羊肚菌的菌种制作技术

羊肚菌是世界上珍贵稀有的食用菌之一，属于高档营养品。富含蛋白质、碳水化合物、多种维生素和20多种氨基酸，尤其是有机锗含量高，具有补肾壮阳、健脑提神的作用；主治精肾不足、阳痿、性冷淡；对失眠、胃肠炎症、脾胃虚弱、消化不良、饮食不节有很好的辅助治疗作用；它还可以预防癌症、预防感冒、增强人体免疫力，在医学上具有重要的开发价值。因其功能齐全、香气独特、疗效显着，目前国内价格为每公斤800-1000元，尤其是西欧国家货源十分紧张，价格更为昂贵。由于羊肚菌不同于其他食用菌，其栽培适应性差，尤其是异地栽培稳定性差。因此，从当地羊肚菌品种中分离出的菌株能够适应当地的环境，可以避免异地采购品种的地域差异和邮寄的影响。建议种植者将当地品种分开。能适应当地环境，但也要注意羊肚菌隔年使用效果不佳，存在变异。这给大规模培育和推广带来了困难。因此，最好每年对羊肚菌菌株进行分离驯化。这也是至今未能实现商品化栽培的原因之一，如果栽培管理或环境达不到要求，是不会出菇的。这就是羊肚菌人工栽培难度之谜。

一、制种注意事项

羊肚菌的菌种特性不同于其他食用菌，菌种分离方法、育种方法和栽培管理技术也与其他食用菌有很大不同。最大的缺点是容易降解、变异、发霉。这给羊肚菌的栽培带来了很大的困难。对此，首先要控制菌株的继代培养。不论母种、原种或栽培种，若违反技术要求，再传一代将出现上述不良反应或无子实体。母种的品质只有通过原种的培育，1道工序3次的菌裂愈合才能得以保存；如果菌丝破裂3次以上又重新萌发新菌丝，分解酶就会丢失或减少。结果抗病力差，容易滋生细菌，长不出菇来。

二、母种的制作（一）培养基配方

黄豆芽500克（煮汁），白糖20克，琼脂20克，羊肚菌底50克，水1升。

黄豆芽（熟汁）500克，白糖20克，琼脂20克，水1升。

橡木屑（煮汁）500克，白糖20克，琼脂20克，水1升。

土豆200克（煮汁），白糖20克，琼脂20克，蛋白胨0.5克，牛肉膏0.5克，水1升。

蛋白胨1克，葡萄糖20克，琼脂20克，酵母膏1克，磷酸二氢钾1克，硫酸镁1克，维生素B1 1克，水1升。 pH值自然。

上述公式中的一组是可选的。将木片或豆芽加入1升水中煮30分钟，过滤取汁，补足1升剩余水，加入其他原料，煮至溶化，装入18mm180mm或20 1/5 毫米x 200 毫米试管，塞满棉塞，并在高压灭菌器中彻底消毒；保持0.68公斤的压力60分钟，自然冷却至指针恢复到开启前的原位，放在斜面上备用。

(2)菌株分离

首先，你必须具备专业的食用菌基础知识，多年的菌种分离经验和菌丝鉴定能力，然后购买必要的设备，如母种培养基、无菌接种箱、恒温培养箱、冰箱、高压灭菌器等。功率显微镜。根据当地羊肚菌的生长季节，在羊肚菌生长旺盛时分离菌种。

1、分离法。羊肚菌的分离方法与其他食用菌大不相同。它需要一种辅助菌与羊肚菌菌丝共生生长才能出菇。这种辅助菌长期在土壤中活跃，有时以孢子形式存在，有时以菌丝形式存在。对羊肚菌原基的形成和子实体的生长发育起着至关重要的作用。因此，从土壤中分离细菌比其他任何方法都更好。但是，它太难从土壤中分离出来，成功率不到万分之一，而且很难分辨。因此，只有将羊肚菌与基土分离，才能真正找到羊肚菌的结果菌丝体。新手可购买四川绵阳食用菌研究所养殖的优良山核桃母种，参加现场培训。

