1 培养基制备银耳菌培养基配方比较讲究，必须使用高纯度白楠木片，白楠木切碎，风雨半年以上，切片，晒干，过2mm筛粉碎。配方为白楠木屑65%，优质麦壳33%，优质石膏粉1%，白砂糖1%，水分62%65%，自然PH值。制作时，将木屑、麸皮、石膏粉混合，倒入相应的糖水，搅拌均匀后过筛，装入750mL的瓶子中，压平至瓶肩的高度，用刷子清洗干净，塞入棉塞然后放入高压灭菌器中灭菌。当锅内压力达到0.05MPa时，充分排除锅内冷气；当锅内压力达到0.20MPa时，开始计时，排气至0.15MPa，保持火力不能减弱，保持锅内压力在0.20MPa2h，稍微打开排气口，使少量的气体可以排出。灭菌结束后，将锅内蒸汽排尽，将灭菌后的培养基卸出，排入冷却室自然冷却，等待接种。若温度高于25，预冷30分钟，然后将原介质推入有制冷设备的房间强制冷却。 2 分离材料的选择2.1 菌袋从商品银耳栽培种群中，选择生长期28-33天，花形完整，花径5-8cm，耳片厚，拉紧，分离材料无病虫害（图1）。但由于栽培袋银耳菌分离往往含有污染物，分离成功率较低。 2.2 育种瓶选择银耳原种中的优良菌种作为母种。生长时间约为35-38天。收缩型，大小4-5cm，耳片不触及瓶壁，花形圆润直立，生长旺盛，耳片洁白厚实，色泽光润。 3 组织分离法3.1 菌袋分离在接种箱内，按无菌操作要求，用锋利的刀片剪取12cm2大小的银耳片，用镊子夹住耳片，洗净消毒水三次，然后放入消毒过的木屑培养基中，用记号笔做好标记。用同样的方法接种35瓶。 3.2 接种箱内种子瓶的分离按无菌操作要求，将母种瓶破开，用锋利的刀片切下1-2cm2大小的银耳一块，放入灭菌后的木屑中介质，并用记号笔标记它。好标签。用同样的方法接种35瓶。 4 基内分离4.1 菌袋分离收集银耳子实体，从菌袋中挖出菌基，用接种铲除去耳基表面的棉籽壳至白色硬穗基地，用接种针挑出大豆粒的大小从穗基部到灭菌木屑培养基表面的中心点，用记号笔做好标记。用同样的方法接种20-30瓶。 4.2 种子花瓶分离雌种花瓶打碎后，用接种铲取出子实体，挖出表面培养基，挖出耳廓表面黑点，挖出周围木屑耳廓，露出整个耳廓。用接种针将黄豆粒大小的穗基挑到灭菌后的木屑培养基表面中心点，用记号笔做标记。用同样的方法接种30-40瓶。 4.3 耳廓种瓶由于银耳菌在生长过程中表面含有银耳灰分菌丝，在新的培养基上采摘菌体即可萌发，菌体可喷出并萌发银耳孢子。经过半个月的培养，两种菌丝生长正常后，在接种箱中挑出表面的穗。继续培养约25天使银耳子实体长出，选择子实体和菌丝生长符合银耳品种特性的母种进行繁殖，方法同上。 5、菌种培养关键技术将接种后的培养基置于21-23的培养室中培养，每天通风2次，每次30分钟。 7天后检查是否有污染，及时清除污染。每15天检查一次，待菌丝距瓶底1cm时再检查一次，主要清除污染、菌丝不规则、变色不良等。 35天左右，选出子实体生长旺盛，花形圆润直立，花穗白而粗，花径3-4厘米。瓶内壁菌丝生长旺盛，爬壁能力强。恢复活力。 6、纯化复壮优化品质将上述方法得到的菌种按无菌操作要求放入接种箱中，用接种铲铲除基质块表面的老菌丝，取中、下基质块，挑取黄豆粒大小的基质块，接种于灭菌的木屑培养基中（其培养基配方与上面介绍的相同）。
使用相同的方法连接30 到50 个瓶子。置于室温21-23的培养室中培养，连续7天检查是否有污染，及时清除污染。每15天检查一次，待菌丝距瓶底1cm时再检查一次，主要清除污染的、不规则的菌丝、变色不良的。培养35天后，香灰菌丝生长均匀，取食快，白色毛球胶化快，出穗早，花形圆直，耳片伸长好，无杂菌污染.栽培品种进一步繁殖并用于生产和栽培。 7 讨论优点：银耳菌种保持性状好，银耳菌丝纯，香灰菌丝强，结果早，生长快，产量高。缺点：多个基底内分离也会造成物种退化，在现有的肉眼观察条件下无法很好地发现。致使杂菌、放线菌（俗称肉桂酸菌）、细菌等的潜伏和退化仍无法克服，造成种质不纯，影响栽培效益。因此，需要进一步研究，从原料选择、灭菌、接种、栽培等环节加强管理，是提高品种稳定性的重要手段。 （钟长科）
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