中药组方对猪大肠杆菌病的抑菌及临床治疗试验


根据中医药治疗鸡大肠杆菌病的经验,用茜草、苦参等13味中药治疗人工感染仔猪大肠杆菌病引起的腹泻。结果治愈率达90%以上。同时探讨了中药方剂对仔猪大肠杆菌耐药菌株和非耐药菌株引起的腹泻的治疗作用。

1材料和方法

1.1试验药物的中药配方由13味中药组成,包括茜草200克、苦参150克、穿心莲100克、蒲公英60克、白头翁70克、黄柏60克、地榆60克、黄芪60克、白术50克、诃子40克。按配方比例称取备用。中药材购自临沂医药公司药材供应站;丽晶注射液(批号20031120)和庆大霉素注射液(批号20030914)由山东鲁南兽药厂提供。

1.2药敏试纸由山东农业大学动物科技学院兽医药理学教研室提供(批号040221)。

1.3试验菌株采自病猪场。根据临床症状和病理检查,对诊断为大肠杆菌病的病猪进行了分离,并经细菌培养鉴定为大肠杆菌。药敏试验后,选出一株对各种抗生素敏感的菌株和一株不敏感的菌株,分别命名为大肠杆菌I和大肠杆菌i I。然后进行动物回归试验,确定为致病性大肠杆菌。然后接种到普通肉汤培养基中培养、增菌24h,每毫升肉汤中大肠杆菌活菌数不少于5108个/毫升。

1.4中药的制备:将1000克中药加水浸泡1小时,煎煮两次,第一次1小时,第二次40分钟,合并滤液,冷却过滤,将滤液加热浓缩至1毫升药液含生药1克,加入苯甲酸钠3克,混匀,冷却48小时,过滤,包装。

1.5实验动物由临沂师范学院南南养殖基地提供。将100头健康三元杂交仔猪[杜洛克(约克夏长白猪)]随机分为10组,每组10头。试验期间的饲养和管理条件基本相同。

1.6中药配方体外抑菌试验,取上述中药试液和大肠杆菌、备用。方法按《养禽场禽病检验手册》(付先强等,1992)进行试验,采用细菌药敏试验方法。

1.7实验组为空白对照组,无感染不用药;

组为大肠杆菌的阳性对照组,不进行感染。组为No的阳性对照组II结肠棒,且感染未给药;组为大肠杆菌的中药治疗组。接种大肠杆菌后,以1 ml/kg体重的剂量灌胃给药,每天2次,连续3天。组为大肠杆菌的庆大霉素处理组。在大肠杆菌型发病后,通过喷口给予庆大霉素80,000 IU/kg体重,每天两次,连续3天。组为大肠杆菌1号处理组,接种大肠杆菌1号,然后以5 mg/kg体重灌胃施骨净,每日2次,连续3天。组为大肠杆菌型中药治疗组。大肠杆菌型发病后,以1 ml/kg体重灌胃给药,每天2次,连续3天。组为大肠杆菌的庆大霉素处理组。大肠杆菌型发病后,通过管口给予庆大霉素80000 IU/kg体重,每日2次,连续3天。组为大肠杆菌2号菌丽君净治疗组。在接种2号大肠杆菌后,通过5 mg/kg体重喷口给药利君净,每天两次,连续3天。组为安全试验组,不感染,给予6倍中药治疗剂量。除了对照组和安全性试验组,对根据上述组划分的每只小猪给予1ml大肠杆菌I或大肠杆菌i I悬浮液ora

1.8感染大肠杆菌处理18小时后,各感染组出现腹泻症状,大便呈黄色或灰白色,稀薄带气泡。此时按照各组设计的给药途径给药。连续停药3天,观察3天。用药期间每日观察各组的临床症状,记录死亡仔猪数,并通过尸检和细菌培养鉴定确定死亡原因。实验结束后,空白对照组和安全试验组随机处死3头仔猪,记录病理变化,进行组织病理学检查。

