银耳菌种的分离方法

银耳菌种分离可采用菌种分离或组织分离。 1、耳材的分离选择子实体大、无菌、新鲜耳材的新鲜耳材作为分离材料。在有子实体的部位锯2-3片1厘米厚的木屑，带入接种箱中。木屑通过浸入0.1%氯化汞溶液中30-60秒来消毒。用无菌水冲洗，擦干水分，用手术刀将木屑切成小块，然后置于PDA培养基上，每支试管一块，23-25培养。几天后，会长出白色纤维状菌丝，培养基颜色逐渐变成黄褐色直至黑色，同时分泌淡黄色水滴。如果没有杂菌，则分离成功。挑选一点白色菌丝体并在PDA 培养基上扩大。待菌丝不动，长满坡面后，在树状米糠培养基上鉴定出选出的菌丝。实体原基大而结晶，适合播种。 2、组织分离法在培养室内，选择一批花形大、穗粗、颜色白的作为分离材料分离羽状菌丝：从瓶内培养基深处取少量木屑或袋，接种于PDA 培养基上，25培养。待菌丝长出后，挑出生长旺盛的菌丝移植，即可得到纯羽状菌丝。银耳菌丝体的分离：将剩余的分离材料阴干或晾干，干燥后，将银耳营养菌丝体团（俗称耳根）放入干燥器中的培养基中，放浓硫酸或磷10-20天后，剥去菌丝体，挑取少许菌种木屑于穗根内，接种于表干的PDA培养基上，25培养. 5-10分钟后即可分离出银耳菌丝。 3、菌种组合先摘银耳菌丝，长到1厘米大时，再摘羽状菌丝。羽状菌丝恢复生长后，可作为原种的接种材料。原种培养基为木屑78%、米糠20%、石膏、蔗糖各1%，加水1.2-1.3倍。材料混合均匀后即可装瓶，用棉塞消毒。将分离真菌或组织分离得到的菌种接种到培养基中，室温控制在20-25。银耳栽培有木屑菌和木块菌两种。木屑菌种的制备与原种相同。木块株多用于段木栽培，木块有圆柱形和楔形两种。柱状菌：树种的枝条有桑、枫、梨、梧桐、紫穗槐等，切成直径1.2厘米、长1.5厘米的小块，晒干备用。制种时，将干木块浸泡在水中约12小时，按照木屑和米糠培养基的配方与混合的培养基混合均匀，比例一般为5/1，混合后装瓶，盖上盖子材料表面铺一层薄薄的培养基，压平，塞上棉塞，灭菌、接种、培养。楔形菌：楔形菌是将木条加工成高1厘米，宽0.5厘米的楔形木块，然后装瓶，接种。