品种和年龄对公猪精液的影响初步研究

1 简介

公猪的好坏直接关系到生猪的生产水平，尤其是在人工授精技术日益普及的今天，能与公猪配种的母猪数量大大增加，公猪的质量就显得尤为重要。猪的好坏直接体现在精液的质量上。

公猪的精液质量通常被认为是衡量公猪繁殖力和雄性动物效果的一个代表性指标。在实施人工授精时，必须对精液质量进行检测，其常规指标包括精液量、PH值、精子密度、活力、颜色、活动率、畸形率和精子总数等；例如，精子活力是精子直线运动的测量指标，它直接关系到精子获能和受精的过程(Petrunkina et al. 2007)，而这些指标往往与物种、生产环境、季节等因素有关、年龄、营养和管理水平有关。

本试验研究了北京市生猪主流品种长白猪、大白猪和杜洛克猪的精液质量，分析了公猪品种和日龄对精液质量的影响。完善理论研究基础。

2。材料和方法

2.1 试剂和仪器

电子天平（GJ3K）、北京试剂厂6.4-8.4范围内的精密pH试纸、载玻片、盖玻片、移液器、显微镜和视频成像设备（越先MC1180+松下GX7Y-CP280）、5%易红溶液、1%苯胺黑溶液、体温计、恒温操作台、生理盐水、95%酒精、5%龙胆紫溶液、意大利DEMEI精子密度仪（型号：CCXM-018 CXM-004）、计数器。

2.2 实验动物管理及样品采集

本试验于2011年6-9月在北京中顺京生种业有限公司进行，试验动物均为正常生产用种群的公猪，饲养管理条件相同。用于测试的精液样本来自26 只杜洛克、25 只长白猪和53 只大白猪。所有参加试验的公猪都有详细的血统信息，最大日龄为39月龄，最小为11月龄。每3至4天从参加试验的公猪身上采集精液，由两名专业人员徒手采集。

2.3 精液质量的测定

2.3.1射精量(VOL)用电子天平(1g=1mL)称量。

2.3.2 精液的pH值应使用精密pH试纸在6.48.4范围内测定。用微量移液器取少量精液放在试纸上，然后与试纸色条对比，判断pH值。

2.3.3 颜色（COL）通过视觉评分观察。评分标准为：乳白色或乳白色为3级；灰白色为2 级；水样或透明为1级；血丝或颗粒状黄白色斑点为0 级[4]。

2.3.4 精子活力（MOT）利用光学显微摄像技术记录精子的活动状态，并进行人工分级。具体操作方法如下：

用移液管吸取2l精液与50l 37生理盐水混合，滴于预热好的载玻片上，盖上20x20mm盖玻片，记录两个视野中精子的运动状态在200倍光学显微镜视野下，3名实验者观看视频，采用10分制评分标准，从0到10分。100%的精子直线运动为10分； 90%为9分，以此类推计算平均值。

2.3.5 精子活力（VIA）采用伊红苯胺黑活体染色技术进行染色。在400倍光学显微镜视野下，对300个精子进行计数，计算其中所含活精子数量所占的比例。判断活死精子的标准：死精子呈红色，而活精子没有颜色，呈灰白色。

2.3.6 精子畸形率（ABN）采用龙胆紫活体染色技术，在400倍视野光学显微镜下对300个精子进行计数，对形态结构异常的精子进行计数。

2.3.7 精子密度（DEN）用精子密度计测量，精子密度由精子密度计的透光系数计算。计算公式为：精子密度（106个/ml）=透光系数1121。

2.3.8 精子总数（TOT）：精子总数（109）=精子密度射精量

2.4 数据统计分析

所有样本按使用时间6月龄和22月龄（采收公猪平均日龄从8月龄开始计算）分为三个日龄组：幼龄组（小于14月龄）、成年组（1430个月）和老年组（30个月以上）。采用SAS9.1软件的GLM程序分别对537份样本数据和品种年龄进行双因素方差分析。

3 个结果

3.1 品种对精液质量的影响

公猪品种对猪精液质量影响的方差分析结果见表1，差异显着（P

>　　方差分析结果显示精液pH值为老年组的公猪最高，射精量老年组为276.05±9.93 ml显著高于其他两组（P<0.05），精子密度壮年组为348.29±6.20 106/ml显著高于老年组的309.52±14.93 106/ml（P<0.05），总精子数结果是老年组为78.60±2.94 109显著高于青年组的69.31±3.26 109（P<0.05）但和壮年组的74.13±1.22 109差异不显著（P>0.05）。精液色泽、精子活力、精子活率和精子畸形率各月龄组间无显著差异（P>0.05）。

　　4 讨论

　　4.1 品种与精液品质的关系

　　本实验研究结果显示长白、大白射精量差异不显著（P>0.05），但是明显高于杜洛克，这个结果与陈清森（2005）和任广志（2007）的研究一致。但与孙德林等（2005）的结果杜洛克猪>长白猪>大白猪不一致，其原因可能与实验条件不同有关，即猪场的管理、环境、动物的营养和品系等不同而异。杜洛克和长白的精子密度较大白高，这与陈清明的研究一致，也与孙德林的结果大白 >杜洛克>长白不一致。而总精子最能反映公猪的精液质量和繁殖性能，由大至小排序为长白猪>大白猪>杜洛克猪（大白杜洛克差异不显著，P>0.05）。其实不论是在国内还是在国外，大部分文献都认为不同品种猪的精液品质在某些方面存在着客观上的差异是必然的，但对于哪种品种精液品质最好的认识却不能统一。朱捷等（2003）认为长白和大白在采精量、活率、精子密度三个指标上没有差异，刘得贵等（2007）研究表明射精量、精子密度和精子活力最好的都为法系皮特兰种猪，美国俄亥俄州立大学的A .Ciereszko等（2000）以大白、皮特兰和皮特杂交为三个品种研究对象，研究了射精量、射精总数、浓度和顶体酶活性三个精液质量指标。结果以大白公猪的精液量和总精子数最高，分别达266.1 ml，95.1 109，而皮特兰的精液浓度最高达547.8 106/ml，皮杜杂种公猪次之，顶体酶活性没有显著差异。Smital等(2004)研究了八个不同品种的公猪在精液质量，在精液量、精子数目及精子活力这三个指标，结果为长白猪最好，杜洛克猪最差。韩国忠南国立大学的C.S. Park等（2002）研究了杜洛克和大白猪公猪精液品质的差别认为：大白猪在精液量上大于杜洛克猪。

　　4.2 月龄与精液品质的关系

　　精液质量最好的月龄研究结论也不尽相同。Cameron（1985）研究认为从18月龄开始高龄公猪的一次射精量高于低龄； Swierstra（1973）研究认为公猪在32月龄的时候一次射精量最大；而Kennedy（1984）研究认为公猪的最大射精量和精子浓度是在24～29月龄的时候。根据精子发生的生理过程一般认为壮年的公猪精液质量最好；老年公猪总精子数会下降，射精量高但精子密度低畸形率高；青年公猪的射精量和精子密度均不高。我们的结果不尽和其一致：老年组在总精子数上显著高于青年组（P<0.05），但与壮年组无显著差异（P>0.05）可能是该场生产中将精液质量较差的公猪及时淘汰，留下的老年个体精液质量较好。但精子密度壮年组为显著高于老年组（P<0.05），射精量老年公猪最高，青年组的各项指标均不高。

　　5 结论

　　由比较可见，试验中杜洛克公猪的精子密度高，但精液量少，大白则与其相反，长白的产能最多。老年组射精量最大，但精子密度不如壮年组，青年组总精子数最少。