黑龙江省鹅副粘病毒病的分离与鉴定

1.病原体分离

对死亡鹅肝、脾、胰腺等组织进行细菌学检查，然后按1:5常规处理。取上清液，接种9日龄SPF鸡胚，37孵育36-72h。鸡胚死亡后，置于4冰箱过夜，收集尿囊液和绒毛尿囊膜，传代三代。观察胚胎。全身布满血丝，鲜红，尤其是背部和胸部。

2决心

F 3尿囊液稀释13，336，010倍后，接种9日龄SPF鸡胚，每个稀释度接种6个卵，设对照。连续观察5天，统计死亡数，按Reed-Muench法计算。

3病毒纯化及电镜观察

F 3代尿囊液经高速离心、超速离心和等密度蔗糖梯度离心后收集。经磷钨酸负染后，在东北农业大学电镜室进行电镜观察。

4免疫保护试验

用本站研制的灭活疫苗免疫11-19日龄的鹅和鸭。3周后，将攻击菌株用F 3尿囊液13360200稀释成0.1ml/羽。测定免疫前后的抗体滴度，观察保护效果。

血清学检查

自1999年以来，对我省10个鹅场的208份鹅血清进行了新城疫和禽流感血清抗体检测。

二。1 .鹅副粘病毒病流行特征调查结果

发病只有3天，其他的都是300多天。发病率为16-100%，平均为32%，15日龄内雏鹅发病率和死亡率可达100%。鹅年龄越小，对该病越敏感(发病率和死亡率越高)，病程短，恢复少。临床特征主要是腹泻。病鹅有灰色或黄色、暗红色、绿色和暗绿色水样便，体重下降快。10日龄左右的病鹅出现摇头、咳嗽等呼吸道症状。这种病变的特征是肠粘性纤维坏死的典型症状。肠内粘有灰色或淡黄色芝麻粒，大到小蚕豆，纤维性坏死结痂，剥脱后为出血性溃疡。脾脏肿大，散在灰色坏死灶，范围从芝麻到绿豆。胰腺肿大伴灰色坏死。部分病鹅的腺胃和肌胃充血出血。大脑充血、淤血、心肌变性。肝脏淤血肿胀，质地坚硬，有数量不等、大小不一的坏死灶。

2病原体分离

细菌检查结果显示，鹅肝和脾脏分别接种羊血培养基进行需氧和厌氧培养，但肝脏和脾脏经姬姆萨染色和革兰氏染色镜检，均未发现细菌。接种后从尿囊腔中分离出病毒。三代后，死亡时间稳定在36~48小时，死胚有明显淤血和出血。分离的毒素能凝集鸡红细胞(见表1)。

分离的病毒和nd阳性血清的HI值为2 10，AI阳性血清的AGP为阴性。ND抗原鹅血清HI值为2 7，AI抗原AGP为阴性。禽流感标准阳性血清(H 5、H 9)不能抑制分离的病毒。分离出的病鹅血清HI值为2.11。

电镜观察显示病毒颗粒呈大小不一、形状不规则的多形性，有包膜。病毒颗粒的平均直径约为120纳米。