食用菌菌种的“纯化”

食用菌菌种是由孢子、子实体组织和菌丝体组织萌发的纯菌丝体，用作播种材料。通常指人工培养的纯菌丝体（来自常明昌主编《食用菌栽培学》）。食用菌菌种的起源最初来源于新鲜蘑菇子实体的分离，因此在食用菌人工制种中，组织分离法已成为食用菌制种的基本方法。组织分离法的理论基础是细胞的万能性。性，即任何细胞在合适的条件下都可以发育成为新的个体。事实上，从组织中分离出来的纯菌丝体可能被细菌污染了。食用菌不纯的原因主要有两个。一方面，严格的无菌菌种分离过程是相对的，绝对无菌的环境相当难以获得，这使得分离出的菌种存在杂菌的可能；实体表面经过杀菌处理，取下了分生能力较强的中间部分，但不同蘑菇子实体中可能仍存在共生菌。

菌种不纯严重影响了食用菌的生产。一方面，会直接增加食用菌生产的污染率，增加食用菌生产成本，显着影响食用菌种植农户或食用菌生产企业的经济效益；率低的一个重要因素是，在食用菌的第一和第二周期生产中，细菌处于不利的共生状态。随着共生菌对环境适应能力的提高，杂菌将成为与蘑菇争夺包袋营养的主要对手。从而造成污染率增加，影响食用菌生产的可持续发展。

因此，菌种提纯是食用菌菌种生产中必不可少的环节。我们主要采用以下两种方法进行菌株纯化。

1.对分离出的母种进行液体二次培养

将分离出的母种接种到含有PDA培养基但不加琼脂的试管中，室温培养3天后检查。如果摇动后培养液澄清，说明该菌种是纯的，可以用于食用菌的生产，如果摇动后培养液浑浊，说明有共生菌存在，弃去。

2、对分离出的母种进行培养基分株培养

先用3mm厚牛皮纸将培养皿一分为二，每面分别倒入PDA培养基，使培养基表面刚好与纸平齐，保证表面不能流通，然后连接将母种分离到一侧，而通过气生菌丝体到另一侧的菌丝体是纯菌丝体，可用于食用菌的生产。

菌种生产是食用菌生产的源头工作，只有经过纯化的菌种才能实现食用菌的高效生产。