银耳菌种的生产


要获得银耳的高产优质栽培,菌种是关键。纯菌株的获得一般涉及孢子喷射和真菌分离,即有性繁殖和无性繁殖。无性繁殖方法虽然简单,但菌种纯度不高,容易发生退化,产量也较低;有性生殖菌纯度高,产量高,但方法较复杂。无论哪种方法都必须有两种菌种,银耳和香灰丝。灰耳被称为银耳的伴生菌。 1、孢子喷射分离法(1)种穗的选择对种穗的要求应为正常穗、穗大、形好、果肉厚、切片大、色白、切片正常、无细菌、无病害、八成熟果身体被选中使用。 (2)试管培养基的制备:去皮土豆200克,葡萄糖20克,琼脂20克,水1000毫升,pH值(pH)5.2-5.8。制法:将土豆洗净,去皮切片,加水1000毫升煮沸30分钟,捞起用八层纱布过滤,溶液中加入琼脂和葡萄糖,煮至琼脂完全溶解,加入加水至足量,调节pH值,趁热分装于试管中。装量约为试管总长的1/4。拧紧棉塞,将10支试管用纸包成一捆,放入高压灭菌器中,在1.2kg/cm2压力下保持30分钟。取出后,趁热将试管排出斜面,冷却后使用。如果装入三角瓶中,培养基厚度为1cm。 (3)银耳孢子的喷射取烧杯4个,不锈钢钩,接种针,剪刀,镊子,无菌水,无菌纱布,酒精灯,0.1%氯化汞溶液,连同马铃薯琼脂培养基放入三角瓶和种穗入接种盒,用10ml福尔马林和10g高锰酸钾熏蒸,灭菌30分钟,先用酒精灭菌3个烧杯,分别倒入无菌的水和0.1%氯化汞溶液的另一个烧杯中,用剪刀剪开剪下几片又厚又大的耳瓣,在水银溶液中浸泡5-10秒,迅速将3片耳瓣一一放入无菌水中。在烧杯中各浸泡1分钟,然后用消毒纱布吸干水分,用钢钩迅速挂在三角瓶中,用棉塞塞住。为防止杂菌感染,耳片距离培养基约3cm。置于培养箱中,温度保持在23-25,培养24小时。可以在培养基表面看到雾状的孢子卵。此时可将接种箱内的钢钩和耳片取出,用棉塞塞住。继续培养2-3天后,培养基表面可见边缘光滑、中间凸起菌落的白色糊状物,即为银耳孢子。如果没有杂菌,可采用划线法或稀释法,得到纯孢子后再进行扩增。 2、香灰菌丝体的分离取子实体理想的木耳一段(节材栽培的银耳木段),去掉穗基和树皮,用75%的酒精擦洗表面,杀死附着在上面的木耳表面。杂菌,移入装有敌敌畏或乐果的容器中过夜,以杀灭或驱除耳根周围的虫、螨。取烧掉的4只,1只倒入0.1%氯化汞溶液,3只倒入灭菌水,连同酒精灯、灭菌刀、接种针、灭菌纱布、斜管、灭菌耳水一起放入接种盒中消毒灭菌.先将木耳浸入氯化汞溶液中约20秒,然后分别转移到3个无菌水烧杯中依次洗涤3次,然后用无菌纱布擦干水份,用清水洗去木耳表面的老菌丝。用消过毒的小刀,把菌子中间的黑色花纹掰开,用接种针挑出一块麦粒大小的,迅速移入倾斜的试管中,用棉塞塞住,用这个连接所有试管的方法。您必须一次多拿一些试管来筛选Purify。然后将其移入电恒温器中,保持温度在23-25,2-3天后,香灰菌丝即可生长。如发现红色、绿色、黄色等被杂菌感染,应及时清除。纯香灰的菌丝白色、粗而短,具有很强的爬壁能力。分离后应根据其较强的爬壁能力,及时转移至高纯试管中,以获得理想的香灰菌丝体。

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