大肠扦苗病综合防治模式及要点(猪病预防与治疗）

大肠杆菌是由某些血清型大肠杆菌引起的猪白色病的总称。它发生在不同品种的猪身上，对仔猪的危害更大。大肠杆菌具有多种血清型、复杂的抗原和较大的变异。菌株易产生广泛耐药性和多重耐药性。因此，需要使用与田间血清型一致的毒株，制成多价自灭活疫苗，与敏感药物配合使用，才能达到最佳防治效果。现将规模化猪场大肠杆菌病综合防治方法介绍如下。 1 材料与方法1.1 材料1.1.1 大肠杆菌采集于豫北某大型猪场典型的黄斑仔猪和白斑仔猪；均由河南科技大学动物科学学院预防兽医学教研室提供。 1.1.2 实验动物2日龄仔猪由河南科技大学动物科学学院预防兽医学教研室提供。 1.1.3 试验药物新霉素、环丙沙星、头孢噻呋、氟苯尼考、青霉素钾、链霉素、阿莫西林、土霉素、庆大霉素、恩诺沙星、磺胺类、甲喹、卡那霉素均由查维斯生物科技有限公司提供。 1.2 方法1.2.1 分离、病原体的培养与纯化用灭菌棉签采集病死猪直肠粪便标本，铺于麦康凯琼脂培养基上，37培养24小时，钩单、中型菌落涂片，粉红色，圆形，微凸起，边缘整齐，表面光滑，革兰氏染色，显微镜检查。将检测到的平端钝圆型G-短杆菌重新接种到MacConkey琼脂培养基上培养，并多次纯化至无菌。然后将它们作为纯菌株转移到琼脂斜面。 1.2.2菌株鉴定形态特征和培养特性：对分离菌株的形态和培养特征进行常规糖发酵和生化鉴定，对鉴定为大肠杆菌的菌株进行致病性和血清学鉴定。将生化鉴定后的菌株多点接种于2日龄仔猪皮下，每头仔猪接种量为100亿，并设对照，选择发病仔猪的大肠杆菌菌株作为致病菌。在该领域的应变。血清型鉴定：将经生理生化试验鉴定的纯培养大肠杆菌菌株培养于普通琼脂上，用0.5%碳酸盐水2 mL洗涤，2 000 r/min离心5 rain；取上清液，8 000 r/min离心10 min；取沉淀物制成菌悬液，121处理2小时，破坏K抗原，即O抗原； 4 C 保存备用。采用玻璃板凝集法和试管凝集法进行血清学鉴定，对原养殖场大肠杆菌致病菌株进行了血清型鉴定。 1.2.3 灭活疫苗的制备、检验及应用试验扩菌：取优势血清型（O O、O ）菌株各适量接种环，划线于营养琼脂平板表面，37培养20 - 22 小时；用灭菌生理盐水作为种子清洗菌落，均匀铺于琼脂平板表面，37孵育20-22小时；用灭菌生理盐水洗涤菌落，置于灭菌瓶中，用麦克法兰管法测定比浊管中含菌数，使各血清型菌液含菌数相等。灭活：混合不同血清型细菌的培养液，用灭菌生理盐水稀释至细菌总数为200.4UmL；加甲醛使菌液终浓度为0.4%，37灭活48%。 h、在此期间不断摇晃；再加入与菌液体积等量灭菌的20%氢氧化铝凝胶，最后加入硫柳汞至终浓度0.01%，混匀，测试，包装。性状及无菌试验：用肉眼直接观察灭活苗的性状；混匀后取适量灭活苗均匀铺于营养琼脂平板上，37培养3天后观察。安全检查：取小鼠10只，皮下注射灭活疫苗，0.1mL/只，1周内观察生长情况；取家兔10只，皮下注射灭活疫苗，2mL/鼠，观察2天，期间每4小时测一次体温；取妊娠母猪10头，于分娩前15天左右肌肉注射灭活疫苗，4mL/头，7天后观察。

