灵芝菌种保藏七法

灵芝菌丝容易木质化。为了保持灵芝菌种的新鲜和优质，必须对菌种进行适当的保存，减缓灵芝菌种的新陈代谢速度，避免灵芝菌种的老化和死亡。一般来说，菌种应保存在清洁、干燥、冷冻、低温、缺氧的环境中。详细介绍以下方法： 1、试管斜面低温（冷藏）贮藏。在母试管外包裹一层塑料薄膜或牛皮纸。也可用硅胶塞代替棉塞，防止水分蒸发，然后放入4冰箱冷藏。在此条件下，菌丝在该温度下几乎停止生长，处于“休眠”状态，新陈代谢缓慢以延长贮藏时间。保存过程中应注意几点： 1、温度不宜过低，否则斜放的培养基容易脱水变白，细菌会被冻死。 2、低温保存的菌种，每三、四个月必须转移一次。 3、存放时要经常检查卫生棉条是否受潮，否则要及时更换卫生棉条（无菌卫生棉条），以免感染细菌。 4、对于长期低温保存的菌种，使用前必须将菌种置于适宜的温度下“苏醒”、“活化”，使菌丝恢复活力。该方法简单易行，设备仪器简单，适用范围广。科研单位和栽培生产单位均可采用菌种低温保藏。但由于试管转移频繁，传代过多会使菌种发生降解，费时费力。 2、石蜡保存法：将待保藏的灵芝菌种转移至cpda培养基斜面，在25左右恒温培养7天左右，然后用液体石蜡密封保存。石蜡应该是化学纯的。先在121高压灭菌30-60分钟，连续灭菌两次，然后用灭菌吸管倒在斜坡上。存放于室内干燥处或冰箱内，用石蜡密封，隔离菌丝与空气接触，防止水分蒸发，减缓菌种新陈代谢，延长菌种贮藏时间，一般可存放更长时间5年以上，也可12年移植一次。需要菌种时，从试管中取出菌丝体，移植到PDA培养基斜面进行活化培养，即可作为菌种使用。保存过程中应注意几点： 1、为防止石蜡封口后灵芝菌丝再次生长，应适当延长菌丝培养时间。 2、倒入的石蜡不能低于坡尖，否则液体石蜡挥发快，坡上的培养基容易干涸。 3、石蜡灭菌要彻底，否则菌种容易感染杂菌。 4、定期检查卫生棉条是否被污染，介质是否暴露在石蜡液面。若液面外露，应及时注入无菌石蜡。 5、菌种一定要竖放，否则卫生棉条很容易被污染。 3、密封白色胶塞保存选用与试管口径相匹配的白色胶塞，用0.2%的甲酚皂液清洗后，用95%的乙醇浸泡保存。当试管斜面布满菌丝时，在无菌条件下取下棉塞，取一个浸湿的白色橡胶塞，隔着火焰迅速插入试管口，用石蜡封口。此法与石蜡保存效果相同。一般菌种可保存数年，但最好每年移植一次。四麦桶保鲜法选用新鲜的麦桶，加适量水调节湿度，然后放入试管中，试管占试管总长度的五分之二。 57天后，当菌丝覆盖培养基表面时，将其放入真空干燥器中，吸干培养基中的水分，然后移入装有氯化钙的干燥器中，用凡士林密封，在室温下保存。室内温度。保存。此方法可将灵芝菌株的活力保存1 年以上。生产过程中注意彻底灭菌和无菌操作。五木屑保鲜菌种法选用阔叶杂木片78%、麦麸20%、白糖和石膏各1%，加适量水调湿，分装试管，占四- 试管长度的三分之一，在1.2-1.5 kg/cm2高压灭菌40分钟左右，冷却后无菌接种灵芝菌种，在适宜条件下培养10-15天。白色橡胶塞，室温或冰箱保存。这种方法只要木屑不干涸，细菌可以保持3年以上的活性。贮藏时应注意： 1、木屑只能用阔叶木屑，不能用松、杉、樟等香木。 2、水分适宜，杀菌彻底。

六块保鲜法将阔叶树切成1cm3或1cm1cm2cm的小木块，将木块用1%的葡萄糖水浸泡，浸泡，或用0.2%的磷酸二氢钾和0.3%的尿素浸泡将配制液静置2小时，然后按20%木屑和80%木块的比例混合，含水量约60%70%，混匀后放入试管中。试管底部和顶部有1-2cm厚的木屑，中间有木块。试管装好后高压灭菌40分钟。冷却后接种培养7天。然后取出，封好管口，放入冰箱冷藏。七种地下保存法在室内阴凉处挖一个洞，埋一个小罐子，罐口低于地面，四周填满，用水泥抹平并盖上盖子，待用时在塑料袋里放些生石灰用，放坛底，用薄膜包好要保存的菌种，放入坛内，盖好坛。一般每23个月转移一次。