母种培养基的配制

1、用具：试管、刀、天平、铝锅、棉塞、纱布、漏斗、烧杯、量筒2、常用母种培养基配方

马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）：马铃薯（去皮）200g，葡萄糖20g。琼脂20g，水1000ml，{如果需要配制250ml培养基，则马铃薯、葡萄糖、琼脂的比例为50:5:5}，也可以将葡萄糖换成蔗糖，即PSA培养基。还可以加入3g磷酸二氢钾、1.5g硫酸镁、10维生素B1，即马铃薯综合培养基。广泛应用于各种食用菌亲本的分离、栽培和保鲜。

马铃薯玉米粉培养基：马铃薯（去皮）200g、蔗糖20g、玉米粉50g、琼脂20g、磷酸二氢钾1g、硫酸镁0.5g、水1000ml。本配方适用于香菇、黑木耳、猴头菇的栽培。

马铃薯大豆粉培养基：马铃薯200g、蔗糖20g、琼脂20g、大豆粉20g、碳酸钙10g、磷酸二氢钾1g、硫酸镁0.5g、水1000ml。适用于香菇、草菇。

葡萄糖蛋白胨琼脂培养基：葡萄糖20g，蛋白胨20g，琼脂20g，水1000ml。

蛋白胨、酵母、葡萄糖琼脂培养基：蛋白胨2g、酵母浸膏2g、硫酸镁0.5g、磷酸二氢钾0.5g、磷酸氢二钾1g、葡萄糖20g、维生素B1 20、琼脂20g、水1000ml。

具体步骤

1. 计算。根据选定的培养基配方，计算出各组分的用量。

2、称重。使用天平称取各种物质。土豆去皮，去掉芽眼，切掉绿色部分。对于不易称量的配料，可以用玻璃棒和烧杯称量。浓储备液，然后从中取出所需的量。

3. 准备。若制备合成培养基，先量取蒸馏水，加入琼脂，加热溶解；然后加入称量过的其他物质。为避免沉淀造成养分流失，一般添加顺序为先添加缓冲液，再依次添加常量元素、微量元素和维生素；如果所有成分都没有沉淀，也可以一起加入。

4、煮汁去滤液。土豆切成1cm见方的块或2~3mm厚的片，加入约1200ml的水烧开，然后用文火煮20~30分钟，适当搅拌使营养成分充分溶解，然后用4层预-湿纱布过滤器，取其滤液。

5、补水适量，加药溶解。用水补足至1000ml，滤液中加入琼脂，小火加热，搅拌至琼脂完全溶解，再加入葡萄糖等营养物质使其溶解，然后用pH试纸检查pH值，并用氢氧化钠和盐酸，调节合适的PH值，包装。锅内注意搅拌，防止溢出或焦底。

6. 分配试管。配制好的培养基要趁热分装。可以使用玻璃试管。先将较大的玻璃漏斗固定在滴定架上，然后接一段乳胶管和玻璃管，用弹簧夹夹住橡胶管。手握试管，加注量应为试管长度的1/4。注意分液时培养基不能粘在试管口壁上，否则会污染棉条。

7.插入卫生棉条，注意松紧程度。

8. 高压灭菌30 分钟。