用试管做斜面培养基，接种原试管种（保留种，用于生产的母种为生产母种，可用于扩大原种。 1. 培养基配方配方-综合马铃薯中型马铃薯200克葡萄糖20克磷酸氢二钾2克硫酸镁0.5克维生素B1 10毫克琼脂20克水1000毫升PH值天然配方II合成中型马铃薯20克葡萄糖20克磷酸二氢钾2克蛋白胨10克牛肉提取物5克酵母膏5克硫酸镁0.8克水1000毫升PH值自然2.培养基制作方法先将土豆洗净去皮，切成薄片，称重200克，加水1000毫升，煮沸备用15-20分钟，用4层纱布过滤，取滤液加水至1000毫升，加入琼脂20克，再加热，待琼脂融化后，加入其他方剂中的药物。培养基的分装要在培养物凝固前进行（琼脂培养基40凝固）一般用漏斗，或者分装瓶，下端接一段软胶管，接一段玻璃水橡胶管下方连接有软管，橡胶管上装有止水弹簧夹。内，但不要接触管壁，每根试管装载管长1/4 的体积。安装后插上棉塞，每10支试管扎一捆，用塑料纸密封棉塞，待用。 3.灭菌将分装后的试管捆扎好，放入高压蒸汽灭菌器中灭菌在1公斤/平方厘米的压力下（锅温达到121）20分钟，使微生物包括芽全部被杀死。当压力降到0度时，慢慢放掉锅内的气体，待培养基未凝固时，将试管放在斜面上。 4、接种培养将菌种插入28斜面试管中，3天后降温至24继续培养。大约12-15天后，菌丝会覆盖整个试管坡，成为（生产）母种。原种是将原种接种到原种培养基上，对原种进行扩繁育种，原种一般用坛子或袋子包装。 1、培养基配方： 木屑和麸皮培养基阔木78%麸皮20%糖1%石膏粉1%水65%PH值天然配方2棉籽壳木屑混合培养基棉籽壳90%糖1%麸皮5%过磷酸钙3 % 石膏粉1% PH值天然2.调味装袋新鲜无霉更换原料，按生产需要量计算配料总量，将麸皮和石膏粉在培养料中混合均匀，糖溶化和过磷酸钙在水解时，按上述干料量加水，比例为1：1，3拌匀，堆肥水分为60%，水分以手指间有水滴为宜紧紧握住堆肥时的堆肥。灌装30分钟后，装瓶（袋）。使用机械或人稍微压实工具包。 （塑料袋规格通常为9*21*0.04，单层袋宽9厘米，长21厘米，厚4厘米）。和瓶子一样，然后用合适的卫生棉条塞进袋子里，或者用牛皮纸包起来。 3、灭菌原种的灭菌方法有高压灭菌和常压灭菌两种。高压灭菌也称为加压蒸汽灭菌。灭菌原理：高温（120）高压（1kg/cm2）灭菌2-3小时，杀死包括孢子在内的所有微生物。常压灭菌称为循环蒸汽灭菌。由于灭菌设备、条件和基本因素的不同，温度在90-103之间变化。菌种，一般在100下保持8-10小时。 4、接种培养无论接种箱还是接种室，接种前必须用0.2%的来苏尔或漂白水对接种箱或接种室进行灭菌，然后将灭菌后的料瓶（袋）装入接种箱或接种室，用紫外线照射30分钟，在无菌条件下接种，或接种前用气雾剂密闭熏蒸熏蒸。即点燃气雾剂消毒时应关闭门窗。接种室消毒，每间点燃3盒50g气雾剂；仅2包40克重，分成20包，每次可点燃接种箱消毒（2克/包）。一般为18180cm，每管母种可接4-6瓶（袋）原种。将接种好的菌种瓶（袋）放入菌室内进行培养。培养室温度22-26，相对湿度80%以下，光线为弱散射光。发芽期要保持良好的通风条件。
原种从接种到菌丝长满瓶（袋）需要30-40天。栽培品种生产方法将原种进一步繁殖成为栽培品种。栽培品种一般装在15330.05的塑料袋中，用无棉盖密封。一瓶原种可收栽培种50瓶（袋）。培养基配方和配料、装袋、灭菌、接种、菌种管理同原种塑料袋制。菌种品质的鉴定菌种的品质不仅关系到菌种能否成功培养，还关系到产量和效益。栽培木耳必须严格控制质量。菌种的质量鉴定有两方面的意义：一是分离培养的菌种是否为栽培所需的菌种。二是菌株是否为优良菌株。黑木耳品种的正常菌丝应该是白色的，有活力的。真菌培养45天后，瓶（袋）间自上而下出现菊花状或梅花状胶体原基，颜色为浅褐色至深褐色。若瓶（袋）底有淡黄色液体，或上半部出现黄色粘液，则培养基收缩，为过期菌株，应淘汰。如果该菌种的菌丝只长到瓶（袋）的1/3-1/2，且有淡黑色胶状耳基，说明该菌种过早，或膨大次数过多，或修炼室内的光线太强了。如果菌丝只长在一个角落，不蔓延，可能是培养基太干、太湿或干湿不均造成的。如果菌丝蔓延不停，且有明显的抑制线，多为杂菌所致。在发芽过程中，如发现杂菌，应及时检测，不得使用。 （本文仅供参考）编辑：XS
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