猪细小病毒疫苗及免疫程序应用

猪细小病毒(PPV)是一种DNA病毒，可导致猪繁殖障碍。该病的主要特征是感染母猪，尤其是初产母猪和血清阴性经产母猪，出现流产、不孕、死胎、畸形胎、木乃伊胎、弱仔等。尤其是木乃伊胎。母猪本身除流产外不表现临床症状，其他猪感染后无明显临床症状。血清反应阴性的母猪在妊娠前半段主要通过鼻和口感染病毒，结果免疫低下的胎儿通过胎盘感染，导致疾病。猪细小病毒广泛分布于世界各地，在已报道的猪群中呈地方性流行。它还可以与许多病毒混合，如PRRSV病毒、CSFV病毒、PCV2病毒和PRV病毒。同时也可与附红细胞体、沙门氏菌、大肠杆菌等一些细菌和寄生虫混合。混合感染使该病更难控制，并给全球养猪业造成巨大的经济损失。目前，疫苗免疫是控制猪细小病毒病的主要手段。

1猪细小病毒疫苗的分类

猪细小病毒的防治主要是免疫预防。由于猪细小病毒血清型单一且免疫原性高，疫苗接种已成为控制猪细小病毒感染的有效方法。目前，用于控制猪细小病毒的疫苗主要有减毒活疫苗和灭活疫苗。这两种疫苗在国际上应用广泛，取得了很好的效果。随着分子生物学技术的发展，一种新的猪细小病毒疫苗正在研发之中。包括基因工程亚单位疫苗、基因工程活病毒载体疫苗、基因疫苗等。

1.1灭活疫苗

灭活疫苗又称死苗，是通过管理方法使病原体灭活，但仍保持其免疫原性而制成的疫苗。灭活疫苗具有安全性好、抗体产生诱导时间长、无需低温保存等优点。但灭活疫苗产生抗体较慢，不能诱导细胞免疫反应。与活疫苗相比，抗体水平较低，需要反复接种，用量大，费用高。猪细小病毒灭活疫苗的研究、开发和应用经历了30多年，至今仍是预防猪细小病毒感染的主要手段。免疫佐剂是影响猪细小病毒灭活疫苗的重要因素。Moliter等比较了14种不同佐剂对PPV灭活疫苗的效果。结果表明，以50%氢氧化铝、马来酸酐(EMA)、油水乳剂和DDA为佐剂的疫苗均可诱导猪产生高滴度抗体，而以油佐剂、SDS、L-121、氢氧化铝和油乳剂混合物为佐剂的疫苗均产生低滴度抗体。目前，制备猪细小病毒灭活疫苗常用氢氧化铝和油水乳剂作为佐剂。

Mengeling等将灭活的PPV和PRV用AEI在37下进行细胞培养增殖，然后混合，加入10%氢氧化铝制成灭活的二价疫苗进行免疫预防试验。结果表明，PPV猪细小病毒二联灭活疫苗具有良好的免疫保护效果。PRV病、猪细小病毒病和JEV病是引起母猪繁殖障碍的主要疾病。发展灭活疫苗可以简化免疫程序，减少临床应激反应，适应规模化养猪业的发展趋势。双疫苗与单疫苗的对比试验表明，双疫苗与两种单疫苗的抗体水平无显著差异。多种实验表明，两种病毒抗原同时刺激机体，互不干扰。

1.2减毒疫苗

减毒疫苗又称活疫苗，是指通过人工减毒使病原体对原宿主失去致病性，但仍保持良好免疫原性的疫苗，或由天然减毒病原体制成的疫苗。减毒疫苗免疫力强，抗体产生快，用量少，成本低，但有强毒力的可能，需要低温保存。由于猪细小病毒独特的生物学特性，目前商品化的猪细小病毒弱毒疫苗屈指可数。

PPV减毒疫苗主要有NDAL-2(细胞培养适应株)、HI株(低温细胞传代培养株)、HT-SK-C株(HT株经紫外线照射后传代培养)和N株(自然减毒株)。PPVNADL-2减毒株的早期发现和临床应用。

1.3基因工程疫苗

尽管猪细小病毒弱毒疫苗和灭活疫苗在猪细小病毒病的防治中发挥了非常重要的作用，但各种疫苗都存在不同程度的缺陷和不足。例如，减毒疫苗存在重组和毒力逆转的潜在威胁，灭活疫苗的免疫效果不稳定。因此，利用基因工程技术生产猪细小病毒亚单位疫苗是解决上述问题的好方法。因为细小病毒的免疫主要是体液免疫，所以可以用颗粒亚单位疫苗免疫。此外，细小病毒的基因组较小，易于在载体上表达。此外，体外表达的细小病毒衣壳蛋白可以自组装，能够自动形成完整的病毒样颗粒，具有良好的免疫原性。如果用活病毒载体表达，将会有更广阔的前景。随着现代生物技术的发展，特别是DNA重组技术的出现，为开发新一代疫苗提供了全新的方法。

此外，被称为“疫苗的第三次革命”的基因疫苗在疾病预防中也发挥着重要作用。基因疫苗又称核酸疫苗，赵等人对猪细小病毒核酸疫苗进行了研究。动物实验初步表明，用猪细小病毒结构基因VP1和VP2构建的核酸疫苗可诱导较高水平的体液免疫和细胞免疫，高于常规灭活疫苗。核酸的生产简单、成本低，表明其具有理想的应用前景。

