制作灵芝菌种应注意的事项

灵芝菌种的生产质量与灵芝的产量和品质有很大的关系。不同品系产量可相差30%-40%，子实体大小相差一倍。品种的种子性状和制种技术决定了灵芝品系的品质。物种取决于所用菌株的遗传性。在相同的制种技术和培养条件下，不同品系的产量和品质会有很大差异。菌种确定后，菌种培养质量就取决于制种技术。菌种分离方法及分离部位灵芝菌种可采用菌木分离、组织分离、孢子分离等多种方法进行分离，每种方法均可得到灵芝菌种。菌材分离时，菌丝活力强弱难以检测，分离菌种质量难以掌握。孢子分离时，由于灵芝的孢子有4种性别，可以产生以各种方式配对形成的双核菌丝。这些双核菌丝形成的子实体在产量、品质、性状等方面都会有很大差异，必须经过加工选种才适用。并且在分离组织时，肉眼可以观察到子实体长长的性状，可以随意挑选好的种菇；同时，组织分离的菌株特性稳定。因此，在生产中宜采用该方法获取菌株。灵芝子实体的不同成熟阶段和不同部位的细胞大小、含量（原生质、细胞器）和分化程度不同。幼子实体和生长子实体的细胞数量差异很小，但细胞大小相差很大，成熟子实体的细胞明显大于幼子实体的细胞。子实体长出孢子前，细胞大，其细小的非金属器官和原生质含量也多。该细胞萌发的菌丝体生命力强，种子质量好。灵芝菌丝和子实体容易纤维化，纤维状细小非金属空腔大，细胞质和细胞器含量低于幼子实体细胞。因此，在分离灵芝组织时，应在芽大、切片刚开始张开、子实体刚出现橙色（纤维化开始）时分离。分离部位应选择在菌柄基部与菌盖边缘的中间，即中间的管端，而不是菌柄与菌盖的交界处。组织分离用的切割刀一定要锋利，切一刀就可以分离。避免反复用力撕裂损坏组织。接种针经火焰灭菌后，必须冷却后方可使用。接种块大小为0.3厘米左右，不可太大也不可太小。做好菌种扩繁繁殖工作。灵芝菌丝体暴露在空气中，特别是在高温或低温条件下，表面菌丝体容易原纤维化。纤维状菌丝经膨化、分离、接种后细胞内容物少，空腔多，活力弱，生长缓慢。反复使用纤维状菌丝分离繁殖菌种会逐渐退化。因此，除了第一组分离的灵芝菌株是在倾斜试管中培养外，后续的扩繁都是使用瓶装木屑（棉籽壳）加富含纤维素和木质素的玉米粉（米糠）进行的。这样繁殖出来的菌株菌丝在培养基里面，菌丝不会纤维化。同时，纤维素是一种慢效培养基，即使菌龄再长一点（不超过两个月），也不会造成营养饥饿。培育健壮菌株要求菌株在每次分离繁殖时都不受不良破坏，从而保持优良的菌株性状和旺盛的生长潜力。具体来说，的培养温度不宜过高或过低，高温不超过30，低温不低于20；是的；所用菌龄不得超过两个月；预防接种过程中的机械伤害和烧伤；分离膨大时，应弃去表面菌丝。脱毒株的选择灵芝株系常从母体组织中带入病毒，在分离和繁殖过程中也可被病毒感染。毒株感染病毒后早期不易扩增或显现，常处于潜伏状态；但一旦菌丝活力下降，病害就容易显现，灵芝无法生长，对产量影响较大。因此，必须慎重选择脱毒株。病毒在动植物宿主细胞中繁殖。当宿主细胞死亡时，病毒被释放并进入新细胞。因此，很难用药物杀死病毒。

目前，防治病毒病的方法主要是通过提高高等动物机体的免疫能力来杀灭病毒；但植物和真菌没有免疫系统，所以预防灵芝病毒病只能通过选择脱毒株和改变培养条件，提高灵芝的生存力，增强灵芝细胞膜的封闭度来预防病毒病进入健康细胞。灵芝菌种是否被病毒感染，可以从菌种的外观特征来观察。对于被病毒感染的细菌，当菌丝生命力不是很强时，一些本应向前整齐生长的前端菌丝会长得很慢或很细，形成不规则的菌丝前端，或在菌丝前端有已经长大了在菌丝生长的区域，有健全的——两个边缘整齐的菌丝斑（实际上还有很细很弱的菌芒）。一定时间后，菌斑上的菌丝体死亡，菌斑变成黑褐色的兰花。应丢弃此类菌株。菌株是否携带病毒通常不会在生长良好的菌株中表现出来。但是可以用玉米粉或者皮含量低（低于15%）的培养基，在32-24的温度下培养，这样可以长出弱灵芝株，如果有病毒，很容易表达出来。如果取样的菌株有病毒症状，说明整批菌株可能带有病毒，最好不要使用。如需使用，应一一挑选，经鉴定确认无病毒后，在良好的培养条件下培养。防止杂菌感染杂菌，通常是因为杂原种、接种污染、湿棉条或塑料袋有微孔。原种污染往往是由于菌种培养过程中杂菌检查不严、菌龄长、培养室内阴暗、不通风、空气湿度大等原因造成的。棉花是一种隔热性能极佳的材料，消毒较难彻底，因此是各种霉菌良好的传播媒介。起初，由于卫生棉条干燥，各种细菌的孢子无法发芽长出菌丝，但后来，细菌在培养过程中呼吸散发出的水蒸气被卫生棉条吸收，从而使卫生棉条中心的各种细菌逐渐发芽和生长。久而久之，菌丝会穿透卫生棉条头，产生孢子落到细菌表面。这种情况在黑暗的培养室、通风少、湿度大的地方容易发生。因此，菌种培养期间培养室应每隔1-2天换气一次，室内地面应高于室外地面50厘米以上，室内湿度不宜超过65%（但应不能太干，否则培养基表面会失水，导致菌丝生长不良）。菌龄不超过两个月

　　提供适宜菌种生长的培养基与环境条件

　　灵芝对木质素的分解能力很强。为培育菌丝生命力强、不易衰老的菌种，最好选用硬质术屑作培养原料，如青杠标术屑等。用材质较松的木屑作培养原料时菌龄不宜太长。常用的灵芝原种培养基配方为:阔叶树术屑78% ，玉米粉10% ，麸皮 10% ，蔗糖1%，石膏粉1%。灵芝菌种培养对外界环境的要 求:无光或弱光，温度25-28℃ ，空气湿度65%左右。室内保持清洁、不阴湿，定时通风。应注意的事项