食用菌母种、原种、栽培种制作步骤

食用菌菌种的质量对食用菌的生产至关重要。菌种的质量和菌种的保存直接影响食用菌的产品质量、产量、效益和成败。因此，我们必须生产优良的食用菌菌种，必须有优良的菌种保鲜方法来保存菌种。生命力和优良性状确保菌种纯净无污染。

1.菌种生产

食用菌菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）、栽培种（三级种）三种。

1.制作母种（一级种）

1.1 菌种采集

选择健康、无病虫害的食用菌子实体。表面消毒后，将其放在无菌厚纸上，子实体鳃朝下。通风条件下放置12-24小时，子实体释放孢子后，将纸折好风干放入塑料袋中，里面放几粒干硅胶，封好口，放入冰箱冷藏2-4保存，可长期使用。

1.2 母种培养基的制作

配方：马铃薯200克，琼脂20克，葡萄糖20克，纯净水1000毫升。

将土豆切成约1厘米大小的小方块，放入1000毫升纯净水中煮30分钟，过滤，加入琼脂、0.2-0.3%磷酸二氢钾，再加入20克葡萄糖，溶解后放入试管，每支试管体积为1/5-1/4，用棉塞塞住试管口，用塑料薄膜扎紧，放入压力灭菌器中1.3kg/cm3，30分钟，当温度降至60-35度斜面时，将试管置于30，冷却后观察数日，接种无任何细菌污染，用灭菌自来水稀释孢子，移在无菌操作环境下将孢子悬液加到试管的琼脂斜面上。 25培养时易发芽长成菌丝，然后用石蜡封口，置于4-5培养箱中培养6个月。

2.制作原种（次种）

将木屑78%、麦麸20%、白糖1%、石膏1%加水调匀（100kg物料加水125kg）。然后放入大口罐瓶中至瓶肩处，将培养物压扁压紧，擦去瓶内培养物，用完好无损的塑料薄膜扎好瓶口，放入放入压力灭菌器中1.4-1.5kg/cm 灭菌1.5-2小时，降温至25进行无菌接种，用接种针从母种试验斜面挑取少量菌丝体管装入瓶中，接种后菌丝在25恒温箱中培养30天，即可长满，可作为原种（次种）使用。

3、培育品种（三级种）

栽培种是原有种的扩大和繁殖。栽培种培养基的制作与原种相同，装瓶方法相同，但由于栽培种的数量远大于原种，所以栽培种的培养需要灭菌户外活动。在专门的常压灭菌室进行灭菌，即建一个两米见方的灭菌室，用一个大铁锅，里面装满水。盆上放一块木板，瓶中的培养基整齐地堆放在木板上。以上，点火升温至100，保温10-12h，待自然冷却至手不烫手，即可转移至室内，待温度达到后即可进行无菌接种。培养基冷却至25C。一瓶750ml原种可接种约70-75瓶栽培种。接种后在25恒温环境中培养30天，菌丝长满即可作为栽培种（三级种）。原种和栽培种在菌丝体培养过程中每3天检查一次，去除被杂菌污染的菌种，做无害化处理。

2、食用菌的保鲜方法

食用菌菌种保鲜的原则是采用低温、干燥、缺氧等手段，减少菌丝体的新陈代谢，以保持菌种生理、形态、遗传等方面的稳定性。食用菌菌种的保鲜方法有很多，但对于中小型食用菌生产者来说，一些简单的地方性方法既经济又有效，效果也不错。下面介绍四种常用的食用菌亲本保存方法：

1. 低温斜面母种保存

这是最常见、最简单的保鲜方法，也是食用菌生产中最常用的菌种保鲜方法。菌体在斜面培养基上成熟后，保存在5培养箱中，每7个月移植转移一次。菌种在贮存过程中，必须保证琼脂的湿度。这种方法适用于90%以上的食物。菌种的保鲜，但不宜保存草菇菌种，因为草菇属高温菌种，应在10-12保存，4-6的低温容易引起菌丝的生长死。

斜面低温保藏法母种贮藏时间有限，需经常转管，以补充菌丝体的营养和水分。这种保存方法虽然简单易行，但缺点是对菌丝体的损伤较大，耗费大量人力。在食用菌规模化生产中，本法应与其他方法相结合，取长补短，减少转运次数。

2. 石蜡密封保存母种

将蜡纸剪成7cm见方，在高度酒精中浸泡2-3分钟，点亮酒精灯，将母种试管口在酒精灯上烤一圈，用橡皮筋将试管口扎紧浸湿蜡纸，将蜡纸完全浸入融化的石蜡液中，将蜡纸紧紧贴在试管壁上，石蜡凝固后检查有无漏气现象，保存于5培养箱中摄氏度。

3.玻璃纸密封保存母种法

将明胶15g、硫酸铜2g、亚甲蓝指示剂2滴溶于100ml热水中，配成封孔剂。将培养的母种试管口朝下蘸上封口剂，贴上灭菌后的玻璃纸。将其放入5C 的培养箱中并保存。此法可使菌种保存一年以上。

4、菌丝体液体保存法

用200克土豆、20克葡萄糖、1000毫升水配成营养液。取菌丝块放入营养液中，有菌丝的一面朝上。接种后在适宜温度下培养，置于5培养箱中。保鲜，此法成活率高，保存时间长。一般33个月生存率为91.9%，42个月生存率为88.9%。

五、粮食保鲜法

首先，选择没有病虫害的小麦，用20的水浸泡5小时，使麦粒含水量为25%，取出晒干的麦粒表面水分，放入试管中，每个试管只能装满1/3，然后用高压锅在120kg/cm的压力下保持40min。从高压锅中取出试管摇匀麦粒，滴入一滴菌丝悬液摇匀，使菌丝悬液均匀覆盖麦粒，在25的环境中培养C至大部分麦粒出现即可取出菌丝体，保存于5培养箱中。这种方法可以保存母种一年半以上。

食用菌菌种接种应严格执行无菌操作规程。放在培养箱中的细菌不

菌种保存要有标签，标签必须规范、清晰，字迹清晰可见，标签上应标明菌种的名称、菌种的代数、接种的时间等。一级种、二级种、三级种要分别保存。菌种还需专人保存，严格防止混淆，菌种保存过程中要防止不相关人员进入保存室，防至菌种污染。