甜菜种植技术及抗病材料筛选方法

甜菜种植技术中筛选抗病材料的方法： 室内筛选（1）温室苗土：将50%河沙和50%病土充分混合，装入40cmX60cmXl0cm的塑料盒中。

(2)实验设计：每箱11行，每种材料1行，每行20粒种子，重复4次。每个盒子都是一个块，每个块包含一个抗性品种和一个感病品种作为对照。

(3)播种时间：9月上旬至中旬。

（4）光温条件：播种后温室温度控制在18-20的品种或品系。

（5）BNYVV含量检测：11月中下旬至12月中下旬，采摘甜菜，按行称重，洗净并榨出根汁，用盐酸缓冲液（1： 20)，并取稀释液，采用酶联免疫分析(ELISA)测定各测试材料根部中的病毒(BNYVV)含量。根据BNYVV含量和苗期症状观察确定病害等级。

(6)选择和保留：供试材料的另一部分种子与母根同时培养。根据温室测量结果，选择并保留抗逆性强的材料。每种选材保留20-40粒繁殖种子，第二年入田。电阻识别。

甜菜种植技术中抗病材料筛选方法：田间鉴定（1）自然病圃鉴定（开放式）对中度病田（三级病田）进行抗病性、产量和含糖量鉴定。

（2）人工病圃识别（封闭式） 播种前，定量均匀地开沟病土，创造均匀的病害环境。 7月下旬至8月上旬在自然病园或人工病园进行实地调查，根据叶丛症状和植株病斑情况确定病害等级和抗性分级标准。计算各材料的发病率和发病指数，选择无症状或症状轻微（发病指数低）的品系。 10月上旬收获期，对各选品系逐株检查根部病害症状、维管束褐变程度、块根产量和含糖量。然后收集根部和尾部汁液，采用EIJSA法检测BNYVV浓度。根据田间病害观察调查结果，结合ELISA检测数据，选择症状轻微或无症状、ELISA值低、产量高、含糖量高的品系作为选育抗病品种的基础材料。欧美国家普遍采用温室或实验室鉴定筛选技术。这些技术的应用保证了传输介质、病毒、温湿度的一致性。实验表明，当P.betas被BNYVV感染时，P.betae的生命周期加速。这些筛选抗性基因的方法比现场鉴定更快、更可靠（Klith，1989）。由于野外生态环境的差异，很多情况下室内电阻结果与现场电阻结果不一致。虽然田间鉴定费工、费时、试验面积大、易受环境因素限制，但通过多次、重复的试验，对于育种者来说仍然是一种非常有用的方法，因为田间鉴定提供了温室和实验的重要数据。筛选过程中无法获得各供试材料的田间抗性、根产量品质、适应性等。只有室内筛选和野外鉴定紧密结合，甚至同时进行，所获得的抗病材料（基因）才更加可靠，更具有实用价值。

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