食用菌培养基及其制作方法

食用菌培养基是根据各种食用菌生长时对养分的需要，人工配制的营养基质，为菌丝体的生长发育提供养分。就像农作物需要土壤和肥料一样，动物也需要饲料。目前，人们使用的文化传媒种类繁多，种类繁多。无论何种培养基都有共同的特点：一般都含有水、碳源、氮源、无机盐和生长因子。水分是食用菌的组成成分，食用菌的生理活动需要在水分的存在下进行。碳源是构成细胞物质的主要元素，也是食用菌生长所需的能量来源。碳源的主要原料是糖类、淀粉和纤维素类物质。代表物质有葡萄糖、蔗糖、玉米粉、麸皮、米糠、锯材、棉籽壳等。氮源是食用菌细胞质和细胞核中蛋白质和核酸的主要元素，蛋白质和核酸是生命的基本物质。一切生命活动都离不开这些物质。氮源主要有氨基酸、蛋白胨、尿素、硫酸银等，含氮物质有玉米壳和棉籽壳等。虽然培养基中无机盐的量不多；但它是必不可少的。主要是酶的组成成分，调节各种生命代谢活动。如磷酸二氢钾、硫酸镁。生长因子需要量小，是培养基中的一种特殊营养物质。是维持食用菌正常生长不可缺少的生长因子。如土豆、麸皮、米糠等富含生长因子，维生素也属此类。根据营养物质的来源，黄念等同志做了详细的分类，将所有培养基分为三类： 1、天然培养基：是由天然有机物配制而成的培养基。该培养基来源广泛、成本低廉，非常适合蛋白胨的生产。尤其具有营养丰富、制备方便、经济实用等优点。但其他成分无法量化，每批次的成分都不稳定，不适合做精准的科学实验。常用的天然培养基有马铃薯培养基、麦芽汁培养基、杏汁培养基、苹果培养基、麦芽培养基、堆肥培养基等。 2、半合成培养基：在天然培养基中适当增加无机盐，或在合成培养基中加入少量其他有机物质，成为半合成培养基，介于天然培养基和合成培养基之间。主要目的是促进菌丝体的生长。 3、合成培养基：由已知化学成分的有机或无机物质配制而成的培养基。由于各种化学成分已经很清楚，易于控制，适合做一些定性和定量的研究。食用菌母种分离培养基的制备食用菌母种是从孢子分离培养或组织分离培养中获得的菌丝体。通常在琼脂培养基上培养。 1、马铃薯-蔗糖-琼脂培养基（即PDA培养基），适用于常见食用菌亲本的分离培养，又称基础培养基：马铃薯汁1000ml，蔗糖20g，琼脂20g ，PH值5.56.0 制法：先将新鲜无病的土豆洗净，去皮切小片，称200克，加水1000毫升，煮沸20分钟后过滤，滤汁即成。土豆煮汁。再加入琼脂、蔗糖煮溶，然后补水至1000毫升，装入管（瓶）中灭菌备用。 2、葡萄糖-麦芽精-酵母膏培养基（GMY）：麦芽膏10克，酵母膏11克，琼脂4克，水18克，PH值1000毫升。天然麦芽精可以用麦芽汁代替，10克麦芽精可以用18倍浓度的麦芽汁代替600毫升麦汁。 3、豆饼粉培养基：豆饼粉40g 葡萄糖或蔗糖20g 琼脂18g 水1000ml PH值自然法：称取40g豆饼粉加水调成糊状，加水1000ml，煮沸30分钟后，过滤，补足用热水1000ml，加琼脂蔗糖溶解，分装于试管中。

4.玉米粉培养基：玉米粉30g蛋白胨20g蔗糖20g琼脂18g水1000ml pH natural 5.木汁麦麸（米糠）培养基：麦麸（米糠）100g硫酸铁1g蔗糖20克琼脂20克水，1000毫升，pH值5-6 制备方法：用双层纱布将木屑紧紧包裹，煮沸20分钟，取出木屑袋，加水1000毫升，加入琼脂、白糖等，拌匀溶解。 6、小麦籽粒培养基：小麦籽粒200克，白糖5克，碳酸钙5克，水15克，PH值500毫升。 5分钟后，用纱布过滤，水汁分至试管长度的1/3。 7、杏汁培养基（适合蘑菇子实体的发生）：杏干25克，琼脂15-30克，水1000毫升，自然pH值8。胡萝卜培养基（代替马铃薯）：100克胡萝卜、18-25克琼脂20克水1000毫升9、苹果培养基（适合草菇生长）：苹果（压碎）100克蛋白胨2克蔗糖20克琼脂20克水1000毫升10. 高粱培养基（特别适合平菇的生长）：高粱粉30g 琼脂10g 水1000ml 11. 粪便培养基（用于筛选菌种）：马粪150g 玉米粉（汤） 30g 琼脂20-30g 水1000ml 12.酸性培养基（用于分离菌种和培养猴头菇）： 土豆（去皮） 200-250克糖20克琼脂25克柠檬酸1%到5%（灭菌后） 1000毫升水原种、栽培种堆肥的制备原种子由母种繁殖而成，然后制成栽培种进行播种和生产。 1、粪草培养基（适合做蘑菇菌种）：粪草（粪：草=6：4，堆放发酵15-20天）米糠或麸皮90斤，碳酸钙8斤，碳酸钙1斤白糖，水1斤，适量2.麦粒培养基（适合做香菇、凤尾菇、木耳菌类）：泡软蒸透

