杜鹃花植物组织技术要点

1 杜鹃花组培基本技术环节我要创富网/July 17, 2010/News : 对于杜鹃花组培来说，通常使用的外植体是茎尖、茎节和花芽。因为花芽分化比较困难，周期长；茎尖的材料有一定的局限性，因此我国多采用茎节作为外植体进行原代培养。

杀菌处理时，杀菌能力强的氯化汞（氯化汞）易引起外植体材料褐变死亡，故不宜使用。试验表明，用饱和次氯酸钙溶液上清液或5%次氯酸钠溶液作杀菌剂效果较好，处理时间为1520分钟。为加强杀菌效果，也可加入1%克菌丹或0.1%吐温20山梨糖醇）配合使用。数据灭菌前的预处理一般用70%的酒精浸泡不超过30秒。此外，用中性洗涤剂对物料进行预处理，也能有效降低灭菌后的污染率。外植体消毒过程如下：洗衣粉浸泡20分钟，流水冲洗至清澈，70%酒精浸泡30秒，无菌水冲洗1分钟，5%次氯酸钠浸泡15分钟。分钟，用无菌水冲洗3次，每次1分钟。这样，外植体的污染率可以降低到15%以下。

杜鹃花组培所用培养基为安德森改良MS培养基：MS培养基中硝酸铵和硝酸钾的用量分别减为14，取消了碘化钾成分，铁盐用量增加一倍。由于杜鹃花原产于高山酸性土壤，因此培养基的pH值应为5.05.4。培养室温度25，光照强度3000lux，光照时间1214小时。

杜鹃花在芽诱导培养中使用的激素与普通植物不同，需要更多的活性细胞因子才能达到满意的效果。试验表明，以ZT诱导芽效果最为显着；加KT处理几乎没有丛生芽和侧芽，只有原茎尖伸长；而6BA处理会导致培养物褐变加重，效果不如对照。另外，在后续的增殖培养中，杜鹃花对细胞因子种类的要求，还是加入ZT比较好。

2ip在国外杜鹃花组培中常作为外源细胞因子使用，效果优于ZT。不过从经济角度来说，还是推荐使用ZT

2 杜鹃花的初级、次级增殖栽培

初代杜鹃花芽诱导培养物中NAA浓度不得超过0.1mg。增加LZT用量可明显促进芽诱导作用。但增加ZT浓度时，不能同时增加NAA浓度，ZTNA A值越大越好。从经济栽培角度看，一代培养适宜的激素配比为ZT5+NA A 0.01mgL。经过1个月左右的培养，发芽诱导率可达100%，发芽诱导系数为6.5MM