陈焕春：伪狂犬病根除计划

伪狂犬病是当今世界上危害养猪业最严重的猪病，给养猪业造成了巨大的经济损失。大多数西方发达国家在1990年代相继制定并启动了根除该病的计划，并取得了良好的效果。该病在我国分布广泛、严重，造成巨大损失。 “九五”期间，我们承担了科技部中国生物工程发展中心生物技术研究项目“伪狂犬病基因缺失病的研制”课题。经过5年的努力，利用本实验室对我国中部病猪疫病材料进行分离鉴定，筛选出抗原性和免疫原性强、细胞增殖效价高的猪伪狂犬病病毒E A株作为亲本材料。研制出种猪用单基因缺失灭活疫苗gG、gE 2株伪狂犬病病毒，研制出用于仔猪免疫和育肥的双基因缺失减毒疫苗TK/gG和TK/gE 2株。猪。相比之下，gG和TK/gG疫苗的免疫原性和免疫效果略高于gE和TK/gE疫苗。前者更适合当前我国伪狂犬病高发期。但考虑到我国即将加入世界贸易组织（WTO），由于TK/gE基因缺失疫苗大多在欧美部分地区使用，同时考虑到我国动物出口将与未来与国际接轨，我们还开发了TK/gE基因缺失疫苗，供用户在使用时选择。同时，我们还成功开发了鉴别诊断方法：gG-ELISA（酶联免疫吸附试验）和gE-ELISA、gG-LAT（乳胶凝集试验）和gE-LAT区分病毒强弱感染。经查新和专家鉴定，上述产品为国内首次研制成功。利用基因工程表达产物建立的gG和gE乳胶凝集鉴别诊断方法也是国际首创，填补了国内外空白。最理想的鉴别诊断方法。上述基因缺陷疫苗经动物实验和大规模临床中试对比证明，在抗体产生水平高、时间快、免疫效果好等方面均优于国内外同类产品。具体地，TK/gG双基因缺失减毒疫苗可以肌肉注射或鼻内注射，用于仔猪的预免疫和病仔猪的紧急预防注射。 24小时内见效明显，具有立竿见影的疗效。针对近年来我国猪伪狂犬病的基因缺失疫苗和鉴别诊断方法的成熟技术和产品及实际情况，提出我国消灭猪伪狂犬病的方案，希望可先在规模化养猪场试行。

伪狂犬病根除计划

根据不同的猪场、不同的情况和实验室检测条件选择不同的方案和措施。

伪狂犬病病毒是一种具有高度潜伏感染的病毒，这种潜伏感染随时可能受到内外应激因素和环境变化的刺激而引起疾病暴发。由于活病毒之间存在基因交换和重组的可能性，加上猪的繁殖时间长（3-4）年，这种可能性和概率会增加，国内外都有注射弱毒疫苗爆发的例子伪狂犬病。因此，在德国等西方发达国家，严格规定种猪只允许使用灭活疫苗。美国在其伪狂犬病根除计划中还规定，种猪只允许使用灭活疫苗。基于以上特点，建议我国种猪只能使用基因缺失的灭活疫苗。我们专门研制了种猪用单基因缺失浓缩灭活疫苗。特别是单gG基因缺失灭活疫苗对病毒的免疫原性几乎没有影响。由于gG是病毒的非结构蛋白基因，gG蛋白在病毒繁殖过程中分泌到细胞培养上清液中，与病毒的免疫原性无关。该基因删除后，对病毒的免疫原性没有影响，但可作为鉴别诊断。

双基因缺失弱毒疫苗可用于育肥仔猪和货架猪。本实验室研制的TK/gG和TK/gE双基因缺失减毒疫苗均缺失了伪狂犬病病毒的主要毒力基因TK。 TK/gG缺失疫苗可用于病仔猪的应急接种，具有明显的应急和预防作用。也可用于免疫断奶仔猪和生长育肥猪，可预防各日龄猪的伪狂犬病，有明显的促生长作用。由于育肥猪的生长周期短约6个月，不存在病毒重组变异和重新赋权的风险。

（一）种猪和种猪场消灭计划

（一）未接种过疫苗的猪场，应先进行一般血清学检查。如果发现血清阳性猪，最好将血清阳性猪和血清阴性猪分组。然后血清阳性猪和血清阴性猪均注射基因缺失灭活浓缩疫苗。所有猪只一般接种一次后，每隔4-6周进行一次加强免疫。今后，血清阴性猪每六个月接种一次，血清阳性猪每4个月接种一次，然后每六个月进行一次血清学鉴别试验。所有接种疫苗的血清阳性猪将被分类为健康组。将感染血清阳性的猪分入另一组，有计划地逐步减少和淘汰野病毒感染猪，逐步达到完全健康、无野病毒感染的猪群。直到最终消灭伪狂犬病。

(2)已接种疫苗的猪场，应将疫苗全部更换为浓缩型单基因缺失灭活疫苗。免疫程序每月注射一次。每六个月进行一次血清学鉴定检查，逐步开始分组。对基因缺失疫苗血清阳性猪产生免疫力的猪视为健康，单独饲养，将感染野生病毒血清阳性猪分入另一组单独饲养，逐步消除和减少野病毒感染。猪群，最终建立一个没有野病毒感染的完全健康的猪群。

（三）上述种猪经定期免疫接种后所产仔猪留作繁育用。 100日龄时进行伪狂犬病一般血清学检查，抗体阴性者留作配种用。抗体阳性者进一步做鉴别血清学，野生病毒感染阴性者也可作种，强病毒感染者淘汰作肥猪，不能用作种猪。伪狂犬病抗体检测阴性的仔猪和野病毒感染阴性的仔猪留作100-110日龄单基因缺失伪狂犬病灭活浓缩疫苗1次配种，130-140日龄追加1次。种猪免疫方案，浓缩基因每六个月注射一次

　　（4）对种用仔猪经上述检测, 发现和分群隔离的野毒感染血清学阳性猪, 立即注射灭活疫苗或基因缺失疫苗, 最好是间隔4-6周注射2次, 作为育肥猪饲养出栏。