蛹虫草如何栽培?蛹虫草代料栽培技术


蛹虫草又名金草、蛹虫草,是一种名贵的生物药材。含有虫草素、虫草酸、虫草多糖、超氧化物歧化酶SOD和微量元素硒等多种生物活性物质,具有很高的滋补功效。下面就为大家介绍一下北虫草的栽培技术。 1. 菌株制备

优质菌株是成功高效种植的关键。蛹虫草菌种不能长期存放或分管繁殖,否则菌种容易退化变异,产量和品质会明显下降。因此,有必要保持种子和经常更新菌株。

种子生产方法是采用组织分离法。选择适应性强、发芽快、见光变色快、性状稳定、生长快、产量高的菌株进行组织分离和制种,或直接购买斜面培养基试管母种进行自繁.目前有固体菌种和液体菌种两种,其中以液体菌种接种效果较好。

(1) 液体制剂

配液比例为葡萄糖20g、蛋白胨10g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1g、维生素B1(10mg)1片、水1000mL(pH 67)。先将1 000 mL水加热升温(约40 ),倒入蛋白胨搅拌溶解,再倒入其余原料充分搅拌;然后用酸碱度试纸测试酸碱度(标准酸碱度为6-7),如果偏酸可用氢氧化钠调和,偏碱可用白醋或盐酸调和。

配制营养液的量应根据生产量灵活控制。实践证明,用移液管喷雾接种,每个培养瓶喷45毫升菌液,每瓶液态菌(指小型医用盐水瓶)可接种3740瓶;也可用蒸馏水或高压灭菌水将接种液中的菌液稀释23倍进行接种,可大大提高菌种的利用率。

(2) 装瓶

选择500mL医用生理盐水瓶或250mL小型医用生理盐水瓶作为液体培养瓶(500mL大瓶可灌300mL培养液,250mL小瓶可灌至1/2/以上).装瓶时要用玻璃漏斗,以免培养基粘附在瓶口、瓶颈或瓶壁上,引起细菌感染。瓶口用聚丙烯薄膜或化学棉或脱脂棉球密封严密。

(3) 高压灭菌

用便携式高压灭菌器消毒。将上面的培养瓶整齐地放在盆中,用干毛巾盖住瓶口,盖紧盖子。用大火加热至110,当压力表指针指向0.05时打开排气阀排出冷气,当压力表回到0时关闭排气阀;当指向0.15时,转小火,保持1.25小时后停火,待压力表归0,冷却后打开锅盖,将瓶子从锅中取出。

(4)播种

培养瓶完全冷却后即可种植,母种在无菌操作的接种箱内繁殖。将接种用的所有用品、工具、试管、培养瓶放入接种箱内进行消毒。操作人员将手从接种口伸入箱内,在消毒碗内点燃至少2袋五五消毒液,进行熏蒸消毒。立即用袖带紧紧堵住接种口,密封30 min。

操作人员洗手,用75%的酒精擦洗一次,通过套筒放入接种箱内。然后用75%的酒精将手柄和手腕一起擦洗一次,并用橡皮筋将袖子紧紧地系在手腕上,防止细菌进入盒子。点亮酒精灯,用75%酒精擦洗接种工具一次,然后在酒精灯上方燃烧消毒;拿起母种试管,用75%酒精擦洗管口,置于酒精灯火焰上方灼烧。打开母种试管,用接种工具将试管母种切成0.5mm0.5mm大小的菌块,将种子放在靠近酒精灯的无菌区,放23块在每个瓶子里。

(5) 液体菌种培养

为了有利于菌种的繁殖和菌丝的生长,装满种子的培养瓶应置于避光环境中,并在摇床上进行摇床培养。可每天24小时连续摇动或1小时左右间歇摇动一次。 每次约30 分钟。摇动培养瓶8-12天后,会有大量的絮状、片状菌丝体和菌丝球充满整个培养瓶;如果没有摇床条件,可用手摇晃瓶内液体,每1-2小时摇晃一次,持续1小时。时间也是如此。注意不要让营养液弄湿密封膜或卫生棉条。

2. 培养基原料的制备

(一)原料配方

实践证明,最好以水稻(杂交稻)为主要材料进行人工栽培,具有发芽均匀、除草快、产量高等特点。每瓶含大米30克,黄豆粉(豆粉)3克,营养液50毫升;营养液配方为水1000mL(pH 6-7)、葡萄糖25g、蛋白胨10g、磷酸二氢钾1.5g、硫酸镁1g、柠檬酸铵1g、维生素B1 2片。

(2) 例子

为提高混料和装瓶效率,可一次混料10002000瓶的原料,并准确计算主料和各种辅料的用量。

以每批1000瓶为例,配料如下。主要原料:大米30 g1 000=30 kg,豆粉3 g1 000=3 kg;辅料:水50 g1 000=50 kg,葡萄糖1 250 g,蛋白胨500 g,磷酸二氢钾150 g,硫酸镁50 g,柠檬酸铵50 g,维生素B1 100片。

3.混合

在地板上铺一块干净的塑料布,称取上述两种主要成分,倒在塑料布上,混合均匀。然后将几种辅料准确称量,倒入50公斤水中,充分搅拌使之溶解。用pH试纸测试酸度和碱度,pH值为6-7。

