如何规范制作双孢菇三级菌种

三级双孢蘑菇菌种多以麦粒为原料栽培。在实际生产中发现污染率高，或出现异常现象。原因是菌种的生产操作不规范。现提出具体的标准操作技术，供菇农参考。

1.原料处理：将牛粪粉碎，过筛，与水按11.2的比例混合，堆放发酵，每天翻堆，20天左右。牛粪粉变成褐色，有正常发酵草料的清香，晒干备用。浸泡彻底后，取出无水分的小麦，适当遮阴通风。发现表皮干燥时，轻轻喷上细雾使其湿润，24小时后即可发芽。麦芽长到1 ~ 2cm时即可使用。

如果有虫蛀的麦粒，也可以用，但是虫蛀的麦粒有洞，淀粉容易流出，一定要清洗几次；然后倒入pH值为8 ~ 9的石灰水中，浸泡6小时后煮20分钟左右。当麦粒没有白心时，取出麦粒，用冷水冲洗干净。

2.基本配方：小麦粒100kg(以干品计)，牛粪粉30kg，石膏粉1kg，碳酸钙1.5kg。

3.基质混合：将小麦粒与牛粪粉按10.2的比例混合，同时加入其他辅料。注意让牛粪全部附着在麦粒上，水分不足时适当喷水。剩余牛粪粉备用。

4.装瓶操作：小批量生产一般不用标准瓶，而是酒瓶、葡萄糖玻璃瓶等。用于装瓶和消毒。为了降低生产成本，可以使用500ml的输液瓶。先在瓶底放一把牛粪粉，约1 ~ 1.5cm厚，再放麦粒。装瓶时，轻轻扭动瓶子，使麦粒低于瓶肩1厘米。然后，放入1 ~ 2把牛粪粉，用“L”形工具压平压实，再放入卫生棉条中。

5.灭菌冷却：采用高压灭菌法，压力保持在0.15 MPa，时间2 ~ 2.5小时。灭菌后，压力降至零后，即可将瓶子取出，移入冷却室或接种室。房间要提前3天打扫干净，喷百丙稀溶液。当瓶子冷却到30时，可以进行接种。

6.接种操作：室内喷洒赛百09溶液后，用75%酒精擦洗原种，打开接种净化器，10分钟后开始接种操作。每瓶(500 ml)原种可接40多瓶。

7.生菌培养：培养室(棚)要提前打扫干净，地面要浇水，各种病害的溶液要喷在地毯上。密封2天后，地面要撒上石灰粉，接种的菌种才能搬进去。产卵期间，尽量将养殖室的温度控制在25左右，不超过28，如果安装水温空调，温度可降至22左右。一般养殖户达不到条件，可以用当地的方法降低温度：产卵棚内地面用砖块垫高20cm，铺上新的塑料薄膜，产卵瓶垂直排入地下水，每天换水1-2次，使产卵瓶内部保持在25以下。每隔3天左右喷药预防，交替使用白冰杀和赛百09；当发现蘑菇蚊成虫时，立即喷洒高效氯氰菊酯将其杀死。

8.除杂处理：接种后第三天，检查除杂情况，如发现有双孢菇菌丝以外的菌瓶，立即移出室外。如果真菌瓶被链格孢菌污染。用方便袋从上到下盖住木耳瓶，慢慢取出。对于一般杂菌污染，可将材料喷洒药物后倒出，晒干后再用；链格孢属造成的污染。这些材料应该从培养室中倒出，烧掉或深埋。空瓶要用70以上的热水烫过，再用前洗净。

9.暂时贮存：大约35 ~ 45天后，菌种就会发芽。暂时不用的菌种应该储存在一个低地

瓶内菌丝不壮且分散，或有“灭菌”或“破菌”现象。物质变色、结块或皱缩，有白色和淡黄色圆形块状或不规则暗斑。有杂菌和螨虫滋生，无蘑菇香味，漂白粉或鱼腥味等。都是不合格的菌株。如果菌丝黄白色，且菌丝正在萎缩，无法生长，或生长过程中形成细菌，则为培养基潮湿或陈旧的菌株；瓶内上层菌丝收缩干燥，下层菌丝生长良好，原因是培养基太干，培养温度太高。如果长势不均匀，说明麦粒的浸泡和预煮时间不够；如果菌丝在生长过程中逐渐变黄，说明培养温度过高；如果菌种瓶上部有厚被，则是生产性能差或生理特性老化的菌种，不宜使用。经过高温培养的菌种，播种后不易食用，菌类生长缓慢。