攻毒试验：随机抽取免疫母猪和未免疫母猪的2日龄仔猪15头，将苗菌悬液分成60亿/头进行病毒攻毒，观察仔猪泌乳期生长情况。观察到的。记录发生黄痢和白痢的仔猪数及死亡情况，确定仔猪保护率。应用试验：选取豫北某养猪场健康妊娠母猪，随机分为3组：第1组免疫本灭活疫苗，分别于分娩前40天和15天肌注妊娠母猪，4mL/头；第2组接种市售多价大肠杆菌灭活疫苗作为对照；第3组未免疫作为对照。观察试验母猪所产仔猪泌乳期黄痢病和白痢的发生情况及仔猪发育情况，综合判断灭活疫苗的免疫效果。 1.2.4 致病性大肠杆菌药敏试验按常规方法进行。判定标准：抑菌圈直径大于15mm为高敏，1015mm为中度敏感，小于10mm为耐药。 1.2.5 药敏试验根据药敏试验，选择高敏药物，对免疫母猪生产的黄痢和短尾白头猪个体注射5%头孢噻呋1mL，每天1次，连续3天；霉素1 mL，每天一次，连续3 天。此外，仔猪酌情给予补液盐和电解复合维生素。 2 结果2.1 生化检验结果生化特鉴定结果为分离菌为大肠杆菌菌株。经病原菌鉴定，从原田分离到47株致病大肠杆菌。经血清型鉴定，45株致病性大肠杆菌属于O型。（2株）6个血清型，2株未分型。 2.2 灭活苗无菌试验结果静置后，将灭活苗分层。上层为透明液体，下层为乳白色沉淀物。摇匀，混合成均匀的混浊液体；营养琼脂培养基上无细菌生长。 #p#编页title#e#2.3 安全性检查结果10只小鼠和10只兔在试验期间均健康存活；妊娠母猪分娩前15天注射，7天后无异常反应，哺乳期胎仔及新生仔猪正常。 2.4 挑战测试的结果。攻毒后，免疫组新生仔猪2头（13.33%）在泌乳期发病，其中1头死亡。病死率和致死率分别为6.67%和50.00%；攻毒后，对照组新生仔猪11头（73.33%）在泌乳期发病，

其中5头死亡，死亡率和致死率分别为33．33％ 、45．45％ 。说明灭活苗对哺乳期内的新生仔猪具有明显的保护作用。2．5 应用试验结果(见表1)从表1可以看出，灭活(原场)苗对仔猪黄、白痢有明显的预防 果，且效果优于对照苗，说明原场苗对地方I生仔猪黄痢、白痢发病猪也有较强的保护作用。 2．6 药敏试验结果 13种抗菌药物中，致病f生大肠杆菌对头孢噻呋、氟苯尼考、环丙沙星和新霉素高度敏感；对恩诺沙星、乙酰甲喹、磺胺药、卡那霉素和阿莫西林中度敏感；链霉素、庆大霉素、青霉素钾和土霉素低度敏感。 2．7 治疗结果 39头患黄痢、白痢的仔猪，通过上述方案治疗，死亡2头，其余的全部康复，治愈率为94．9％。 3 小结与讨论 3．1 合理选择菌种用从猪场分离出的地方致病性大肠埃希菌优势血清型菌株制成灭活苗，免疫当地妊娠母猪，可较好地预防仔猪黄痢、白痢的发生，提高仔猪成活率，克服了普通疫苗由于血清型差异而造成的免疫效果不佳，此方法具有推广价值。在实际生产中，从各猪场分离出的菌株较多，而且不同猪场分离出的致病菌株通常也不相同。因此，要定期从发病猪群分离菌株，根据分离结果，一次性调整灭活苗中的优势菌株，且灭活苗中菌株血清型不宜太多。 3．2 选择敏感药物本场苗在实际应用中仔猪仍有发病，这可能与不同血清型菌株的致病力差异有关，而且不同地区猪致病性大肠杆菌菌株的耐药性有明显的差异。这就要求在临床治疗中进行药敏试验，选取敏感药物治疗才能达到较好的效果。 3．3 加强饲养管理加强妊娠母猪和哺乳母猪饲养管理，母猪舍要保持清洁、干燥，母猪饲喂全价饲料，饲料保持相对稳定。产前5—7 d迁人产房。分娩时用水清洗乳房及外阴部，再用0．1％ 高锰酸钾溶液消毒。弃去最初几滴初乳后再给仔猪哺乳。仔猪要做好保温工作，可以在产圈内设置红外线保温箱。做好及早开食，适时补料。一般从仔猪出生后的第7天开始，选择适口性好、营养丰富、易消化的颗粒料供仔猪自由采食，充分供给清洁饮水，可促进消化器官发育，增强抵抗力，防止下痢。断奶不要太突然，改换饲料要缓慢。适时补给铁和硒，在仔猪出生后的第2天，一次性肌注5％ 右旋糖酐铁2 mL或牲血素等；在缺硒地区，可在仔猪出生后的1—3 d内肌注0．1％亚硒酸钠一维生素E 0．5—1．0 mL，断奶时再注射1次；也可给怀孕母猪产前注射2—3 mL亚硒酸钠一维生素E，加喂抗贫血药，对仔猪黄痢、白痢有预防作用。 3．4 利用生态制剂生态制剂有利于猪肠道正常菌群的建立，不仅能预防仔猪黄痢、白痢，还可预防其他细菌性疾病的发生，同时还可以提高仔猪消化力，促进仔猪生长，提高断奶重，值得规模化养猪场"借鉴。