双孢菇制种技术方法

1、孢子分离法蘑菇孢子分离法是利用成熟子实体的有性担子孢子从子实体层自动排出的特点，在无菌条件下，在适宜的培养基上使孢子萌发成菌丝。一种获得纯种马的方法。孢子分离可分为单孢子分离和多孢子分离两种方法。由于纯菌丝体是从有性担子孢子中分离出来的（即核已核结合），生产中常采用多孢子分离法。保持菌株原有特性，单孢子分离法主要用于菌株筛选和杂交育种。孢子分离主要分为两个步骤，第一是收集孢子，第二是分离单个或多个孢子。 （一）孢子的采集1、种菇的选择采集孢子，首先要选择种菇，即子实体进行分离。一般栽培菇的要求是头鲜菇、早出菇、单生、个体强壮、子实体典型。仔细观察筛选后，在菇床做个记号，让蘑菇充分生长，直至即将折断。拍摄时，采摘蘑菇进行孢子喷射。 2. 孢子喷射收集蘑菇采收后，可用0.1%汞溶液浸泡一分钟左右杀菌，用镊子取出，用无菌水冲洗数次，然后用无菌滤纸吸干表面水分，或直接用75%酒精棉球轻轻擦拭瓶盖和菌柄进行表面消毒。然后用无菌刀剪掉多余的菌柄（约1.5-2cm即可），将蘑菇直立，菌柄朝下，插入铝丝制成的支架中，放入准备好的无菌滤纸中将钟形罩放在条带顶部（如图所示）。孢子收集集需要预先高压灭菌。将带有子实体的孢子喷射收集器置于温度为15-20的室内，约24-48小时后，无菌滤纸上可见褐色蘑菇孢子。在无菌操作下，将采集蘑菇孢子的滤纸条放入无菌空试管中，高温真空干燥，然后放入冰箱长期保存备用。 （二）孢子分离1、多孢子分离法是将多个孢子接种在同一培养基上，让它们一起萌发生长，相互缠绕，得到纯种。由于多个孢子之间的物种互补，基本可以保持亲本的稳定性。这种方法比较简单，过去在蘑菇种子生产中被广泛使用。