灵芝菌种扩制母种转管方法

灵芝母种转管技术

分离保存的母种数量少，需要扩大繁殖成再生母种，以满足原种生产的需要。母种是菌种生产的基础，必须纯度高，生命力强。凡是保存时间长，正在老化的母种，都要复壮后才能使用。在无菌条件下，将斜面菌丝体移植到空白斜面上的方法称为试管转移。其程序是：

1.选取新鲜灵芝斜面1株，借酒精灯火焰顺时针方向松开棉塞并稍向外移动，然后将棉塞夹在右手小指和无名指根部取下。同时拿起接种刀在垂直火焰上烧，慢慢斜烧至接种时手柄可能伸入试管的部分，反复烧几次，贴在管壁上冷却，从斜面底部纵向切开1-2次，切去菌苔。取出接种刀放在接种工具架上换成接种锄头，如上烧。从下到前交叉切几刀，整个斜应变会分成很多方块。也可以用接种钩将其纵横切成小块，塞住原棉塞，将切好的斜菌放在左手手掌和食指之间。取一个空白斜面，放在左手中指和无名指之间，紧贴斜面应变试管，对准管口，拧开棉塞。

2.手拿接种铲或接种刀，按上述方法灼烧灭菌。

要使试管口靠近火焰并稍微向下倾斜，需要进行以下操作。

3.用无名指和右手小指根部夹住应变管的棉塞，用小指根部和手掌夹住空白倾斜的棉塞，轻轻拉下。

4.将烧过的接种刀放入空白斜面，贴在管壁上，来回移动，冷却后取出放入菌种试管中，挑一小块有琼脂的菌苔，慢慢取出快速放入空白斜面试管中，将菌块放在斜面中心。

5.烧试管口，将棉塞塞在火焰旁接种的倾斜试管上。

6.把刀烧好消毒后放回架子上，把塞子拨紧。然后重新取空白斜面放在左手应变试管旁边，比如连接前面的第二个斜面。这样，直到所有的斜面都连接起来。一般每个斜面都有30个以上的空白斜面。

然后在试管顶部贴上标签，注明名称、菌株编号和日期，放入28度培养箱中培养。