草菇二级菌种生产种的制备

次生种是将初级种移植到有次生种的培养物中制成的菌株。次生种可直接作为生产种。一般将次生种转移到同一堆肥中进行扩培，成为生产种。次要品种一般用750ml蘑菇瓶或塑料袋包装。 (1)堆肥配方1的制备：秸秆90%、麸皮(米糠)9%、石膏粉1%。制作方法是选用金黄色、无霉变的干稻草，剪成3厘米长，用清水浸泡12小时左右，使其充分吸水（只有吸水的稻草才容易杀菌）彻底），捞起，挤出多余的，按水分比例加入麸皮和石膏粉，拌匀。湿度以手上有水滴连续滴水为宜。然后装入瓶中，一边用木棍压紧。松紧要均匀适度。一般750毫升的瓶装干草是75克。培养料以距瓶口5厘米左右为佳，不可太满。然后用一根锋利的木棒在中央划一个小孔，并延伸到瓶子的中部，以方便接种。洗净瓶口内外附着的培养基，擦干瓶口内壁，套上棉塞，消毒。配方二：94%棉籽壳、5%麸皮、1%石膏粉、6%石灰。制备方法：将棉籽壳预湿，加入辅料。含水量在60%左右时可装瓶（袋装）。配方三：麦粒98.5%，石膏粉1%，碳酸钙0.5%。制作方法：先将麦粒浸泡在12%-15%的石灰水中约10小时，加热煮沸15分钟，然后过滤，让麦粒稍干，冷却后加入石膏粉和碳酸钙混合，装瓶立即地。装瓶时，在瓶底垫一层薄薄的湿度为30%40%的谷壳，瓶肩垫一层薄薄的棉籽壳或谷壳作为密封材料，以减少细菌滋生。污染。剩余堆肥的装瓶方法同配方一。这种方法适用于次要品种，如生产品种，营养较好，容易造成污染。 （2）灭菌装满堆肥的瓶（袋）应当天灭菌，以免堆肥发酵变质。灭菌压力137-147kPa，灭菌时间1.5-2小时。如果使用常压杀菌炉，需要将水烧开后保温8小时，闷一夜，同样可以达到杀菌的目的。 (3)接种灭菌后立即取出菌瓶(袋)送至接种箱或超净台，冷却后接种。一般每个一级种子接种48瓶二级种子，每瓶二级种子接种生产种子60瓶左右。 (4)培养接种后，将所有菌株移至培养箱或培养室。最佳室温为30-32，24小时后即可查看。菌丝封口前，最好每天检查一次，及时挑出污染菌。最佳菌龄为满瓶菌种后35天，750毫升蘑菇瓶菌龄为2530天。特别要指出的是，培养室要清洁通风，室外环境也要清洁。