如何生产银耳菌种

(1)母种和原种将分离纯化的银耳菌丝体和香灰菌丝体分别在试管中培养。生产母种时，先将银耳菌丝取出，膨大至所需管数。然后置于25培养至银耳菌落直径1cm左右。此时，在每个装有银耳菌丝体的试管中，接种极少量的香灰菌丝体，待两者长成一起，即可出售或用于原种生产。如果先连接香灰菌丝，由于香灰菌丝生长快，很快就会覆盖坡面，很快消耗养分，之后连接的银耳菌丝就不容易长出来了。如果在试管中同时接种香灰菌丝和银耳菌丝，会出现银耳菌丝少，香灰菌丝多的缺陷。因此，在生产银耳母种（试管种）时，一定要注意接种顺序，控制好两者的比例。 (2) 银耳及其“伴生菌” 在可以人工种植的食品和药物中，属于这一类的细菌只有银耳和金木耳。它们子实体的形成，除了纯银耳菌丝外，银耳还必须有“伴生菌”的帮助，即灰耳；金穗除了纯正的金穗菌丝外，还必须有坚硬的革质菌的帮助，两者缺一不可。在正常情况下，银耳和金木耳的纯菌丝体生长非常缓慢，分解木质素和纤维素的能力极弱。养分，否则不可能形成子实体。因此，在繁殖银耳和金穗品种时，必须将两种相应的菌丝嫁接在同一培养基上进行混合培养。现以银耳为例，介绍两种菌丝混合制种技术： 1、斜母种混合嫁接法：取纯银耳菌丝试管母种和新配制的PDA斜试管，分别放入接种室连同接种器具（箱），按无菌操作进行转移，即用培养基挑取米粒大小的菌体，转移到空白试管的斜面培养基中，加入棉花塞，然后置于22-24恒温培养6-8天。待银耳菌丝长到绣球花黄豆大小时，连同香灰母种移入接种室（箱），用接种铲置于距银耳2厘米左右处根据无菌操作纯菌丝体。小块香灰菌丝母种，培养2天后接种块上可见白色菌丝，7天左右形成白色毛球覆盖银耳纯菌丝球，表面可见白色毛球12-15天后白色毛球顶部有红色和黄色水珠，表示成功。需要指出的是，用斜面银耳和白蜡木耳混合母种扩原种时，应将斜面前后两端切掉，只留绣球形银耳。转移应使用菌丝体和附近的黑灰色香灰菌丝体。因此，一个斜雌种子只能接收一瓶原始种子。 2、瓶装木屑原种混合法如果没有纯银耳菌丝体，培养银耳孢子产生孢子母种，然后插入瓶装木屑制成的白蜡木母种培养基中，混合培养.根据接种要求，按1个香灰斜母种扩12-15瓶木片培养基的比例，放入香灰菌母种、灭菌瓶装木片培养基的试管中，将接种用具一起放入接种盒中，按无菌操作，用接种铲挑取黄豆大小的白蜡菇母种一块，插入木屑培养基瓶中。接种完毕，移至24-26培养，约2天后，接种块上可见白色菌丝萌发。之后要隔天检查，发现有细菌要及时发现并消灭。一般经过11天左右的培养，香灰的菌丝可伸入培养基3厘米左右。此时培养基表面可见灰褐色或深褐色分泌物，说明香灰菌丝生长旺盛，应及时插入银耳。芽孢杆菌属。按照1:12-15的比例，取银耳孢子母种试管和香灰培养木片培养基；将它们一起放入接种室（箱），用无菌接种刀按无菌操作菌丝体表层切香灰，再用无菌接种铲挑取少量银耳孢子，插入香灰菌丝体。混匀后，将瓶子移至23-25培养，约10天后，可见银耳孢子接种处长出粗大的白色菌丝。继续培养18天左右，会出现红色和黄色的水珠，再过25天左右，可以看到扭结状的子实体原基，说明培养成功。 1瓶这样的木屑混种可扩展到30-40瓶原种（二次种）。