1.9疗效判断标准治愈:试验期内治疗后症状全部消失。粪便,食欲,精神恢复正常。有效:除完全治愈的病猪外,试验期间未死亡者,症状明显减轻,粪便、精神、食欲均有改善。无效或死亡:在试验期间出现典型的大肠杆菌腹泻症状,但经治疗后症状无改善或死亡,经尸检和细菌培养鉴定为大肠杆菌者。

2结果和分析

2.1抑菌效果经试验,该中药配方在体外对耐抗生素和耐抗生素大肠杆菌有较好的抑菌效果。见表1。

2.2治疗结果人工感染大肠杆菌18小时后,开始出现临床症状,而空白组和安全性试验组无症状。各感染组仔猪腹泻,粪便呈黄色或灰色,有细泡,食欲下降,部分仔猪脱水。症状出现后,各组按设计的剂量和途径给药。给药后第二天,、、、四组的病情迅速得到控制,症状逐渐缓解,活动增多,大部分仔猪开始恢复食欲。但在实验、、、四组中,病情进一步恶化,严重者死于脱水。观察3天后,空白对照组和安全试验组随机处死3头仔猪。见表2。

经统计学处理,药物敏感组(、、、)之间治愈率无显著差异。

(P0.05),说明中药对耐药菌株和敏感菌株均有较好的治疗作用,中药与庆大霉素、利君净等常用抗生素(非耐药菌株)治疗效果无差异。大肠杆菌对庆大霉素和石菇精的治疗效果,第八、八组间无显著差异,但第八、八、七组间有显著差异,说明中药对耐药菌株仍有较好的治疗效果。而庆大霉素和利菌净对耐药菌株的疗效极差,治愈率与、组无显著差异。

2.3安全性试验分析:同等条件下,给予6倍中药治疗剂量,期间未发现不良反应。试验3天后,在各个器官中没有观察到异常变化,并且在安全性试验组和空白对照组之间没有可见的差异。主要器官(肝、胃、十二指肠、空肠、回肠和肾)的组织切片均未发现异常变化。说明这种药是有效的,安全的。

3总结和讨论

3.1体外抑菌试验表明,该中药对耐药菌株和非耐药菌株均有良好的抑菌效果。说明中草药经过合理配伍后具有良好的体外抗菌作用。

3.2通过以上试验,可以看出该中药配方对由耐药大肠杆菌或耐抗生素大肠杆菌引起的腹泻具有良好的治疗效果。治愈率90%以上,有效率100%。

3.3中药制剂的体外抗菌试验不如庆大霉素和石菇精,但其治疗效果无明显差异。这充分证明了中医标本兼治的优越性,体现了中医所说的“药有其专,可和而用之”的精妙之处。在南非

3.1在相同的饲养管理条件下,相同的鸡用相同的疫苗免疫后,本实验发现鸡的抗体效价也有差异,有时离散度也较大,说明鸡的免疫效果与鸡的健康状况、整齐度等生物安全措施有很大关系。从上表可以看出,H9的免疫效果比H5高1 ~ 2个滴度。

3.2表3显示在不同免疫剂量的禽流感疫苗中检测到H5HI。通过疫苗注射后不同时期部分鸡的尸检,未发现因免疫剂量增加而引起的可见吸收障碍。但攻毒试验表明,当AIV在免疫期受到攻击时,可以获得较高的保护率。当时农民主要使用二价疫苗,所以本实验没有对H5一价疫苗进行HI抗体检测。关于H9在禽流感双价疫苗中对H5免疫的协同作用,目前存在不同意见,有待进一步研究。

3.3禽流感HI抗体在免疫鸡的抗感染免疫中起主要作用。从本实验中AIHI抗体检测的结果来看

综上所述,HI抗体可作为鸡抗AIV抗体水平和整体免疫水平的参考指标。在生产中,可以根据鸡群抗AIV抗体水平的结果制定合理的免疫方案,从而有效地防控禽流感。本地区建议20 ~ 30日龄首次接种禽流感疫苗,110 ~ 120日龄第二次接种,以后每隔4 ~ 5个月加强免疫一次。

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