黄瓜花粉萌发实验

近年来，黄瓜育种进展迅速，涌现出许多高产、优质、抗病性强的新品种。黄瓜是喜温植物。温度过高或过低往往会导致授粉受精不良，进而影响产量和育种工作的顺利进行。为解决第一代黄瓜杂交品种制备中父本、母本花期不足、第一代杂交纯度低等问题，成武市蔬菜局该县调查了黄瓜花粉在适宜培养基上的萌发情况，对不同发育阶段的花粉萌发情况和花粉的耐贮性进行了研究，为了解最佳授粉时间和花粉的耐贮性提供了可靠的依据和方法。 1.材料与方法1.实验材料(1)品种以天津市黄瓜研究所成功培育的第一代黄瓜杂交种“津研3号”开花种子品系为实验材料。 (2)主要试剂15%蔗糖溶液、100mg/kg硼酸溶液。 （3）主要仪器电子显微镜、双凹载玻片、培养皿、镊子、干燥器、冰箱、分析天平。 (4)溶液的制备用15mg蔗糖+0.1mg硼酸配制100mL培养基。 2 试验方法(1)花粉采集上午采摘当天开花的黄瓜雄花，取出花药放入干燥器中3-4小时，然后取出，用镊子松开花粉并挑出杂质。 (2)花粉保存将所得花粉等分为2份，在不同条件下保存。 一般室温保存，将一份花粉放入指管中，室温保存。 低温保存，将另一份花粉放入指管中，放入冰箱保存，温度控制在4左右。 (3)花粉萌发本实验采用液体培养基：15%蔗糖+100 mg/kg硼酸。将培养基放入高压灭菌器中灭菌20分钟，然后将3-4滴培养液滴入无菌室的双凹载玻片凹槽中，并用刷子蘸取少许花粉，均匀地撒在培养液表面（注意：不要搅动，以免花粉混在液体中，因缺乏空气而影响其发芽，且由于花粉深浅不一，因光线折射而难以观察）在显微镜下检查时）。处理后，在相同温度下培养2-3小时，在显微镜下观察，记录其发芽率并比较其发芽能力。由于一天中气温和花龄随着时间的推移而变化，即气温从低到高再到低，花龄从幼到壮到老的变化。从图1可以看出，采花期当天花粉粒的萌发有两个高峰，即上午和下午16:00左右，花粉萌发会因中午高温而受到阻碍。因此，人工辅助授粉后，将载玻片放入底部有少量蒸馏水的培养皿中（注意不要让水淹没载玻片），盖上培养皿，在室内培养。 2至3小时。在10 倍电子显微镜下检查三个不重叠的视场。将花粉管长度超过花粉直径的花粉视为已发芽花粉，统计花粉总数和已发芽花粉数，然后计算花粉发芽率。 (4)花粉耐贮性从花粉采集之日起，每天采集花粉并培养，考察其发芽率。 2 结果与分析1 贮藏温度和时间对采花当日花粉萌发率的影响。采花当日8:00、12:00、16:00将花粉均匀撒在培养基上。下午10:00、16:00左右进行，但要避开中午高温时段。 2 采花后花粉活力的变化随后，研究人员在每天早上8：00观察花粉活力的变化。从表1可以看出，随着时间的推移，花粉的发芽率和伸长率均呈下降趋势。这也说明储存的花粉应尽快使用。 3、不同贮藏条件和贮藏天数对黄瓜花粉萌发的影响。在合适的培养液上，从采花当天开始，然后每天8:00采摘花粉，在不同温度下同时培养，观察发芽率并进行比较。结果表明，采花当日黄瓜花粉粒的发芽率最高，随着贮藏天数的增加发芽率逐渐下降，贮藏第二天仍保持较高的活力，但发芽率随贮藏天数的增加而逐渐下降。常温保存的花粉第3天发芽低温保存的花粉第3天的发芽率较第2天略有下降。黄瓜花粉的寿命很短，但在低温冰箱保存时，花粉粒的发芽能力持续很长时间。

因此，为了授粉时有充足、旺盛的花粉，可在授粉当天上午采摘雄花直接用于授粉。若父母在此花期不见面，因花前1天花粉粒已成熟，有发芽能力，可在开花前1天下午采摘泛黄的雄花蕾，装入塑料袋中或纸袋密封保存，1818、20为宜；根据Hayase在1961年对开花后贮藏温度和湿度对黄瓜花粉萌发影响的研究表明，在10的低温和高湿度条件下贮藏时，黄瓜的花粉萌发能力可以持续较长时间。 3、讨论与总结1黄瓜花粉萌发在15%浓度蔗糖+100 mg/kg硼酸液体培养基中具有较高的萌发能力。但为防止花粉萌发时花粉粒破裂，培养基中应添加少量Ca2+进行保护。这说明该液体培养基适合黄瓜花粉萌发。 2 总体而言，黄瓜花粉的寿命极短，在低温保存时，开花后的花粉可以长期保持活力。因此，花后应及时进行人工辅助授粉，并选择合适的授粉时间。 3、要想建立一套完整的黄瓜花粉适宜萌发条件及其活力持续时间的实验，就必须有合适的实验方法，并利用该方法进行生理学、生物化学、和遗传学。这也有利于新型杂交种的开发。育种与稳定育种同时，还可以与诱变育种相结合，加速育种进程。本实验将黄瓜花粉在不同温度下保存，并在室温下培养，测定其发芽率，作为黄瓜生殖生长阶段的实验之一，解决了育种工作中的一些问题。在此方法的基础上，有关遗传背景和其他生殖时期相关性的实验还有待探索。