临床快速药敏实验在疫病防控中应用


随着畜牧业的不断发展,各种细菌性病害给养殖业造成的经济损失日益突出,阻碍了养殖业的快速发展。使用抗生素防治细菌性疾病已成为常规工作,但由于养殖过程中不科学、盲目滥用抗生素,细菌耐药性问题日益突出,许多菌株可耐受多种抗生素。因此,造成的危害是非常严重的。不仅降低了抗菌药物的疗效,延长了疗程,而且增加了死亡率和治疗费用,给养殖业带来巨大的经济损失。耐药菌株还可能将耐药基因从动物转移到人类,对人类健康构成潜在威胁。因此,畜牧业应合理使用抗生素,避免或减少耐药性的产生。

1. 如何快速选择对病原菌敏感的药物

1.1 实践证明,快速药敏试验能够较快速、有效地检测致病菌对多种抗菌药物的敏感性,指导临床合理用药和灵活选药。可以从本领域容易获得的药物中选择最敏感的药物,既可以缩短病程,又可以避免盲目用药,降低成本。

1.2 由于快速药敏试验在体外进行,操作较为简单,成本较低,经济、快速、有效,可监测流行病学调查,控制和预防耐药菌株的流行。

二、快速药敏试验的意义

在疫病诊治中,在分离鉴定病菌的同时,首先要进行药敏试验,及时指导养殖户进行有效防治。虽然这种快速药敏试验方法在操作规范性和结果准确性方面存在一些差异,但可以为尽早防控提供依据,控制疫情,减少死亡,为控制疫情争取时间。流行。在生产中具有非常重要的实际意义。

三、快速药敏试验操作步骤

3.1 琼脂平板制备

按照营养琼脂干粉说明书进行稀释。稀释后,将琼脂放入微波炉加热。加热后,将琼脂移至超净工作台,静置至温度降至50左右(手指所能接受的最高温度),然后开始倒液。平板,内径225px平板,每平板倒入约10ml琼脂溶液,快速混匀,倒完盖满平板底部。

3.2 药液和药敏纸的制备

3.2.1 药液配制:按药品使用说明书中的成分或饮水的浓度,每1g应加多少毫升水或多少毫克饲料,相当于多少毫升水。药液加蒸馏水。如10g药物可与50kg饲料混合,换算方法为:本品1g加蒸馏水5000ml。本溶液为药敏试验所用药液。

3.2.2 药敏纸的制备:选用质量好的定性滤纸,用普通打孔器打成直径6mm的小圆纸。取50张圆纸放入干净干燥的小瓶或小培养皿中,用单层牛皮纸扎紧或包好。在15 磅压力下高压灭菌15-20 分钟后,放入37C 培养箱或烘箱中一天以完全干燥。以每张纸的饱和吸水量为0.01ml为基准,在上述装有50张纸的小瓶中加入0.5ml的药液,不时搅拌,使滤纸均匀吸收药液.一般浸泡30分钟。同时记下药物名称,置于37培养箱中过夜。在培养箱或烘箱中的时间不宜过长,以免某些抗生素失效。青霉素和金霉素应低温真空干燥。干燥时密封。不可受潮,存放于阴凉干燥处或家用冰箱内,有效期4-6个月。

3.3病材接种

取新鲜病变组织置于超净工作台或酒精灯旁,切取新鲜组织切片无菌操作后涂于营养琼脂平板上,铺满琼脂平板整个表面,重复涂布数次确保涂层均匀。

3.4 不干胶敏感纸

用消毒过的镊子将纸片放在固体培养基表面,轻轻按压,使纸片与培养基表面充分接触。为准确观察结果,要求药敏纸片均匀分布在培养基上,排列位置适中,防止抑制圈重叠。一般每张纸中心距离应大于24mm,板中心可贴1张,四周等距贴7-9张。记住每个药物敏感盘的名称。

3.5 孵化器培养

贴好药敏纸后,将平板倒置在37培养箱中孵育24小时以上。

4.药敏试验结果的观察

五、药敏试验的选药原则

5.1 选择高敏药物时还应考虑药物的吸收途径。因为药敏试验是药液与细菌的直接接触,而给畜禽用药时,必须被机体吸收才能使药效发挥作用。并给予足够的剂量、足够的疗程,才能收到良好的治疗效果。

5.2 药敏试验结果仅供临床选择高敏药物时参考。由于动物机体、环境等因素,药敏试验与临床治疗效果的符合率一般为70-80%,不能过分依赖药敏试验。如发现疗效不显着,应及时换药。

5.3 药敏试验确定的首选药物并非一成不变。随着用药频率的增加和新特药的不断出现,细菌可能不再对原来高度敏感的药物敏感。因此,有必要定期进行药敏试验,了解田间细菌对抗菌药物的敏感性。

5.4 窄谱抗生素可以解决的问题不要选择广谱抗生素。当一种抗生素可以达到治疗效果时,不要同时使用两种药物。当必须使用两种抗生素时,应联合使用具有协同作用的药物。

5.5 避免使用过的药物或类似药物,一般不使用发病期间使用过的药物或类似药物。

六、临床病例

河南省开封市经销商送来牛奶样品进行药敏试验。

药敏试验结果

结论分析

根据药敏试片法结果分析:样品对1234、1196、9404奶样有显着影响,对8178、1612无显着影响。

4222、2354、9523、6558、8026号奶样无菌落,怀疑奶牛在临床上被下药抑制细菌生长。

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