食用菌母种培养基的灭菌方法

一、食用菌亲本培养基的灭菌方法

食用菌母种培养基生产中常用的杀菌方法是高压蒸汽杀菌，杀菌更彻底。具体步骤及注意事项如下：

1.选锅加水

选择便携式高压蒸汽灭菌器，向灭菌器内加水至水位标记的高度。注意：水不宜太多或太少，太少容易烫干，太多的卫生棉条容易受潮造成细菌污染。

2.加载培养基

将培养液按顺序垂直排入灭菌器内，留有排气孔，保证蒸汽流通。试管口和卫生棉条不要与锅壁直接接触，应盖上2层报纸或1层防水油纸，防止锅盖下的凝结水弄湿卫生棉条。

最后均匀拧紧盖子上的螺丝，防止漏气。

3、热力杀菌

将灭菌后装满培养基的锅放在2-3千瓦的电炉上加热。当压力升至0.05MPa时，打开放气阀慢慢放气，让压力降为零，再放气10-15MPa。分钟，待大量热蒸汽排出后，关闭放气阀，升压杀菌。

当压力升至0.11-0.12MPa时，开始计时，并调节火力，始终保持所需压力30分钟。

4.停止加热，慢慢减压

在0.11-0.12 MPa的压力下。灭菌30分钟后，停止加热，待压力自然降为0时，打开排气阀，缓慢排出余汽；然后打开锅盖，待热蒸汽冷却片刻后取出已消毒的物品。

灭菌后如继续使用，使用前应注意补充水分。若暂时不用，应将锅内余水倒掉，清洗干净，备用。

2、食用菌接种部位的消毒方法

首先清洁接种箱、接种室或接种帐篷；然后将所有器具和母种培养基放入其中，用甲醛和高锰酸钾熏蒸。药物的用量为每立方米甲醛10毫升，高锰酸钾5克。

熏蒸后的接种箱、接种室或接种棚也可用紫外线消毒。一般10立方米的空间用30瓦的紫外线灯照射30分钟。臭氧消散后，即可开始接种。

若使用超净工作台接种，先用清水和干净抹布擦拭超净工作台，再用75%酒精擦拭，放上接种器具和母种培养基，开机吹无菌空气. 30分钟。

3、消毒后食用菌菌种的培养

通过加温、通风、浇水、遮光等方式，保持栽培室（箱）温度在20-24；空气相对湿度约为60%；暗光；新鲜空气，促进菌丝体健康生长。 2-3天后，接种块上可萌发大量菌丝，7-10天后可覆盖培养基斜面。

培养期间每2-3天检查一次菌丝生长情况。如发现有细菌污染或异常生长的试管，应立即挑出并清除。

过度生长的菌株可用于进一步扩增。如暂时不用，可放入20C-40C的冰箱冷藏备用。