鸡传染性支气管炎病原分析

鸡传染性支气管炎(IB)是一种急性、高度接触传染性的呼吸道疾病，在世界范围内广泛分布，由病毒引起，仅在鸡中发生。鸡在各个年龄阶段都是易感的，喘息是幼鸡的突出症状，蛋鸡产蛋量和品质下降。如果病原体不是肾病变异株或不随疾病发生，死亡率一般很低。这种疾病的病原体有许多血清型，而且新的血清型不断出现。此外，不恰当的免疫程序往往导致免疫失败，导致该病无法得到有效控制，给养鸡业带来巨大损失。

病原体

传染性支气管炎病毒(IBV)是冠状病毒科的代表种。它是一种有包膜单链RNA的病毒，其核酸是螺旋对称的。电镜观察显示病毒颗粒略呈球形，直径80 ~ 12~24nm，有包膜。荚膜上有梨形原纤维，长12 ~ 24 nm，末端为圆形。原纤维之间的缝隙很宽，形成像皇冠一样的规则排列，因此得名冠状病毒。直接从鸡身上分离的病毒有完整的原纤维，但一些在体外传递的毒株往往缺失。

IBV核酸的长度超过27 000个碱基对，是未分段RNA病毒中最古老的基因组。李德山等(1991)分析了这种病毒的结构蛋白，发现有四种，其中分子量为90K，即纤维状蛋白(S)，合成的S1，84K，S2，51K，核衣壳蛋白(N)和30K，整合在双层膜中的膜蛋白(M)。与S1中和抗体和HI抗体有关，S2与吸附有关。

对不同地方分离的IBV野病毒进行理化特性测定，不同实验室使用的条件和得出的结论不同。上海株1在56下感染死鸡胚15 ~ 30 min仍有活性。北京分离的G22株在30分钟内已基本灭活，S株可耐受45min。认为耐热植物对种苗生产有价值。IBV病毒种的保存适合低温，在-20 ~-30可存活7年，在3 ~ 4冻干后可存活19年。

鸡胚是培育IBV常用的实验室宿主系统。将常见病害材料接种到9 ~ 11日龄鸡胚尿囊腔内进行初步分离。第二次接种往往不会导致鸡胚死亡，但随着传代次数的增加，IBV对鸡胚的致病性也会增加。这说明鸡胚死亡率增加，死亡时间较早，胚胎发育受阻，出现蜷缩胚胎或矮小胚胎。无论哪一代胚胎早期死亡，都有淤血和出血，但后期胚胎死亡或存活则无此变化。第二代可以出现死胚胎。具有卷曲胚胎或矮小胚胎的次级视觉分离物可发生在第2至第7代，而具有80%卷曲胚胎的次级视觉分离物具有更多的次级代，从第7至第22代不等。

卷曲的胚胎：鸡胚的脚紧贴头部，移动缓慢或不能自由移动；打开蛋壳后，可以看到羊膜增厚，表面干燥纤维化，显得混浊不透明，紧紧包裹着胚胎。羊水量也比正常胚胎少，甚至没有羊水，羽毛发育不良，所以也叫“僵胎”。

矮小胚胎：外观上看似正常，但比同龄正常胚胎小1/3 ~ 1/2，尤其是接种后6天。鸡胚的泄殖腔肿胀，囊内通常有白色脂肪样液滴，肺部有浆液性渗出物，比正常胚胎小。胆管病变呈肝紫色或杏黄色边缘，有的甚至出现局部坏死或整个肝脏变绿。另一个明显的特点是，许多胚胎尿囊液清澈透明，尿囊液量也有所增加。

鸡胚肾(CEK)细胞繁殖病毒引起合胞体形成，合胞体最终脱落死亡，导致细胞单层出现空斑。未完全或完全脱落的合胞体由于表面张力呈球形，外缘整齐，内部大部分透明空泡。当分离出野生病毒时，这种细胞病变效应通常是看不到的

只有少数IBV菌株能在非鸡源Vero细胞上生长。用胰蛋白酶(6g/m1)处理Vero细胞可大大提高IBV感染的细胞培养物的细胞融合率，如5% ~ 100%。

鸡气管上皮细胞对IBV高度敏感。细胞被感染后，伸入腔内的纤毛逐渐停止原来极快的振荡。刘福安(1983，1989)用鸡胚气管器官培养来确定IBV在CEK细胞上繁殖期间病毒是否仍然存在，并筛选抗IBV免疫原的单克隆抗体。感染后24h上皮细胞纤毛运动明显减慢，72h完全停止，并伴有细胞脱落。这种方法虽然简单，但在制备气管环时，需要事先剥离外部脂肪，用倒置显微镜观察。

IBV不凝集鸡红细胞，但能干扰新城疫病毒B1株在鸡胚中的繁殖。这些特征可用于纯化和鉴定新分离的IBV。

IBV是一种容易变异的病毒。根据病毒-血清中和试验，菌株可分为几个血清型，根据其致病性也可分为几个病理类型。至少有14种血清型。马萨诸塞州(M)型引起严重呼吸道症状，是我国主要流行毒株，可与康涅狄格州(Conn)型交叉免疫。荷兰毒株(H)能交叉免疫M、Conn、JMK、Florida和SE-17毒株，因此是我国主要疫苗毒株。IBV有四种病理类型。I型：不引起呼吸道症状，但引起喉和气管的组织学改变。型：引起明显的呼吸道症状和上呼吸道组织学改变。型：引起明显的呼吸道症状和上呼吸道、支气管的组织学改变。型：引起上述所有呼吸道症状和疾病及间质性肾炎。与M株具有相同抗原簇的毒株属于型，而与荷兰变异株具有相同抗原簇的其他毒株属于型。