2 .市场上主要销售的疫苗和推荐的免疫程序

早期猪细小病毒疫苗免疫两次，一般间隔2 ~ 3周。随着疫苗生产技术的提高，一次免疫也能取得很好的效果。免疫后，母猪在妊娠40天时用强毒攻毒，可获得完全保护。陆等对猪细小病毒母源抗体对灭活疫苗免疫效果的影响进行了研究。结果表明，母源抗体水平对疫苗主动免疫应答无明显抑制作用，但母源抗体效价低的猪与母源抗体效价高的猪主动免疫抗体应答规律不同。母源抗体效价大于1: 149.5时，抗体水平先下降后上升，上升幅度只有1 ~ 3倍。而当母源抗体小于1: 25.6时，主动免疫抗体继续上升，母源抗体阴性猪抗体上升。根据猪细小病毒的流行病学特点，哺乳后2 ~ 3天仔猪血液中可检测到母源抗体，8 ~ 14天达到高峰。母源抗体可维持20 ~ 24周，因此PPV疫苗的免疫时间应为20周左右。刘著指出，有许多头胎母猪患有猪细小病毒病。所以主要对一胎和二胎母猪进行免疫，三胎及以上母猪可以不免疫。同时，切记不要用减毒疫苗，要用灭活疫苗。公母后备猪在5月龄时与JE疫苗一起免疫。两种疫苗可分别接种于猪的颈部两侧，互不干扰。同时，间隔2周后，再次与JE疫苗一起免疫。母猪怀孕期间应避开死胎高峰期，配种后30天左右可进行免疫。对国内市场上主要销售的疫苗和免疫程序进行了综述，这将有助于养猪户更好地防控猪细小病毒病。

2.1猪细小病毒灭活疫苗

广州悦木生物科技有限公司销售，武汉科谦生物制品有限公司生产。可用于预防猪细小病毒感染。免疫期为6个月，颈部肌肉注射，2mL/剂。推荐的免疫程序为：初产母猪5-6月龄免疫一次，2-4周后加强免疫一次；经产母猪在交配前3 ~ 4周免疫一次；公猪每年免疫两次。妊娠母猪寿

吉林生物制品厂生产。可用于预防猪细小病毒引起的母猪繁殖障碍。深层肌肉注射，2mL/头。在疫区或非疫区均可使用，不受季节限制。在阳性猪场，母猪和公猪在配种前5个月至14天可以接种疫苗；阴性猪场，母猪配种前随时可以打疫苗。妊娠母猪不宜使用，屠宰前21天内禁止使用。齐鲁动物保健品有限公司猪细小病毒灭活疫苗免疫程序相同。

2.2猪细小病毒灭活油乳剂疫苗

湖北仲博生化有限公司主要成分是猪细小病毒CP-99株的抗原，用于预防猪细小病毒病。免疫期为6个月。推荐的免疫程序：

繁殖母猪和公猪在6-7月龄或配种前3-4周注射2次(间隔21天)，2mL每次都被注射到深层肌肉中；产后母猪和成年公猪每年注射一次，2mL每次都进入深层肌肉；妊娠母猪不宜使用。

2.3猪细小病毒氢氧化铝灭活疫苗

中国农业科学院哈尔滨兽医研发中心。该产品是将猪细小病毒PKZ株接种到新生仔猪的原代肾细胞中，培养增殖，将收获的毒液灭活，加入一定比例的氢氧化铝佐剂制成。

本品可用于初产母猪和公猪的免疫，预防猪细小病毒感染。推荐的免疫程序是：

疫苗接种应在母猪怀孕前几周内进行，以便在整个怀孕敏感期产生免疫力。疫苗接种必须在母源抗体消失后进行，以免干扰免疫效果。初产母猪5 ~ 6月龄母源抗体基本消失，可以接种。如果母猪不急着配种，可以延迟接种，即后备母猪7月龄以上时，接种达到满意效果。具体用法：每次配种前2 ~ 4周，初产母猪颈部肌肉接种2mL，公猪8月龄免疫，以后每年注射一次，颈部肌肉注射2mL。

3摘要

目前对猪细小病毒感染尚无有效的药物治疗，必须重视猪细小病毒的免疫预防。近年来，人们认识到疫苗是预防猪细小病毒感染和提高母猪繁殖率的一种方法。虽然灭活疫苗是安全的，但实验表明，PPV是可以被充分削弱的，即使在孕期意外接种，也不可能引起生殖障碍。建议对血清学阴性的母猪和公猪进行免疫。血清阴性的母猪只能在没有PPV的猪中发现。这时候用灭活疫苗比较好。免疫公猪，减少病毒传播的机会。美国市场上所有联邦政府批准的疫苗都是灭活疫苗。合理选择适合本猪场的PPV疫苗和免疫程序，可以减少该病造成的经济损失。随着对猪细小病毒研究的深入和生物技术的快速发展，相信在不久的将来会出现治疗该病的药物和保护性更高的猪细小病毒疫苗。