应用液体菌种规模高产栽培白灵菇技术

1 固体母种制作将冷藏母种提前3-5天活化，制板，挑取优质菌丝尖进行提纯复壮。将新鲜、无霉变的吸管切成3cm段，200g；另取去皮发芽的土豆200克，切成棱形块，约金桔大小，放入冷水盆中待用。用不锈钢锅，加入2000mL自来水（pH7.07.5）与上述马铃薯、稻草同煮，煮沸30分钟，用多层医用纱布过滤，取滤液近1000mL ，加入琼脂20g，完全溶解后，加入葡萄糖20g，七水硫酸镁1.5g，磷酸氢二钾3g，VB1，4mg完全溶解后，固定液1000ml，pH自然。 45以上，趁热包装110-125支18mm180mm硬质试管，加棉塞，用双层聚丙烯塑料薄膜包好，每捆7管灭菌备用。当灭菌压力达到0.12MPa时，保持25分钟。冷却至45，取出培养基试管，轻轻转动试管，防止结露和积水，立即倾斜表面，去除涂层，防止污染。 24 小时和48 小时后检查细菌和霉菌。每批次试管中培养基的污染率不得超过2%；否则，必须重做。培养基灭菌合格的标准是斜面光滑如镜面，无凝露、麻点、杂菌。 18mm180mm母种保存用硬试管，每支试管可转30-60个生产母种。在无菌区，挑取优质菌丝体，迅速接种于试管培养基上，点接种。 25条件下，避光培养，20-24小时菌丝开始萌发，培养10-12天菌丝长满管。在此期间，每天检查一次。如果有杂菌，虽然没有污染，但生长不旺盛，一并丢弃，严控菌落。 2 液体培养基的制备及液体菌种的培养液体菌种的生产采用天津市丰和食用菌有限公司实验设备厂生产的FHCC-LSI-64设备，由天津市化学与生命科学学院监制。天津师范大学。液体菌种的生产有两个必要条件：熟练无菌操作技术；菌种生产环境干燥、清洁，温度可控制在26-28。 2.1 液体培养基的制备：土豆去皮去芽，切成棱形块200g，蘑菇根适量，麦麸50g，放入不锈钢锅中煮沸30min，用多层医用纱布过滤，取滤液加葡萄糖20g，磷酸二氢钾3.0g，硫酸镁1.5g，维生素B1 4mg，完全溶解后，定容至1000mL。准备数个，装入40个圆形平底玻璃培养箱（2000mL），容量1500-1600mL，加磁铁1块，高压灭菌2小时，28-30接种，设置电磁控制器培养的。 2.2 接种判定和培养终止在无菌条件下，挑取试管中母种的菌丝体，漂浮在培养箱中。多点接种，28静置培养48小时，待菌体出现后，置于电磁控制器上，26-28培养。培养液颜色由深变浅，菌丝碎片既不下沉也不上浮并与液体混合，培养84-96小时即可终止培养。此时视为壮年，可接种疫苗。 2.3 液体菌种鉴定液体菌种静置培养48小时后，或培养结束后，在无菌条件下取菌体10mL进行检验。一看：用放大镜看是否有红、橙、黄、绿、蓝、蓝、紫等杂色，或液体表面有菌膜等异常现象，则视为被污染；如果有异味，则认为是被杂菌污染了。 3 菇条生产栽培菇条生产：当地平均气温稳定在20左右，开始包装。配方：72%棉籽壳、13%木屑、8%麦麸、2%玉米粉、2%石膏粉、3%生石灰、15%菜园土。培养基的含水量为60%62%。拌匀，堆发酵，加入接种剂。发酵料堆底宽1.2m，堆高1.0m，堆长不限。自然桩建成后，通风孔间距为40-50cm。当料堆温度达到55左右时，保温48小时，然后第一次翻料，对整个料堆进行穿孔覆盖。当料堆温度达到60-70时，每1d翻转一次料堆，充分转置。总共需要7-8天。当物料颜色均匀呈棕褐色，质地均匀，富有弹性，口感纯正，且物料表面有大量放线菌时，即表示物料发酵成功。 60%的水可以装袋。

选择与栽培品种相同的菌袋，菌袋培养基料柱高度约20cm，加非棉塑料密封盖，6-8小时内装满料，立即灭菌。每个篮子中垂直放置总共20 根蘑菇棒。 0.15MPa高压灭菌2小时，或常压灭菌12-14小时，50-60出锅。 32-35接种，一端接种，接种量40mL/袋，或栽培种每袋25根菇条。品种生产栽培配方：棉籽壳87%、玉米粉3%、麦麸5%、石膏粉2%、生石灰3%。培养基与水的比例为1：1.1~1.2，充分混匀，静置5~6小时，快速装袋，低压聚乙烯管材，菌袋折叠直径（17cm34cm0.05cm），干燥材料550~600g。使用中间有孔的套袋机进行套袋。培养基柱高约20cm，用无棉塑料盖密封，放入篮中灭菌。在0.15 MPa 的压力下高压灭菌2 小时。一端接种，将菌液均匀接种于物料表面，接种量为40mL/袋。在25-28C 下进行常规培养，18-20 天充满菌丝体，比固体菌株短8-10 天。氧原子灭菌器下开放接种，一般为900-1000支菇/人8h。最好4人一组接种。要快开盖、快接种、快封盖。结果菌棒的栽培：菌类生长需要四个基本条件：避光培养、干燥环境、适宜温度、经常通风。真菌生长分四个时期，即：菌丝萌发定植期：接种后，先将环境温度控制在26-28，少通风或不通风，尽量不要移动菌袋。目的是使菌丝尽快度过滞后期，早发芽，早定植。接种后1018h，菌株开始萌发，24h菌丝开始取食定植。 菌丝旺盛生长期：第4天后，菌丝细胞呼吸逐渐增强，产生的热量也逐渐增加。物料温度应保持在19-22

