果树苗木微体嫁接脱毒技术

果树苗木微嫁接脱毒技术一、脱毒植株的培育

微量嫁接是果树育苗获得脱毒苗的方法之一。我国苏秦焕等(1980)以金冠苹果的幼苗为砧木，以Graves苹果茎尖分生组织为接穗进行试管嫁接，获得了无苹果茎沟病毒的苹果植株。

进行移植物亲和力研究

在人工调控条件下，试管微嫁接有助于砧木穗亲和性的研究。嫁接具有亲和性的接穗和砧木时，愈合的第一步是形成愈伤组织。许多研究人员在试管微嫁接条件下研究了各种砧木与接穗之间的亲和力，筛选出亲和力强的砧木穗组合。

解决无性繁殖生根难的问题

对于某些无性繁殖生根困难的植物品种或品种，可采用试管微嫁接的方法解决生根难的问题。例如Graves苹果，通过茎尖组培可以获得脱毒的新芽，但不能生根，只有通过嫁接才能获得完整的植株。

(2) 微体接枝法

以金冠品种的苹果幼苗为砧木，使用MSA和MSB两种培养基。 River 58是含有0.8*琼脂的固体培养基，用于胚胎萌发； MSB 是含有MS 的无机盐和维生素Bp 的液体培养基，含7% 的蔗糖？ 11的值为5.7，用于接穗顶端分生组织的生长。低温分层处理的种子去除种皮，用0.5mm次氯酸钠（10%氯）灭菌10ml，再用无菌蒸馏水漂洗3次，接种于“58培养基，25mm黑暗条件下培养15天。然后将幼苗的上胚轴和子叶去掉，移入平底试管(2.5cmx11cm)中，试管中中间开有小孔的滤纸桥，将茎尖分生组织置于砧木下胚轴与其维管组织紧密相连。茎尖分生组织接穗可取自试管培养的新梢，也可从田间取无菌新梢。嫁接后置于1614000 光照，每天27温度和811黑暗，231培养条件。

接种1周后，接穗和砧木均产生愈伤组织并完全愈合，6-50-

一周后，接穗发育成新梢，有46片叶片。此时可移入灭菌珍珠岩中，灌满Cub 58培养液，盖上烧杯保持湿度。移栽后64天内，每天将烧杯口从一侧抬高0.50%，第7天移开烧杯，2天后即可将幼苗移入消毒过的土壤中，放入生长的温室。

(3)影响微体移植成活的因素

影响微体嫁接成活的主要因素是接穗大小和取样时间。接穗成活率与接穗大小呈正相关，脱毒植株的培养与接穗尖大小呈负相关。因此，为获得脱毒植株，可采用具有2叶原基的茎尖分生组织作为接穗。一年中不同时期从田间取样的接穗成活率也不同。 11月至次年3月嫁接，成活率10%； 5月嫁接成活率70%，610月嫁接成活率每月下降10%。采用离体培养的茎尖芽作接穗时，成活率为60*，与月份无关。

微体移植技术难度大，不易掌握，离实际应用还有相当大的距离。但随着对脱毒苗需求的不断增加，预计在不久的将来，微嫁接技术将与茎尖分生组织培养一样有很大的发展。

6、抗病毒乙醚在果树幼苗解毒中的应用

抗病毒乙醚（Ribaririn）是一种人工合成的核苷类物质，对0human或1^human具有广谱作用。近年来的研究表明，在茎尖培养和原生质体培养中，在培养基中加入抗病毒乙醚可抑制病毒复制，可从感染病毒的分生组织中获得脱毒马铃薯幼苗。还对木本植物进行了一些实验，从果树幼苗中去除的病毒有葡萄扇叶病毒、苹果褪绿叶病毒、斑点病毒等。

Yamajia Hiroshi(1986)为了探索抗病毒乙醚对苹果茎沟病毒的清除作用，以添加抗病毒乙醚为培养基，培育出感染苹果茎沟病毒的试管苗。抗病毒乙醚浓度为12.5pgAnU25.0jjLg/ml，分别加入标准培养基（MS'BA）中，高压灭菌15min。处理时间为40180d和120d。有黄化现象，新芽增殖减少，时间越长，死亡个体越多；但12.5^^1^处理未见明显药害。 200(1)和2404抗病毒乙醚残留作用消失后，苹果茎沟病毒检测结果表明，80(1)以上试管苗加入抗病毒乙醚培养基传代，无论抗病毒乙醚的浓度高或低都去除了病毒，抗病毒乙醚对苹果中的苹果褪绿叶斑病毒和苹果茎沟病毒有抑制作用，在抗病毒乙醚培养基中增殖的新梢顶部部分进行传代培养时在此过程中，病毒逐渐被清除，原因是抗病毒乙醚作用于宿主的新陈代谢，从而阻止了病毒的增殖。

丑红13等。在木本植物茎尖培养中使用抗病毒乙醚代替热处理，结果葡萄扇叶病毒被去除。汉森等人。在培养苹果新梢时使用抗病毒乙醚抑制苹果褪绿叶斑病毒。抗病毒乙醚浓度为10Jxg/ml或20^^g/ml，可在2个月内有效清除所有枝条的苹果褪绿叶斑病毒。在此浓度下芽的生长没有减少，只是偶尔有轻微的萎黄病。经80^#1^抗病毒乙醚处理的枝条均出现中毒现象，而经40^8^^处理的枝条均出现轻度中毒现象。生长期喷洒抗病毒乙醚，可扩大幼苗顶部无毒区。

抗病毒乙醚的应用效果因病毒种类不同而异。目前，这种方法不可能清除所有病毒。在不久的将来，如果能研制出多种抗病毒剂，将为清除病毒、提高脱毒苗生产效率做出积极贡献。