食用菌固体菌种液化技术

对于不同品种的食用菌，液体培养基扩增菌种只需4-7天；固体菌用固体培养基扩增需要20天左右，40多天。在出菇实验菌种的纯化、复壮、驯化、保鲜和运输方面，固体菌种也具有不可替代的优势。用固体菌种直接扩充液体菌种，不仅具有菌丝纯、发芽快、周期短的效果，而且操作简单、安全可靠、易于推广。本文介绍的固体菌种液化法不仅可用于液体品种的快速扩繁，也可用于少量固体菌种的快速繁殖。现介绍如下，供读者参考。 1 消毒和备种将选好的固体菌种、酒精、棉球、酒精灯、镊子、接种钩、备用菌种空瓶或茶壶等用品放入预先灭菌的接种箱中。操作人员进入接种状态，接种箱进行30分钟气雾消毒。用酒精把备用空瓶里里外外擦干净，接种钩和备用瓶口在酒精灯上“过火”备用。固体菌瓶（或袋）口用酒精浸泡消毒，打开后用酒精棉球由内向外擦拭。用接种钩刮去老菌和表面菌皮。清除细菌表面的杂物后，再用酒精棉球由内向外擦拭一遍。用接种钩轻轻刮起菌块，放入备用瓶中（挑出的菌数以覆盖液体培养基表面为宜），过热棉塞，盖住备用菌口瓶子。 2、培养菌丝：将准备好的固体菌瓶放入25的恒温培养箱中培养2-3天，以促使备用菌萌发新的菌丝。小容量培养可采用电热毯、自动恒温控制器、10A接触器、养鱼增氧机、5瓶装食用油的玻璃瓶或塑料瓶在接种箱内培养菌丝体。其中，供给的氧气在注入液体培养基前仍需要严格过滤。 3 液体培养以平菇、香菇、白灵菇、鸡腿菇一般液体培养为例：按培养容器可盛液体总量，混合2.5%玉米粉、1%面粉、0.5 %脱脂大豆粉，1%白砂糖。 0.5%多维葡萄糖、0.1%磷酸二氢钾、0.1%色拉油或0.03%泡敌（聚氧丙烯甘油）合成液体培养基，pH6.5-7。蒸汽灭菌，降温至26左右，无菌操作加入备用菌种，25恒温加氧液化。用于小容量液体菌的扩增，可将液体培养液煮沸0.2装于铝锅（无盖）中，放入玻璃瓶或5容量食用油塑料瓶（无盖）中封面）同时。接种箱内，趁热喷洒消毒液，冷却后盖紧加入瓶中，放入菌种，盖紧增氧瓶塞，将液体通风。液体菌种二次膨化可采用20吨大油桶等容器。液体配制后，直接蒸汽加热灭菌，密封冷却，无菌接种液体菌8-10kg（或固体菌1-Zkg）4-6支增氧管均匀排列，盖上电热毯，保温材料，25恒温培养4-7天。其中，菌丝体经固体菌培养后，加入液体培养液，培养24小时后产生菌球。将固体菌直接加入液体培养基中，培养2-3天即可产生菌球。 4 注意事项4.1 以上方法适用于栽培种的扩大，或液菌混合压块或活菌。如果用于培养袋注射点培养，在加入固体菌时或在使用液化菌分离固体菌渣前应加入过滤条件。 4.2 固体菌种应选择无杂菌的适龄优良菌种。最好的菌种是种在瓶子或堆肥表面的菌种，不宜用袋装实心菌种。尤其是在堆肥中心打孔培养的固体菌种，由于菌种由内向外生长，不利于菌种的纯化，不宜作为液体菌种使用。 4.3 固体菌种在整个液化过程中，必须做到“无菌操作”和“无菌操作”，才能生产出优良的液体菌种。 （文新发、润小弟/食用菌杂志社） 编辑：XS