2、操作过程。在羊肚菌生长的周围，可以看到白色的菌丝充满了土壤。从土壤中采摘这种菌丝体既简单又成功。这里介绍两种简单的土分离方法：一种是直接土分离，另一种是浸出分离。土壤直接分离法：在羊肚菌长出的地方取出羊肚菌，取周围5厘米以内的土壤，去除表层，将土壤放入无菌接种箱中，然后放入试管培养基中对接种箱空间进行消毒。即接种箱内每立方米空间用10毫升甲醛和5克高锰酸钾，混合后产生气体进行消毒。半小时后才能操作。用接种针从地脚上挑一块黄豆大小的土，迅速放在试管中的空白培养基上，每管各放一块，用棉塞塞住，待用后取出培养。接种。提取分离法：用无菌水稀释基土，澄清后，用接种针蘸取少量溶液，滴在试管内的空白培养基上，用棉塞塞住，取出培养.分离后于12-18培养观察。 3天后菌丝体在培养基上萌发，每天仔细检查每支试管的萌发情况和变化情况。区分和了解各种杂菌是最关键的核心技术。真正的羊肚菌菌丝最初是灰白色的，生长很快，时间长了会变成棕黄色，有时还会出现菌核。母种7天盖好试管，原种和栽培种15天盖满瓶底。无论分离成功与否，都要进行栽培出菇试验，才能准确判断是否为出菇后的羊肚菌菌株。菌株分离成功后，在以后的转移过程中一定要小心，防止被杂菌感染。必须适当控制高温灭菌和接种消毒，以保证菌种的质量和成活率。 (3)转移纯化

待介质表面残留的水分干透后方可使用，否则会被细菌感染。接种需在接种箱内进行药物灭菌。从第一代纯雌性种子中挑一大块有菌丝体的培养基放在空白培养基上。每个雌性种子可接1015个。该品种只能一次种植，不能多接或多扩，否则会影响子实体的生长。

(4) 训练

接种后置于18-22避光培养。 2-3天菌丝发芽，斜面培养基7天可长出。如果不使用，请将其存放在0-3C 的冰箱中，最多可存放半年。

三、原种的制作（一）培养基配方

橡木屑50%、棉籽壳30%、麦麸15%、糖

②栎木屑75%，米糠或麦麸20%，白糖1%，石膏1%，过磷酸钙1%，土2%，pH值自然。

③稻草粉70%，麦麸25%，石膏1.5%，过磷酸钙1.5%，土2%，pH值自然。

④棉籽壳90%，木屑8%，土2%，pH值自然。

⑤玉米芯50%，木屑30%，米糠15%，石膏1%，过磷酸钙1%，土3%，pH值自然。

（二）操作过程

    按配方将原料混合均匀，加入清水，使含水量达65%时装瓶。装瓶要求松紧一致，装至瓶肩，将表面压平，洗去瓶壁内外沾染的培养基，塞上棉塞，或用塑料薄膜封口。

（三）灭菌

     高压灭菌在0.68千克压力下维持1小时，常压灭菌在100℃温度下保持6～8小时。灭菌时间不能过长或压力过高，否则会破坏其中养分。

（四）接种与培养

     接种在接种箱内经消毒后，每支母种可接种原种5～10瓶。接种后放在18～22℃温度下避光培养，3天菌丝萌发吃料，10天菌丝布满培养基表面，15～20天菌丝长满瓶底。培养期间尽量避免强光刺激，菌龄以不超过50天为好。菌丝寿命与温度有关，超过30℃以上几小时就死亡。

四、栽培种制作

（一）培养基配方

①栎木屑75%，米糠或麦麸20%，白糖1%，石膏1%，过磷酸钙1%，土2%，pH值自然。

②棉籽壳75%，麦麸20%，石膏1%，过磷酸钙1%，土3%，pH值自然。

③稻草粉75%，麦麸15%，过磷酸钙2%，土3%，pH值自然。

④玉米芯80%，米糠15%，石膏2%，过磷酸钙1%，土2%，pH值自然。

⑤农作物藤秆粉75%，米糠10%，麦麸10%，白糖1%，石膏1%，过磷酸钙1%，土2%，pH值自然。

（二）操作过程

     按配方将原料混匀后，加水调至含水量为65%，装瓶，灭菌接种，培养。操作方法同上述原种。经1个月菌丝长满瓶后就可用于生产栽培。