(3)种植品种的制作，根据原种的生长情况、穗基的大小、“喂养”的深度，确定每瓶原种应扩瓶的数量。银耳菌丝。为了保证质量，尽量控制在40-60瓶以内。如果能将原种搅拌均匀，使银耳菌丝和香灰菌丝混合均匀，每瓶原种还可以接100-200瓶种苗。 （四）注意事项要生产出优良的银耳菌种，除注意上述无菌操作等要求外，还必须注意以下几个方面： 1、具有生物学特异性的银耳菌丝体和香灰菌丝体的协调也具有特异性。因此，为了生产出有效的银耳菌种，必须从同一块真菌中获得银耳的纯培养物（包括酵母样分生孢子或银耳菌丝）和纯香灰菌丝体。从不同地区或同一地区的不同耳材（树种）获得的银耳菌丝体和香灰菌丝体不能随意交换和组合。否则，有失败的可能。交换结合的效果要根据银耳菌丝在木屑培养基中的定植情况、果穗基部的大小、切片的开度来判断。凡是能继续生长、形成穗基、顺利开片的银耳菌丝，均可继续膨大用于生产，否则不能使用。 2、接种比例：根据银耳菌丝体生长缓慢，香灰菌丝体生长快的特点，在纯混合培养中，必须注意银耳菌丝体和香灰菌丝体的接种比例。为了控制两者的接种比例，采用先培养银耳菌丝体，再加入香灰菌丝体的方法最为理想。银耳菌丝的接种比例要达到1000:1一点也不为过（银耳菌丝长到直径1cm左右，里面有上千个菌丝，加几根香灰菌丝就可以了).否则银耳菌丝极少，香灰菌丝占绝对优势，以后就没有或很低的出穗率。如果采用在香灰菌丝体中加入酵母样分生孢子的方法生产菌种，那么银耳酵母样分生孢子的数量是非常多的，每毫升培养液中银耳酵母样分生孢子的数量高达10亿-100亿。将酵母状分生孢子液添加到香灰菌丝生长的木屑培养基中，因为酵母状分生孢子没有集中在木屑颗粒中，并不是所有的酵母状分生孢子都能萌发成菌丝体。因此，该方法生产银耳菌种的效果不是很理想。如果得不到银耳菌丝，

　　3.培养条件银耳纯菌种（酵母状分生孢子或银耳菌丝）的培养条件和银耳原种、种植种（混合培养）的培养条件是有一些不同的。因此，必须注意混合培养的条件，使银耳菌丝和香灰菌丝都能适应同一培养基，同一培养条件。例如将温度控制在20-28℃范围之内（最好是23-25℃）。原种的含水量控制在65%，种植种的含水量控制在65%-70%之间。因为原种培养基稍干，有利于银耳菌丝的生长，不易产生酵母状分生孢子，有利于扩大为种植种；而种植种稍湿一些，有利于酵母状分生孢子的产生和繁殖，此孢子液渗入木屑培养基深处，和香灰菌丝均匀混合，可以弥补银耳菌丝“吃料”不深只长在表层的缺陷，使出耳率更高，更稳定。

　　还必须根据每一瓶原种耳基生育的状况，来确定该原种是否可以扩大为种植种，以及每瓶应扩大几瓶种植种。凡是混合培养后，能使银耳酵母状分生孢子萌发，银耳菌丝能继续生长，形成耳基，耳基能不断长大的组合，都是有实际应用价值的菌种。原种经严格挑选，凡耳基大，银耳菌丝生长多（吃料深的），香灰菌丝粗壮有力，搅拌后扩接的瓶数就多。反之，就不应扩大为种植种。为了更加保险起见，每瓶以扩大40-60瓶为宜。总之，必须使每一瓶新接种的培养基都有银耳菌丝和香灰菌丝，或酵母状分生孢子和香灰菌丝。或者把原种搅拌之后，塞上棉花塞再培养3-5天，使搅断的银耳菌丝再生新的菌丝，这样才能保证种植种的质量。

　　4.提纯复壮防止菌种因长期使用，生活力降低，出现耳片发黄，不易开片，再生力差的毛病。根据生产的方式选用不同菌龄、不同生理成熟度的银耳菌株。如段木种植时，应选菌龄小，成熟度低，银耳气生菌丝一白毛团旺盛，不易胶质化的菌株；瓶栽时，应选菌岭大，成熟度高，白毛团小，容易胶质化并易开片的菌株。香灰菌丝应选爬壁力强，羽毛状分枝长的，分解木材能力强的菌株作为段木种植的菌株，而代料种植时，香灰菌丝要稍“弱化”一些的菌株才好，否则满瓶、满袋都是香灰菌丝，有限的营养都被香灰菌丝消耗掉，银耳反而长不大。

　　原种贮藏的时间太长，耳基很大，培养基的养料消耗过甚，菌种的生活力已衰退，应弃之不用。否则使用效果还不如适龄的种植种再扩大培养的菌种。

　　5.母种保存母种应贮藏在4-15℃的冰箱中。每1-3个月移植一次。原种若不马上使用，也应保存在低温、干燥的场所。种植种满瓶后至45天之内就应尽早地种下去。

　　银耳纯菌种长期单独保藏，所长的子实体有变黄的趋势；而和“香灰”菌丝混合培养，并经过长期保藏，子实体较不易变黄。为了得到雪白的银耳，菌种应从色泽洁白的银耳（野生的或家生的）中进行采种。保种3年以上就应注意色泽的问题。