　　3.木屑米糠培养基（适宜各种木生食用菌的制作）：阔叶树木屑 70％～80％ 米糠或麸皮 20％～28％ 碳酸钙 1％蔗糖 1％ 石膏 1％ 水 调至适量

　　4.棉皮培养基（平菇、凤尾菇）：棉籽壳 99％ 石膏粉 1％　石灰3％

　　5.玉米芯培养基：玉米芯 99％石膏粉 1％

　　6.稻草培养基：稻草 94％ 麸皮 5％ 石膏 1％蔗糖 1％

　　7.棉皮木屑培养基：棉皮 78％ 木屑 20％ 蔗糖 1％石膏 1％ 水料比为 1.2～1.3：1

　　8.羊屎培养基（蘑菇）： 在侵漉屎中，加入1％～3％碳酸钙或1％石灰。

　　9.玉米秆粉培养基：玉米秆 78％麸皮 21％ 石膏 1％

　　棉塞、牛皮纸盖、卫生纸气塞的制作

　　根据所栽培的品种选择适宜培养基，然后即可将培养基分装。分装是指琼脂培养基分装和原种、栽培种分装。 装好培养基的试管、三角瓶或菌种瓶，应立即塞上大小适合的棉塞，以防杂菌侵入培养基。所用的棉花、以白色长绒的不脱脂棉花为理想。也可用人造塑料海绵代替棉花作瓶塞，效果很好。棉塞表面要光滑，松紧度要适当。温差变化比较大的地方，棉塞要塞紧一些。制作棉花塞时，先把棉花铺开，撕成5～6厘米宽的长条，用手握紧，粗度适当，棉塞要稍紧密，塞入后也不能起皱成沟。否则容易掉落，杂菌也容易跑进培养基。塞好棉塞的空试管，可用烘干箱加热到15℃左右，干热灭菌1小时后备用。 菌种瓶棉塞和试管相同，只是粗细之别。 另外，缺少棉花的地方，可用双层牛皮纸中间加一层棉花作瓶塞。 还可用耐高温塑料纸作瓶塞。目前有些地方的菌种瓶是塑料纸中间打一小孔用胶布封严，接种时只要按操作把菌种放入小孔的办法，也可采用。母种试管口用卫生纸作透气塞。装好培养基后，试管口擦干净，把卫生纸（普通或高级均可），卷成同试管口一样粗细的筒，剪成5厘米长的小段，每段塞入试管内3厘米，外留2厘米，再扎成捆，用牛皮纸包严、灭菌。接种后还可用塑料胶布将试管口与卫生纸联封。培养按常规办法。原种瓶或栽培种瓶用卫生纸作通气寨时，先按一定配方装满瓶后，洗净瓶内外壁，把卫生纸剪成5厘米宽条幅，每条卷成同瓶口一样大小的简，塞入瓶内3厘米，外留2厘米；灭菌后接种、培养。 塑料袋制种时，若用"两头"接种，装料后扎紧两头，然后将卫生纸剪成3厘米长、1厘米粗的小卷，用牛皮纸包 严同塑料袋一起装锅灭菌，再放入接种箱消毒，操作时将袋口解开，接入菌种，再将卫生纸小卷夹在袋口中间，用线绳或皮筋扎紧即成。接种完毕后，按常规放入培养室管理。用塑料袋生料栽培食用菌时，两头可用卫生纸作通气塞。 通过我们多次试验，卫生纸作透气塞，不会像棉花那样湿塞，避免了因湿塞而引起杂菌污染；卫生纸通气性能好、吸水性强、杂菌少，蒸发到瓶口的水珠不易积于料面；以往我们用棉花、塑料环，成本高，工序多，用卫生纸可大大降低成本。

　　培养基的灭菌

　　按上述培养基装好后就要立即进行灭菌；将其中的杂菌杀死，然后才能接入我们所需要的纯菌种，进行培养。不论是母种分离时用的斜面培养基，还是原种、栽培种瓶培养基或聚丙烯塑料袋培养基，一般都采用热力灭菌法。 高压蒸汽灭菌法：若是斜面试管培养基。应先用牛皮纸扎成捆，标明棉塞为上端部分，然后竖直放入高压锅内，进行灭菌。在1．5公斤／平方厘米压力下维持30分钟，即可达到灭菌目的。开锅取试管时，趁热放成斜面。经试验若无杂菌，可用。若有杂菌时，重新灭菌。 灭菌材料如是原种和栽培种，应在15公斤／平方厘米压力保持60～90分钟。这样才能达到灭菌目的。达到所规 定的时间后，应停火并逐渐排去蒸汽。待压力表的指针回复零位时，再把消毒锅的螺栓旋开，打开盖子，取出瓶子。停火排汽时必须注意，排汽阀不能一下子放大，只有一点一点开，让压力表慢慢地回复到原位，然后再揭锅盖。如果排汽过猛，锅内压力急速下降，则会造成棉塞脱落和玻璃容器破损。常压蒸汽灭菌法：如没有具备高压锅，可用土蒸锅或蒸笼进行。在常压的条件下，以 100℃的温度持续6-8小时，以杀死培养料中的各种杂菌。也可常压间歇灭菌3次。可先蒸1小时，然后隔24小时又如法蒸1次，连续3次，就可达到灭菌目的。 培养基的灭菌效果要经常检验，是否灭菌彻底：一般情况下，灭菌后的培养基最好应放在要培养的温度下，空白培养1周，可检查灭菌效果。如果在这一段时间内培养基没发生任何变化，说明灭菌效果良好，可以使用。