4.装瓶

可自制数个分别盛装33克主料(30克大米、3克黄豆粉)和50毫升液体的容器装瓶。装瓶时应先灌主料,再灌营养液。包装好后用橡皮筋封好薄膜,摇匀瓶内的原料,使固液充分混合均匀,利于发芽好,长势整齐。

5、灭菌

可在高压蒸汽烘箱中灭菌,即在121高温、1.5kg/m2压力下灭菌30分钟,冷却后即可取出;也可常压灭菌。静置8-10小时,隔夜炖锅接种。

6、接种

无菌点燃接种箱中的酒精

灯,在靠近酒精灯的安全区打开液体菌种瓶,用吸液管吸取液体菌种,每瓶以4~5 mL种量均匀喷注到培养基上,立即封口扎紧(下种量要均匀,喷注菌种尽量匀称);接好一批培养瓶后及时转入培养室(黑暗环境)进行菌丝培养;接种操作每批之间必须重新消毒,点燃起舞消毒剂2~3袋(第1箱消毒时3袋,之后2袋)。密闭30 min即达消毒效果;将接种好培养瓶整齐摆放在培养架上。

七、菌丝培养

    蛹虫草属中低温真菌类,菌丝最适宜生长温度是15~25 ℃,子座最适宜温度为18~22 ℃。要求培养室内具备调节温度、湿度和光照的基本条件;培养室放置培养架,培养架可设6~7层,层高40 cm,保证每个培养瓶都能得到光照。一般25~30 m2的房间可摆放10 000个培养瓶,可生产80 kg左右干品。

(一) 初始阶段(前5 d)

  菌丝萌发阶段要求做到“三控”:一是控光,需要黑暗环境;二是控温,培养室内温度最好控制在15~18 ℃;三是控湿,室内空气相对湿度控制在60%左右。

  接种第2天培养瓶料面上可见到点片或连片发菌;第3天菌丝已大面积展开,占领料面50%以上;第4天菌丝占领料面80%以上;第5天菌丝全部发满料面,并已开始向培养基内渗透一指左右。稀释与未稀释菌种,其菌丝萌发能力完全相同,采取稀释2~3倍方法可解决菌种不足问题。经过5 d时间培养培养瓶里菌丝很快布满整个料面。

(二)待菌丝布满料面后(5 d后)

  可将温度提高至20~23 ℃再继续培养15 d左右,菌丝就可吃透整瓶培养基,至此菌丝就完成营养生长阶段,标志菌丝体已发育成熟,开始进入生殖生长时期。

(三)进入生殖生长阶段后(接种后20 d左右)

  进行光照刺激,促进菌丝体转色。打开日光灯,进行全天24 h光照,直到蛹虫草发芽长出小子实体时,再改为白天光照14~15 h,夜晚关灯。白天温度控制在20 ℃,晚上控制在10 ℃左右,通过温差刺激能促进菌丝快速发育;室内湿度60%~65%。见光第1天,料面上菌丝出现微黄;第2天显现正黄色;第3天培养基内菌丝全变鲜黄或米黄色;第4天整瓶呈橘黄色;第5~7天,菌丝基本转完色;第7~10天,料面上出现米粒大小原基。

八、出草管理

  经菌丝体生长发育,待培养基料面有突起形成米粒状原基时,蛹虫草即行发芽出草。

(一) 扎孔透气

  将牙签或铁丝经75%酒精擦洗消毒后,在封口膜上扎6~8个通气孔,加强气体交换促使子实体的生长。

(二) 加强室内通风换气

  打开换气扇或用电风扇吹风,每天早、中、晚各通风1次,以便补充新鲜空气和排出CO2,防止CO2积累过多,子座不能正常分化影响生长发育。

(三)温湿度管理

  到了出草阶段温度和湿度对子实体的生长十分重要。温度控制在18~21 ℃。尽量使空气相对湿度提高到80%~85%。室内湿度过小时瓶内培养基容易提早失水而影响产量;若室内湿度过大时容易诱发气生菌丝,对子实体生长同样不利。可采取在地面上洒水或泼水,空间用空气加湿器增加室内湿度;无条件用空气加湿器者,可用喷雾器在空间喷雾增湿。

(四)光照管理

  生长一段时间部分瓶里的子实体有一边倒现象,这是由于蛹虫草较强的趋光性所致。因此应注意在子实体形成后可根据生长情况调整培养瓶与光源相对方向,让其受光均匀,以提高产品的品质和产量。

九、采收

  经过45~50 d的精心培育子实体长至7~8 cm,子实体呈橘红色或橘黄色棒状,顶端出现许多小刺时,表明子实体已经成熟,这时就可采收;打开培养瓶封口膜,用消毒的摄子小心夹出子实体,注意不要碰伤子实体表皮,也不要用力太大以免拉断,影响商品价值;将采收的子实体放在干净的器具内,低温烘干或在空调或电风扇下吹干,不可在太阳下晒干,以免褪色影响商品价值。晾干标准:用手一捏即碎,然后再放空气中让其回潮,再用手一捏又不碎即可,干燥好的子实体装袋密封待售。

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