液体菌种生产技术简介

液体菌株是在液体培养基中培养的菌株。近年来，国内外正在积极研究液体菌种的栽培和利用。与固体菌相比，具有菌种生产周期短、龄龄均匀、接种方便、与固体菌连接发酵快、适合工厂化生产等优点，受到广大种植户的欢迎。目前我国可以泡菜的食用菌有：香菇、平菇、凤尾菇、香菇、鲍鱼菇、金针菇、黑木耳、猴头菇、草菇、蜜环菌、茯苓、滑菇以及冬虫夏草等。其中以香菇、平菇应用最为广泛。 1、液体菌种的培养方法常用摇床法生产的摇瓶培养法和发酵罐生产的深层培养法。少量生产可采用摇瓶培养法。深层培养需要成套的工业发酵设备，如锅炉、空压机、空气净化系统、发酵罐等，投资较大，只适合大规模工厂化生产。但摇瓶培养投资少，设备技术简单，适合一般菌种工厂生产使用。本节主要介绍摇瓶培养的技术方法。 1、液体培养基配方（1）3%葡萄糖、2%大豆粉、1%玉米粉、0.05%硫酸镁、0.1%磷酸二氢钾、0.5%酵母粉，其余为自然pH值的水.本配方适用于多种食用菌液体培养。 (2) 可溶性淀粉3-6% 蔗糖1% 硫酸镁0.15% 酵母浸膏0.1% 其余为水调节pH值至6 (3) 玉米淀粉3% 磷酸二氢钾0.1% 玉米浆1.2% 硫酸镁0.07 % 剩下的就是水调节PH值到5 这个方子适合香菇。 (4) 玉米粉50g 麦芽汁100ml 琼脂0.5g 维生素B1 100ug 水850ml pH值自然本方适合平菇。 2. 摇瓶振荡培养技术培养基配制好后，放入容量为100mL/瓶的500mL锥形瓶中，加工0-15个小玻璃珠，加棉塞后用牛皮纸包好密封它。 /cm2压力灭菌30分钟，取出冷却至30以下，插入一块约2平方厘米的斜菌，在23-25静置48小时，然后放置置于振荡培养用的往复式振荡器上，振荡频率为80-100次/分钟，振幅为6cm-10cm。如果使用旋转振动器，振荡频率为200-220 rpm。摇床室温控制在2425，培养时间因菌种不同而异，一般7天左右。培养结束的标准是：培养液清澈透明，液体中悬浮着大量的小菌丝球，并伴有各种菌类特有的香味。 2、液体菌种的检验方法液体菌种的检验可采用感官检验和抽样检验相结合的方法。 1、感官检验可采用“看、转、闻”的步骤进行检验。看：把样品放在桌子上观察。看菌液颜色和透明度，正常发酵醪液呈黄色或黄褐色，清澈透明，菌丝颜色因菌种不同而不同，老化后颜色变深；被细菌污染的糊状物浑浊不透明。二是看菌丝的形状和大小。正常菌丝大小一致，呈球形、片状、絮状或棒状。第三，看上清液与沉淀物的比例。菌丝体比例越大越好。瓶中较好的液体菌种比例可达80%左右。四、检查pH指示剂是否变色。在培养基中加入甲基红或复合指示剂，35天后颜色发生变化，表明培养基的pH值达到4.0左右，即为发酵点；如果在24小时内变色，说明培养液的酸度因杂菌快速生长而发生剧烈变化。五、检查是否有酵母线。如果培养基与空气交界处的瓶壁上有灰色条带附着，说明是酵母菌污染所致。这称为酵母系。旋转：轻轻旋转样品瓶，观察菌丝体的特性。醪液粘度高说明菌种性能好；细的说明菌球少，不宜使用。菌丝悬浮力好，放置5分钟不沉降，说明该菌种生长能力强；反之，若菌丝容易沉淀，说明菌丝已经老化或死亡。再观察菌丝状态，大小不一，毛刺明显，说明供氧不足；如果菌丝细小光滑，或菌丝细而自溶，则说明被杂菌污染。

闻：样品旋转后，打开瓶盖，闻气味。培养的优质液体菌种均具有芳香气味；而被污染细菌的培养液则散发出酸、甜、霉、臭等各种异味。

　　2. 取样测验  可取液体菌种进行称重检查和粘度检查；生长力测定和出菇试验；化学检查，包括测pH值、糖含量和氧含量等；显微检查，包括细胞分裂状态观察、普通染色和特殊染色等。

　　三、液体菌种的使用方法

　　液体菌种可作原种使用，也可作栽培使用。

　　1. 作原种  取一支100ml。兽用注射器，去掉针尖，换一根内径1mm～2mm，长100mm～120mm的不锈钢钢管，制成一个菌种接种器。使用前，洗净接种器并用纱布包好，经高压蒸汽灭菌，冷却后抽取液体菌种即可进行接种。

　　经灭菌待接入菌种的原种瓶，先要在无菌条件下去掉棉塞，并改换无菌薄膜包扎瓶口。接种时，将针管插入瓶口上的薄膜，每瓶接种量为10mL～１5ml，要注意使液体菌种均匀分布在培养基表面，拔出针管后要立即用胶布贴封针孔，竖放在培养室的床架上进行培养。

　　2. 作栽培种或直接进行栽培  液体菌种在作栽培使用时，瓶栽的每瓶接种量为10mL～15mL；熟料袋栽的每袋接种量为，小袋10mL～15mL，大袋的20mL～30mL；开放式床栽的，每平方米接种量为500mL～1000mL，不需要接种针筒，可直接均匀洒在培养料面，或进行穴播。(中国菌业网）

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编辑：XS