　　③菌丝体复壮期：此时，菌袋表面已布满菌丝体，但是，其内部还未布满也不健壮，所以要对菌棒进行菌丝体复壮。复壮需要18～20℃培养7d左右。

　　④菌丝体后熟期：所谓后熟期，是指由营养生长转入生殖生长的准备期，主要是菌丝细胞内部的生理生化变化，为生殖生长作物质和能量的准备。需要35～45d后熟，及时排除袋内积水（菌丝老化细胞自溶出现的黄水）。控制温度24～25℃，控制光照在500～800lx，适当减少通气，减少菌棒表面菌皮过多的发生，并对菌棒进行最终分类。

　　4 出菇管理

　　4.1 排场 白灵菇出菇方式有多种，可根据实际情况选择使用。按45～54只/平方米摆放菌袋，560平方米的温室可摆放28000～30000只菌棒。选生长发育一致的菌棒，覆土码垛出菇。只在搔菌的一端出菇，也可不搔菌直接出菇。具体的方法是对所用土进行常规消毒处理，割去菌袋中间薄膜2/3，出菇端留1/3，砌成单排菌墙，10～13层高，层于层和袋与袋之间间隔2cm，用泥勾缝，顶部留水槽，便于后期补营养液。

　　4.2 搔菌 菌丝体生理成熟的指标：一则菌棒内菌丝体洁白浓密；二是菌棒表面出现菌皮；三是菌棒坚硬；四是个别菌棒已出现白色米粒状原基；五是有效积温达2200～2500℃（有效积温＝平均日温×天数）。菌丝体达生理成熟应及时搔菌，即在菌棒一端中央处，挖掉大衣钮扣大小（Φ3.5～4.0cm）的菌皮，露出新鲜菌丝体。搔菌过早、过迟均影响出菇。

　　4.3 养菌 将搔菌后松系袋口，升温至20～22℃，尽量恒温培养，使损伤的菌丝体得以恢复，即在搔菌处长出较多新的菌丝体。个别的会出现气生菌丝，约需要5～7d。

　　4.4 以低温为主刺激原基发生与分化 待搔菌处几乎看不到培养料均为菌丝体时，给予菌棒－2～7℃低温刺激，白天最适宜温度7～14℃，以8℃为中心。昼夜温差应保持10℃以上，连续7～15d左右。大于18℃时，原基难于分化成菌蕾。将空间湿度提高到75%～80%，只是在地面上撒水或沟里打水，并给予通气和散射光800～1500lx的刺激。待原基出现后，继续给予上述刺激，促使其原基分化成菌蕾。此时，应特别注意通氧气。

　　4.5 疏花疏果 当原基为绿豆大小时，解袋口，待有的原基已分化为黄豆大小菇蕾时，上挽袋口的一半，并进行疏花疏果，即留大去小，留壮弃弱，只留1个长势健壮形状规则的菇蕾，且不可改变菌蕾方向或位置。待菇蕾发育至鸽子蛋大小时，将袋口完全割去。

　　4.6 育菇疏花疏果后，迅速调室内相对湿度80%～85%，散射光强度600～1000lx，光照度12～14h/d，提升温度至10～14℃，尽量恒温培养，常通风换气。12～15d即可采收。

　　5 采收加工与保鲜

　　5.1 采收 当白灵菇重120～200g/只，即可采收。采收前1日停水。每天早晚各采收1次。白灵菇可分4个等级，即一级；子实体掌形，菇形规则，菇体洁白，菌盖直径8～150n，每只120～200g，菌盖平展，表面光滑，边缘圆正未上跷，无明显的皱褶或裂痕。菌褶排列整齐，菌柄小于2.0cm。二级：菇体洁白，菇形掌状，菇形基本规则，菌盖直径8～16cm，每只在75～250g，菌盖较平滑或稍有波纹，菌盖基本圆正，没有明显的裂痕，菌褶排列较整齐，菌柄小于2.0cm。三级：菇体洁白，菇形掌状，菇形较规则，菌盖直径7～16cm，每只在50～250g，菌盖有波纹边缘呈波浪形，菌盖表面有细微的裂痕，菌褶排列不整齐，无明显病斑，菌柄在2～5.0cm。等外品：不符合上述三级产品的统称为等外品。

　　5.2 保鲜 将掌形子实体的菇菌柄切至2.0cm，用食品软纸包好每个子实体，放入泡沫箱中每箱3～5kg。30cm×47cm×20cm的泡沫塑料箱，箱重0.45kg。装箱的白灵菇，室内温度在－6～－8℃条件下，可保鲜25～30d；4～10℃下冷藏，可保鲜15～25d；15℃可保质4～5d。如在0～1℃预冷15～20h，5～10kg的箱，0℃（－0.5～0.5℃）条件下可保鲜1～2个月。

　　作者：天津师范大学化学与生命科学学院 300074（郭成金）；天津市丰禾食用菌有限责任公司 301718（阎作树）  《食用菌》2006年05期