌种的接种培养在高压灭菌后的液体培养基中，插入2平方厘米的旺生斜面母种，使气生菌丝体一侧悬浮于液面，温度23。静置培养2-3天，然后置于复合振荡器（振荡频率80-100次/分钟）上振荡培养3-4天。当液体呈淡黄色、清澈透明、有香味时，转移到已灭菌的接种室内，将液体倒在酒精灯火焰口处已灭菌的栽培品种培养基表面，用量为10-15 ml/瓶，置于23的培养室中培养27天左右。作为栽培品种使用。液体菌种的特点是原种量少时可作为原种使用。在液体培养基中培养仅需1周左右，与固体原种培养相比可缩短4倍时间，且菌龄相同，菌丝健康。强大的生命力。 5、金针菇菌种的保存5.1低温保存。将长满的菌株放入4冰箱，每5个月补植一次。 5.2 室温保存。用木屑制备的培养基菌丝长满后，用石蜡封闭棉塞，室温保存。 5.3 液氮储存。菌株储存在-130-193C的液氮罐中。